ربط الأبهر الدائري O مقابل انقباض الأبهر المستعرض التقليدي لنمذجة تضخم القلب الناجم عن الحمل الزائد للضغط

Summary

يصف البروتوكول الحالي تقنية جديدة لربط الأبهر في الفئران للحث على تضخم القلب الزائد بالضغط. للربط ، يتم استخدام حلقة مطاطية ذات قطر داخلي ثابت. تعد هذه التقنية الجديدة بتباين أقل وبيانات أكثر قابلية للتكرار للتجارب المستقبلية.

Abstract

يعد ربط الأبهر في الفئران أحد النماذج التجريبية الأكثر استخداما لتضخم القلب الناجم عن الحمل الزائد لضغط القلب وتحريض قصور القلب. تعتمد التقنية المستخدمة سابقا على خياطة ملولبة حول قوس الأبهر مربوطة بإبرة حادة 27 جم لإحداث تضيق. تعتمد هذه الطريقة على قيام الجراح بتشديد الخيط يدويا ، وبالتالي يؤدي إلى تباين كبير في حجم القطر. طريقة محسنة حديثا وصفها Melleby et al. تعد بتباين أقل وقابلية أكبر للتكاثر بعد الجراحة. تستخدم التقنية الجديدة ، o-ring- aortic banding (ORAB) ، حلقة مطاطية غير قابلة للانزلاق بدلا من خياطة بخيط ، مما يؤدي إلى تقليل التباين في الضغط الزائد والأنماط الظاهرية القابلة للتكرار لتضخم القلب. أثناء الجراحة ، يتم وضع الحلقة o بين الشرايين السباتية العضدية والشرايين السباتية اليسرى. يتم تأكيد انقباض ناجح عن طريق تخطيط صدى القلب. بعد 1 يوم ، يؤدي الموضع الصحيح للحلقة إلى زيادة سرعة التدفق في الشريان الأورطي المستعرض على التضيق الناجم عن الحلقة o. بعد 2 أسابيع ، ثبت ضعف وظيفة القلب من خلال انخفاض جزء القذف وزيادة سمك الجدار. الأهم من ذلك ، إلى جانب التباين الأقل في حجم القطر ، يرتبط ORAB بانخفاض معدلات الوفيات أثناء وبعد الجراحة مقارنة بانقباض الأبهر المستعرض (TAC). وبالتالي ، يمثل ORAB طريقة متفوقة على جراحة TAC شائعة الاستخدام ، مما يؤدي إلى نتائج أكثر قابلية للتكرار وتقليل محتمل في عدد الحيوانات المطلوبة.

Introduction

بينما يمكن ملاحظة تضخم القلب الفسيولوجي أثناء النمو والتمرين والحمل ، فإن تضخم القلب المرضي يستجيب لظروف إجهاد الدورة الدموية مثل ارتفاع ضغط الدم الشرياني أو أمراض صمامات القلب أو الطفرات الجينية. في البداية ، يخضع القلب لعملية إعادة تشكيل تتميز بزيادة حجم عضلة القلب وسماكة جدران البطين للحفاظ على وظيفة القلب ^1,2. من ناحية أخرى ، يرتبط إعادة تشكيل القلب المرضي بزيادة خطر عدم انتظام ضربات القلب والموت المفاجئ وارتفاع معدل الوفيات. أخيرا ، مع مرور الوقت ، يؤدي إلى تمدد البطين ، وانخفاض قوي في وظيفة الانقباض ، والتقدم النهائي إلى قصور القلب (HF) ، والذي يرتبط بارتفاع معدلات المراضة والوفيات والتكاليف المجتمعية³. لذلك ، هناك حاجة ملحة لفهم الخلفية الجزيئية من أجل تطوير استراتيجيات علاجية جديدة⁴.

