نموذج قبل السريري للاعتلال العضلي الناجم عن الإنتان مع عدم الاستخدام في الفئران

Summary

يجمع نموذج الفئران هذا بين إهانة الإنتان وإهمال عضلات الأطراف الخلفية لتلخيص الميزة طريح الفراش لمريض الإنتان النموذجي. يمثل النموذج خروجا كبيرا عن النماذج السابقة لدراسة ضعف العضلات في الإنتان وهو نهج قابل للتكرار لمعالجة الاستراتيجيات العلاجية لعلاج هذه الحالة.

Abstract

الإنتان هو سبب رئيسي للوفيات في المستشفى. تؤدي التحسينات في العلاج إلى زيادة عدد الناجين من الإنتان. ما يقرب من 75 ٪ من الناجين يصابون بضعف العضلات وضمورها ، مما يزيد من حدوث حالات إعادة الدخول إلى المستشفى والوفيات. ومع ذلك ، فإن النماذج قبل السريرية المتاحة للإنتان لا تعالج إهمال العضلات الهيكلية ، وهو مكون رئيسي لتطوير الاعتلال العضلي الناجم عن الإنتان. هدفنا في هذا البروتوكول هو توفير إرشادات خطوة بخطوة لنموذج الماوس الذي يعيد إنتاج الإعداد السريري الذي يعاني منه مريض الصرف الصحي طريح الفراش. تم استخدام ذكور الفئران C57Bl / 6 لتطوير هذا النموذج. خضعت الفئران لعملية ربط وثقب (CLP) للحث على الإنتان. بعد أربعة أيام من CLP ، تعرضت الفئران لتعليق الأطراف الخلفية (HLS) لمدة سبعة أيام. تمت مقارنة النتائج مع العمليات الجراحية المطابقة للصورية و / أو ذات الإسعاف الطبيعي (NA). تم تشريح العضلات لميكانيكا العضلات في المختبر والتقييمات المورفولوجية. ينتج عن النموذج ضمور وضعف عضلي ملحوظ ، وهو نمط ظاهري مماثل لوحظ في مرضى الصرف الصحي. يمثل النموذج منصة لاختبار الاستراتيجيات العلاجية المحتملة للتخفيف من الاعتلال العضلي الناجم عن الإنتان.

Introduction

الإنتان هو حالة تهدد الحياة بسبب الاستجابة المناعية المفرطة النشاط التي تؤثر سلبا على أجهزة الأعضاء المتعددة ، مما يؤدي إلى عبء كبير على النظم الصحية في جميع أنحاء العالم¹. في الآونة الأخيرة ، انخفض معدل الوفيات داخل المستشفى المرتبط بالإنتان بسبب تحسين إدارة وحدة العناية المركزة (^ICU) ^1,2. ومع ذلك ، فإن ما يقرب من 75٪ من المرضى الناجين من الإهانة الإنتانية الأولية يصابون بضمور العضلات والهيكل العظمي (على سبيل المثال ، انخفاض في منطقة المقطع العرضي) وضعف (على سبيل المثال ، انخفاض في القدرة الإنتاجية للقوة)^3,4

Protocol

تمت مراجعة الإجراءات والموافقة عليها من قبل جامعة فلوريدا IACUC (# 202200000227). تم استخدام ذكور الفئران C57BL / 6J ، التي يبلغ عمرها 17 أسبوعا ، مع كتلة جسم تتراوح من 27 جم إلى 34 جم ، في الدراسة الحالية. يوضح الشكل 1 الإجراءات التجريبية والجدول الزمني الموضح في هذا البروتوكول. كما هو موضح ، يمتد البروتوكول لمدة 11 يوما. تخضع لجراحة البقاء على قيد الحياة (CLP / Sham) في اليوم 0 ، تليها أربعة أيام من دعم السوائل والمسكنات. في اليوم 4 ، تبدأ HLS لمدة 7 أيام. يتم إجراء التجارب النهائية في اليوم 11. يتم سرد تفاصيل الكواشف والمعدات المستخدمة في جدول المواد.

....

النتائج

بالنسبة للبيانات التمثيلية الموضحة في النتائج ، تم استخدام ذكور الفئران C57BL / 6J ، التي يبلغ عمرها 17 أسبوعا ، مع كتلة جسم تتراوح من 27 إلى 34 جم. يستغرق البروتوكول بأكمله أحد عشر يوما لإكماله ويتكون من التدخل الجراحي (CLP أو الوهم) ، والدعم الملحي والمسكن (الأيام من 0 إلى 4) ، وإهم.......

Discussion

يوفر البروتوكول الحالي إرشادات فنية لتنفيذ نموذج جديد قبل السريري للاعتلال العضلي الناجم عن الإنتان. يتم وصف جميع المواد والخطوات المهمة بالتفصيل لاستنساخ النموذج. يمكن لهذا النهج إعادة إنتاج خلل العضلات والهيكل العظمي الذي لوحظ في مرضى الإنتان ، مما يسلط الضوء على دو?.......

Materials

Name	Company	Catalog Number	Comments
4-0 Ethicon Coated Vicryl	Ethicon	D5792	Absorbable suture used for closure of muscle layer and for ligation of the cecum.
4-0 Ethilon Black 18"	Ethicon	662G	Non absorbable suture for closure of the skin layer.
BD  PrecisionGlide Needle 26-28 G	BD	305136 for 27g needle	Needle for puncturing the cecum.
C57BL/6J mice	Jackson Laboratory	strain #000664
Cotton Tipped Applicators	Puritan	S-18991	Swabs for topical application of iodine.
Cryostat	(Leica CM1950)
Dynarex Povidone Iodine Prep Solution	Dynarex	1415	Topical Antiseptic Liquid for Skin and Mucosa
Ethanol 200 Proof (100%)	Fisher Scientific		To make 70% ethanol for cleaning skin.
Hindlimb Suspension Cages	Custom Made	N/A	These custom made cages will be highlighted in the video recordings of the MS.
Optixcare Eye Lube	Optixcare		Eye lube for protection during survival surgery.
Scalpel blades #11	Fine Science		Blade used to make incisions on skin and muscle.
Skin-Trac	Zimmer	736579	Foam tape for fixing the tail to the suspension apparatus.
SomnoSuite Low-Flow Digital Vaporizer	Kent Scientific Corporation	SS-01	Vaporizer for Isoflurane Anesthesia
Tissue bath apparatus	Aurora Scientific	Model 800A, Dual Mode Muscle Lever 300C