ربط الأبهر هو نموذج يحاكي تضخم البطين الأيسر الناجم عن الضغط الزائد (LV) وفشل القلب في الفئران⁵. باستخدام هذه الطريقة ، من الممكن فحص الآليات المرضية لإعادة تشكيل القلب الناجم عن الضغط الزائد في الجسم الحي. تم الإبلاغ عن أول إجراء لربط الأبهر في الفئران بواسطة Rockman et ^al.6. يحدث الحمل الزائد للضغط عن طريق ربط قائم على خياطة الخيط حول الشريان الأورطي (بين الشريان السباتي العضدي والشريان السباتي الأيسر المشترك). لإنشاء تضيق قطره 0.4 مم ، يتم وضع خياطة حول إبرة 27 G والشريان الأورطي. بعد الربط ، تتم إزالة الإبرة ^6,7.

على الرغم من أن قطر الإبرة ثابت ، إلا أن ضيق الخيط يعتمد بشكل كبير على الجراح ، وبالتالي يؤثر على النمط الظاهري المستحث لتضخم القلب. بالإضافة إلى ذلك ، في الطريقة القائمة على الخيط / الخيط ، هناك درجة متغيرة من قطر التضيق بعد الجراحة ، مرتبطة بتباين كبير في معدل الوفيات ^8,9. علاوة على ذلك ، فإن تدريب هذه الطريقة يمثل تحديا ، خاصة فيما يتعلق بإيجاد المستوى المناسب والاتساق في شد الخيط. أخيرا ، في بداية التدريب ، يحدث ارتفاع معدل الوفيات أثناء وبعد الجراحة بسبب اضطراب الشريان الأورطي أو إصابة الأنسجة الأخرى ، بالإضافة إلى تباين كبير في مدى التضيق في الحيوانات الباقية على قيد الحياة.

في الآونة الأخيرة ، تم وصف إجراء محسن لربط الأبهر بواسطة Melleby et ^al.10. قدموا طريقة ORAB (ربط الأبهر الدائري) مع تباين أقل في التضيق ومستويات عالية التكرار من الضغط الزائد باستخدام حلقة مطاطية غير قابلة للانزلاق بقطر داخلي ثابت يبلغ 0.71 مم و 0.66 مم و 0.61 مم. باختصار ، يتم قطع الحلقة o مفتوحة ، وتوضع حول القوس الصاعد ، وتغلق مرة أخرى بواسطة خيوط. أبلغ علماء آخرون يستخدمون هذه الحلقات o عن تباين أقل في تضخم القلب المستحث⁹. كما لاحظوا الوفيات أثناء وبعد الجراحة ، بالإضافة إلى قابلية أفضل للتكاثر وتباين أقل في النمط الظاهري الضخامي^{المستحث 9,11}. توضح هذه المقالة إجراء هذه الاستراتيجية الفريدة في بروتوكول خطوة بخطوة. ستساعد الخبرة المشتركة في هذا التقرير العلماء الآخرين على تحسين تقنياتهم في هذا المجال.

للحث على تضخم القلب الذي يؤدي إلى قصور القلب بعد 6 أسابيع ، يوصى بإجراء عملية جراحية للفئران الذكور C57BL / 6N البالغة من العمر 12 أسبوعا. أظهرت مقارنة بعد أسبوعين من ربط الأبهر بين سلالات الفئران C57BL / 6N و C57BL / 6J اختلال وظيفي حاد في القلب وما يرتبط به من زيادة في معدل الوفيات في الفئران C57BL / 6N. لذلك ، هذه هي الأنسب لنماذج قصور القلب¹². الفئران الذكور والإناث البالغة من العمر اثني عشر أسبوعا لها حجم مثالي لتعرض الشريان الأورطي ووضع الحلقة o بأدوات خاصة.

Protocol

أجريت التجارب على الحيوانات وفقا لمبادئ اللجنة الإقليمية (وزارة الطاقة ، Landwirtschaft ، Umwelt ، Natur und Digitalisierung des Landes Schleswig-Holstein ، رقم الإذن: V242-21249 / 2020 [38-4 / 20]). تم الحصول على الفئران المستخدمة في هذه الدراسة من مصدر تجاري (انظر جدول المواد). تم الاحتفاظ بالحيوانات في ظل ظروف قياسية مع ضوء 12 ساعة ، دورة ليلية 12 ساعة. تم تقديم الماء والغذاء حسب الطلب.

1. رعاية الحيوان

1. ضع الفئران في أقفاص متخصصة بها فراش ومواد تعشيش ومكان للاختباء والوصول المناسب إلى مياه الشرب والطعام.
2. إبقاء الحيوانات تحت الرقابة والعلاج البيطري المتخصص المستمر.
   ملاحظة: بالنسبة للفئران التي طلبها موردون خارجيون ، يرجى التأكد من 7 أيام من التأقلم قبل بدء الإجراء.

2. تحضير الحلقة o

ملاحظة: يوصى باستخدام حلقة o بقطر ثابت يبلغ 0.4 مم للحث على تضخم القلب بعد 2 أسابيع. يعتمد مدى وشدة النمط الظاهري القلبي المستحث على حجم قطر الحلقة o.

1. أولا ، قم بإجراء قطع واحد من الحلقة o (انظر جدول المواد) تحت المجهر باستخدام مقص أو مشرط لتمكين وضعه حول الشريان الأورطي (الشكل 1 أ ، ب).
2. اثقب كل جانب حلقة بالقرب من القطع بإبرة متصلة ب 8-0 خياطة غير قابلة للامتصاص وسحب الخيط. قطع وترك 2-3 سم على جانب واحد و 2 سم على الجانب الآخر لربط الحلقة o حول الشريان الأورطي في الخطوة الأخيرة (الشكل 1C ، D).
3. قبل الجراحة ، خذ أداة الربط (أداة الأنواع ، انظر جدول المواد) واسحب نهاية الخيط (الذي يتم الاحتفاظ به لفترة أطول) من جانب حلقة واحد من خلال فتحة الانقباض (الشكل 1E ، F). ضع أداة الربط المساعدة مع الحلقة o المرفقة جانبا لوضعها في الخطوة التالية (الخطوة 6).
4. لتطهير الحلقة بالخيوط ، ضع الحلقة في محلول كحولي لمدة نصف ساعة. بعد ذلك ، ضعه على السليلوز حتى يجف. احتفظ بالحلقة المجففة في حوض أو علبة مغلقة حتى الاستخدام. أثناء الجراحة ، بعد سحب الخيط من خلال أداة الربط ، ضع الحلقة على سطح نظيف حتى الاستخدام.

الشكل 1: تحضير الحلقة o للربط . (أ) تقطع الحلقة o ذات القطر الثابت بمقص أو مشرط على جانب واحد. ب: صورة حلقة o. (ج) كل جانب من جوانب الحلقة o مثقوب ب 8-0 خيط البرولين. (د) حلقة O مثقوبة بخيطين. (ه) تسحب خيوط أحد جانبي الحلقة من الحلقة o عبر فتحة أداة الربط المساعدة. (و) الموضع النهائي قبل التنسيب: يتم وضع خيوط جانب واحد من خلال فتحة أداة مساعدة الربط ، بينما يتم الاحتفاظ بخيوط الجانب الآخر فضفاضة. الرجاء الضغط هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الشكل.

3. تخدير الفئران وإعداد مجال التشغيل

1. للحصول على تسكين كاف أثناء الجراحة ، قم بحقن البوبرينورفين المسكن (0.1 مجم / كجم ، انظر جدول المواد) داخل الصفاق قبل 20 دقيقة من الشروع في الجراحة.
   ملاحظة: بالنسبة للدراسة الحالية ، تم استخدام مسكنات الألم وفقا لتوصيات جمعية علوم المختبر (GV-SOLAS).
2. بعد التخدير ، قم بتخدير الفأر في غرفة الحث مع 2٪ -4٪ إيزوفلوران ممزوج ب 0.5-1.0 لتر / دقيقة من 100٪ O₂.
3. حلق الفراء على الجانب الأيسر من الصدر من الفأر المخدر. بعد الحلاقة ، ضع الماوس مرة أخرى في الغرفة المملوءة بالإيزوفلوران وانتظر التخدير الكافي قبل تنبيب الحيوان.
   ملاحظة: تظهر النقطة الزمنية المناسبة للتخدير بطء التنفس ولكنها تتجنب التنفس المفاجئ. اعتمادا على إعداد غاز الأيزوفلوران ، يستغرق الأمر 2-3 دقائق لتحقيق المستوى الصحيح من التخدير.
4. قم بتشغيل وسادة التدفئة قبل الجراحة للحفاظ على درجة حرارة جسم الحيوان (37 درجة مئوية). قم بتوصيل وسادة التدفئة بمسبار المستقيم (انظر جدول المواد) للحفاظ على درجة حرارة جسم الماوس تلقائيا.

4. التنبيب من الفئران

1. قم بإعداد الأدوات المطلوبة (الشكل 2 أ). تطهير منظار الحنجرة قبل الجراحة عن طريق وضعه في الكحول لمدة 1-3 دقائق ثم الاحتفاظ به ليجف طوال الليل.
2. قم بتمديد شريط مطاطي حول وسادة التدفئة لإصلاح الماوس بالأسنان الأمامية على اللوحة. ضع الماوس المخدر على وسادة التدفئة في وضع ضعيف.
3. ضع الشريط المطاطي فوق الأسنان الأمامية للحيوان لتمديد الرقبة على اللوحة.
4. ركز مصدر الضوء على الحلق للحصول على رؤية جيدة لفتح القصبة الهوائية للتنبيب الرغامي (الشكل 2 ب).
5. افتح الفم برفق بيد واحدة لوضع أداة مساعدة للتنبيب (منظار الحنجرة المصنوع يدويا ، انظر جدول المواد) (الشكل 2 أ [3]).
6. من ناحية أخرى وملقط صغير ، حرك اللسان برفق لمسح فتحة القصبة الهوائية.
7. استخدم هذه اليد أيضا لإدخال الأنبوب الرغامي في القصبة الهوائية. من ناحية أخرى ، لا تزال تحمل مساعدات التنبيب. للتنبيب ، استخدم قنية 22 جم (انظر جدول المواد) (الشكل 2 أ [1]).
8. قم بتوصيل موضع الأنبوب الرغامي عبر محبس ثلاثي الاتجاهات بجهاز التنفس الصناعي (انظر جدول المواد) للفئران لتأكيد موضع الأنبوب الرغامي الصحيح (القصبة الهوائية).
9. راقب التهوية المناسبة وفقا لتعليمات الشركة المصنعة (حجم المد والجزر 200 ميكرولتر ومعدل التنفس بين 100-150 نفسا / دقيقة) (الشكل 2C).
10. تأكد من عمق التخدير الكافي عن طريق فحص منعكس قرصة إصبع القدم (لا توجد استجابة منعكسة).
11. قم بتحويل إعداد التخدير إلى 2٪ إيزوفلوران ممزوج ب 0.5-1.0 لتر / دقيقة 100٪ O₂.
12. ضع مرهم العيون على العينين لتجنب الجفاف أثناء الجراحة.
13. باستخدام قطعة قطن ، قم بتطهير منطقة الجراحة 3 مرات بمحلول مطهر متاح تجاريا (انظر جدول المواد).

الشكل 2: تنبيب الماوس. (أ) أدوات التنبيب: (1) تستخدم قنية IV 22 G كأنبوب قصبة هوائية (بدون الماندرين) ؛ (2) ملقط؛ (3) منظار الحنجرة المصنوع يدويا (قنية مشوهة / مسطحة ملتصقة بعصي خشبية وشريط لاصق). ب: إجراء التنبيب على وسادة التدفئة الموضوعة. (ج) فأر متنبيب متصل بجهاز التنفس الصناعي. الرجاء الضغط هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الشكل.

5. الجراحة والتحضير لوضع الحلقة

ملاحظة: استخدم مواد وأدوات معقمة لتجنب العدوى.

1. استخدم المقص لعمل شق جلدي بطول 0.5-1 سم في منتصف الخط الفاصل بين عملية xyphoid والإبط الأيسر. استخدم الملقط لفصل طبقة العضلات عن الضلوع الأساسية ووضع اثنين من المبعدات (بطول 5 مم ، انظر جدول المواد) في الشق لكشف القفص الصدري.
2. لبدء بضع الصدر الأيسر ، قم بإجراء شق صغير (~ 1-2 مم) في العضلات الوربية بين الضلع الثاني والثالث باستخدام مقص الربيع الصغير. افتح التجويف الصدري وانشر الشق بملقط بزاوية 45 درجة.
3. ضع ثلاثة مبعدات للصدر (بطول 1.0-2.5 مم) في الشق لفتح التجويف الصدري لتحسين التصور.
4. لكشف قوس الأبهر ، حاول رفع وفصل الغدة الصعترية والأنسجة الدهنية برفق عن القوس باستخدام ملقط بزاوية 45 درجة.

6. ربط الشريان الأورطي المستعرض بالحلقة o

1. كشف قوس الأبهر مع ملقط بزاوية 45 درجة في يد واحدة. ضع ، من ناحية أخرى ، الحلقة o المتصلة بمساعد الربط عبر خيوط جانب واحد (الخطوة 2).
2. مرر الخيوط باستخدام أداة الربط تحت قوس الأبهر من الجانب الذيلي إلى الجانب القحفي من الشريان الأورطي المستعرض بين الشرايين السباتية العضدية الرأسية والشرايين السباتية اليسرى الشائعة (الشكل 3 أ).
3. خذ كلا الخيطين بين مساعد الربط وقوس الأبهر بالملقط بعناية. اسحب أداة الربط وقم بإزالتها وضع الحلقة o برفق حول القوس عن طريق سحب الخيوط على كل جانب (الشكل 3 ب).
4. بعد تحديد المواقع بنجاح ، قم بإصلاح الحلقة o بالخيوط والعقدة الجراحية. اصنع واحدة إضافية لتجنب فتح العقدة على كل جانب (الشكل 3 ج).

الشكل 3: إجراء عملية زرع الحلقة o . (أ) يتعرض قوس الأبهر لثلاثة مبعدات من 1.0-2.5 مم. يتم تمرير كل من الخيوط الطويلة من جانب حلقة واحدة تحت الشريان الأورطي. (ب) سيتم وضع الحلقة o عن طريق دفع الحلقة برفق وسحب الخيوط. (ج) الحلقة o في الموضع الصحيح ، وخيط الجمجمة واحد معقود بخيط ذيلي على كل جانب. الرجاء الضغط هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الشكل.

7. خياطة والانتعاش بعد الجراحة

1. قم بإزالة مبعدات الصدر الثلاثة (بطول 2.5 مم) من الشق.
2. إذا لزم الأمر ، تخلص من الهواء المتبقي من الصدر عن طريق ملئه بمحلول ملح متساوي التوتر دافئ بنسبة 0.9٪.
3. لكشف شق الصدر للخياطة ، خذ اثنين من المبعدات (بطول 5 مم) مرة أخرى لتثبيت الجلد على الجانب.
4. أغلق الصدر باثنين أو ثلاثة خيوط 6-0 غير قابلة للامتصاص (انظر جدول المواد) واضغط على تدفق جهاز التنفس الصناعي لمدة 2 ثانية لإعادة نفخ الرئتين.
5. قم بإزالة المبعدين وأغلق الجلد بثلاثة إلى خمسة خيوط قابلة للامتصاص 4-0.
6. قم بإيقاف تشغيل الأيزوفلوران والشاشة. عندما يبدأ الحيوان في التنفس الذاتي ، تتحرك الشعيرات ، ويمكن تشغيل ردود الفعل قرصة إصبع القدم ، وإخراج الماوس. ضع الماوس على الجانب الأيسر تحت مصباح الحرارة في وحدة العناية الخاصة به وراقبه حتى يستيقظ تماما.
7. لا تترك حيوانا دون مراقبة حتى يستعيد وعيه الكافي.
   ملاحظة: يجب أن يحصل الحيوان الذي خضع لعملية جراحية على وحدة رعاية خاصة به (قفص) لتحسين التعافي.
8. إجراء إدارة الألم مع ترامادول (1 ملغ / مل) في مياه الشرب لمدة 7 أيام والبوبرينورفين (0.1 ملغ / كغ ، 3 مرات يوميا) عن طريق الحقن داخل الصفاق لمدة 3 أيام بعد الجراحة إذا لزم الأمر.
   ملاحظة: اتبع توصيات لجنة أخلاقيات الحيوان المحلية لتسكين ما بعد الجراحة.
9. تحقق من الدواء عن طريق وزن زجاجات المياه يوميا ومشاهدة سلوك الحيوان.

8. تأكيد الانقباض الناجح والموضع الصحيح للحلقة

1. بعد يوم واحد من الجراحة ، تحقق من التضيق باستخدام الموجات فوق الصوتية عن طريق قياس سرعة التدفق القصوى على التضيق.
2. للقياسات ، استخدم تخطيط صدى القلب مع نظام الموجات فوق الصوتية ومسبار محول الطاقة بتردد 30 ميجاهرتز (انظر جدول المواد).
3. كما هو موضح أعلاه ، حافظ على التخدير باستخدام قناع بنسبة 1.5٪ -2٪ إيزوفلوران مع 0.5-1.0 لتر / دقيقة من 100٪ O₂.
4. ضع الحيوان المخدر على وسادة التدفئة في وضع ضعيف. قم بتوصيل وسادة التدفئة بمسبار المستقيم للحفاظ على درجة حرارة الجسم عند 37 درجة مئوية ± 1 درجة مئوية ، ومراقبة معدل ضربات القلب باستخدام مخطط كهربية القلب باستخدام أربعة مستشعرات مخلب الماوس (انظر جدول المواد).
5. للحصول على تصور أفضل ، استخدم كريم إزالة الشعر.
6. ينتج عن ORAB الذي تم إجراؤه بنجاح زيادة سرعة التدفق على التضيق كما تم قياسه بواسطة الموجات فوق الصوتية (~ 2400 مم / ثانية) (الشكل 4C). لهذا القياس ، ضع رأس محول الطاقة بشكل شبه خارجي على الجانب الصدري الأيمن لتوطين قوس الأبهر عن طريق التصوير ثنائي الأبعاد (2D) ("B-mode").
   1. استخدم دوبلر الملون لتصور تدفق الدم في الشريان الأورطي والقياس باستخدام الموجة النبضية دوبلر سرعة تدفق الدم على التضيق.
      ملاحظة: تظهر الفئران التي تعمل بالشام (جراحة التحكم بدون انقباض) سرعة تدفق الدم ~ 600-900 مم / ثانية. بالإضافة إلى ذلك ، ينتج عن ORAB الناجح أيضا زيادة نسبة تدفق السرعة بين السباتي الأيمن (~ 150 مم / ثانية) (RC ، الشكل 4A) والسباتي الأيسر (~ 300 مم / ثانية) LC ، الشكل 4B) في الماوس.
7. تصور الشريان السباتي الداخلي الأيمن والأيسر عن طريق التصوير ثنائي الأبعاد (2D) (B-mode). ضع رأس محول الطاقة أفقيا على الجانبين الأيسر والأيمن من الرقبة بزاوية 45 درجة واستخدم دوبلر الموجة النبضية لتحديد سرعة تدفق الدم.
   ملاحظة: في الفئران التي تعمل بالوهمية ، يكون تدفق السرعة في كلا الشريانين متشابها.

الشكل 4: تأكيد ربط الشريان الأورطي المستعرض باستخدام قياس سرعة دوبلر بالموجات النبضية في الشرايين السباتية. أ: إشارات سرعة دوبلر ذات الموجة النبضية التمثيلية للشريان السباتي الأيمن. (ب) ينتج عن التضيق سرعة تدفق أعلى في الشريان السباتي الأيمن منها في الشريان السباتي الأيسر. (ج) ينتج عن التضيق الناجم عن الانقباض سرعة تدفق في الشريان الأورطي الهابط تزيد عن 2400 مم / ثانية. تظهر الفئران الشامية سرعة تدفق تبلغ 600-900 مم / ثانية. الرجاء النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الشكل.

النتائج

بشكل عام ، يحاكي ربط الأبهر تضيق الأبهر البشري ويحفز تضخم القلب في الفئران. يتميز الإجراء الناجح بإعادة تشكيل أنسجة القلب التي تنعكس في تضخم القلب وانخفاض وظائف القلب ^5,6.

مباشرة بعد يوم واحد من العملية ، يمكن تحديد تأثير انقباض الحلقة o للشريا...

Discussion

تم استخدام ربط الأبهر القائم على الخيط / الخيط لسنوات عديدة للحث على تضخم القلب الزائد بالضغط في الفئران. إنها طريقة راسخة للتحقيق في الآليات المرضية لإعادة تشكيل القلب وتطور المرض في الجسم الحي. القيود هي التباين المرتفع نسبيا في درجة التضيق ، وبالتالي إعادة البناء. تعمل تقنية ORAB ال?...

Materials

Name	Company	Catalog Number	Comments
1 x long Fixators, 6 cm		18200-01
2 x Blunt Retractors, 5 mm wide		18200-11
2 x Short Fixators, 3 cm		18200-02
2 x fine tip 45° angled forceps	FST (fine sience tools)	11160-10
3 x Blunt Retractors, 2.5 mm wide		18200-10
3 x Retractor Wires		18200-05
4-0 absorbable suture (Vicryl)	ETHICON	SABBKLT0	Used to suture skin
6-0 suture (Prolene), needle size:13 mm	ETHICON	JDP879	Used to suture chest muscle
8-0 suture (Prolene), needle size: 6.5 mm	ETHICON	RHBECH	Used to fast the Ring
Anesthetizing Box, Small	Havard apparatus	50-0108
C57BL/6N mice	Charles River
Fluosorber Activated Charcoal Filter Canister	Havard apparatus	34-0415	Used to induce and maintain anesthesia
Handmade laryngsopcope			Intubationshelp
Harvard Apparatus Anesthetic Vaporizer	Havard apparatus		Used to induce and maintain anesthesia
Heating pad + rectal probe (LSI Letica Scientific Instruments:Temperature control unit HB 101/2 )	Panlab/ Havard apparatus		Used to control and maintain body temperature
i.v. cannula blue 22-gauge (Vasofix Braunüle 0.9 x 25 mm)	B/Braunsharing Expertise	4268091B	intubation
isofluran	Baxter		Anesthesia
Kodan (betadine solution)	Schülke	20003960-A	Desinfection
ligation aid	FST (fine sience tools)	18062-12	Used to perform liagtion with O-ring
Microscope Lighting: Schott VisiLED Set MC1500/S80-55 (+ controller)	SCHOTT		Ligth
Microscope camera (Leica IC80 HD)	Leica		Used for visualiation operating field
MiniVac Complete Anesthesia Systems for small rodents	Havard apparatus	75-0233	Used to induce and maintain anesthesia
Mouse Ventilator MiniVent Type 845	Havard Apparatus	73-0044	Used to ventilation during surgery
Needle holder	FST (fine sience tools)	TE-10804
O-ring, non-slip rubber (0.0018 mm x 0.020 mm)	Apple Rubber Products		Liagtion of the aortic arch
Scissors	FST (fine sience tools)	14040-09	Used to cut the skin and threads
Small Animal Retraction System (Kit for Animals up to 200 g)	FST (fine sience tools)	18200-20
Small Base Plate, 20 x 30 cm		18200-03
Table intgerated with heating pad + rectal probe + ECG and  transducer tripod	FujiFilm Visual Sonics Imaging System		Echocardiography
Temgesic (Buprenorphin)	Indivior UK Limited	997.00.00	Pain pre-medication
three-way stop cock (blue)
Tramal (Tamadol)	Grünental		Pain post-medication
transducer probe MS400 (Visual Sonics)	FujiFilm Visual Sonics Imaging System		Echocardiography
Ultrasound system with cardioligy package	FujiFilm Visual Sonics Imaging System		Echocardiography
Vannas Spring Scissors - 2.5 mm Cutting Edge	FST (fine sience tools)	15000-08	Used to cut intercostal chest muscle
vet ointment	Bepanten		Used to prevent eyes from drying out