1. فحص مجموعة المتابعة <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ذوبان الجليد 1 قسامة صغيرة (&lt;500 ميكرولتر) من Matrigel على الجليد في 4 درجات مئوية (حوالي 2 ساعة). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> اكتب Matrigel والكولاجين PBS 10X (1X في الحجم الكلي)، 1N هيدروكسيد الصوديوم (أي ما يعادل 0.023 وحدات التخزين من الكولاجين وأضاف، أو في توصيات الشركة المصنعة الكولاجين، وحسب مقتضى الحال)، وأنا على: إعداد وصفة هلام (انظر مجلدات سبيل المثال في الجدول أدناه) نهائي تركيزات 1 مل / ملغ و 1،3 ملغ / مل على التوالي (ويمكن استخدام مستحضرات مصفوفة أخرى اعتمادا على نوع من الخلايا والتجربة). </li></ol> مثال جل وصفة <table border="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><td> مكونات </td><td> الأسهم تركيز </td><td> نهائي تركيز </td><td> إضافة حجم </td></tr><tr><td> 10X PBS </td><td> 10X </td><td> 1X </td><td> 0.090 مل </td></tr><tr><td> معقمة للمياه </td><td></td><td></td><td> 0.346 مل </td></tr><tr><td> 1N هيدروكسيد الصوديوم </td><td></td><td></td><td> 0.008 مل </td></tr><tr><td> Matrigel </td><td> 9.90 ملغ / مل </td><td> 1 ملغ / مل </td><td> 0.101 مل </td></tr><tr><td> جرذ الكولاجين ذيل النوع الأول </td><td> 3.66 ملغ / مل </td><td> 1.3 ملغ / مل </td><td> 0.355 مل </td></tr></tbody></table><ol start="3" style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تخلط مكونات الجل على الجليد في نفس تسلسل على النحو الوارد أعلاه، والحل النهائي من الحضانة لمدة 1 ساعة على درجة مئوية 4 في تجربتنا، وحضانة ساعة 1 قبل نتائج بذر خلية في دبق أكثر تجانسا من الكولاجين. تأكد من أن تبقي Matrigel والكولاجين على الجليد في جميع الأوقات، والعمل في أسرع وقت ممكن لمنع دبق. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> مكان قطرها 12 ملم 8 ميكرون المسام إدراج ثقافة خلية في لوحة 12-جيدا باستخدام ملقط معقم. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> عد الخلايا وresuspend في مصل الدم خالية من وسائل الاعلام في 5 × 10 6 خلية / مل (الحجم الكلي يجب أن يكون 10٪ من حل جل). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> أضف 100 ميكروليتر من سو خليةspension إلى 900 ميكروليتر من محلول هلام (نهائي تركيز خلية 5 × 10 5 خلية / مل) ومزيج دقيق من قبل pipetting بلطف صعودا ونزولا. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إضافة 150 ميكرولتر من خليط نهائي على كل إدراج ونقل إلى 37 درجة مئوية، و 5٪ CO 2 الحاضنة لمدة 30 دقيقة حتى هلام polymerizes. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> استخدام مصل الدم خالية من وسائل الاعلام، </li></ol><ul style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> أضف 100 ميكروليتر على أعلى من هلام وميكرولتر 1200 تحت إدراج لحالة ثابتة. ينبغي على مستويات السوائل داخل وخارج إدراج في البئر تكون متساوية تقريبا، مما أدى إلى اختلاف الضغط عبر الحد الأدنى من الجل وعدم تدفق خلالي. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> أضف 100 ميكروليتر تحت إدراج وميكرولتر 650 فوق هلام لحالة التدفق. نتوخى الحذر لتفادي أي فقاعات هواء تحت إدراج، لأنها سوف تمنع الخلايا السرطانية من الهجرة من خلال الغشاء في هذه المواقع. الفرق الضغوط التي تولدها هذه الكميات ما يقرب من 1.3 سم H 2 O (أو 1 ملم زئبق). </li></ul><ol start="9" style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> لوحة في مكان 37درجة مئوية، ونسبة 5٪ CO 2 الحاضنة لمدة 24 ساعة. </li></ol> 2. خلية تلطيخ والفرز <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إضافة 500 ميكروليتر من PBS 1X لكل بئر جديدة في لوحة 24-جيدا، وسوف تستخدم هذه لغسل إدراج. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إزالة المتوسطة المتبقية في الجزء العلوي من transwells تدفق وتحديد وحدة التخزين. حساب حجم مزال مجموع بطرح حجم ما تبقى من حجم التداول الكلي واضاف في الأصل، و 650 ميكروليتر (وسوف تستخدم هذه الحسابات لمعدل التدفق، انظر أدناه). استخدم قطعة قطن لإزالة هلام من إدراج ومسح السطح العلوي للغشاء لإزالة الخلايا غير غزا. وضع تدرج في لوحة تحتوي على 24 جيد 1X برنامج تلفزيوني لمدة 15 ثانية لغسل إدراج. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إزالة برنامج تلفزيوني وإضافة 500 ميكرولتر من بارافورمالدهيد 4٪ (منهاج العمل) تحت كل إدراج والحضانة لمدة 30 دقيقة في درجة حرارة الغرفة لتحديد الخلايا transmigrated. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إزالة الآفات وشطف مرة واحدة مع 500 ميكرولتر 1X برنامج تلفزيوني لإزالة مثبت المتبقية. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إضافة 500 س ميكرولترو 0.5٪ تريتون X-100 حل تحت إدراج واحتضانها لمدة 10 دقائق في درجة حرارة الغرفة إلى permeabilize الخلايا. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> قطع الأغشية من إدراج باستخدام شفرة حلاقة ومكان إلى 100 ميكروليتر من 2 ميكروغرام / مل دابي في حل PBS 1X، والحرص على أن تضع الجانب السفلي من وجه غشاء أسفل (خلايا transmigrated مواجهة). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> لوحة غلاف في رقائق الألومنيوم ومكان على شاكر عند 150 دورة في الدقيقة لمدة 30 دقيقة في درجة حرارة الغرفة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> غسل الأغشية في 500 برنامج تلفزيوني 1X ميكرولتر على شاكر (اكرر 3 مرات لمدة 10 دقائق لكل منهما) لإزالة دابي الحرة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> الأغشية مكان على شرائح الزجاج مع خلايا transmigrated مواجهة، إضافة حل التركيب وانزلاق الغطاء. </li></ol> 3. تحليل البيانات <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> عد دابي الملطخة النوى في 5 مواقع مختارة عشوائيا من كل غشاء (البقاء بعيدا عن حواف واستخدام 10X أو 20X عدسة الهدف). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> حساب متوسط ​​عدد خلايا والحصول على الغزو في المئة عن طريق استخدام الصيغة التالية: غزو ​​في المئة = X 100٪ (متوسط ​​غشاء الخلية X العد مساحة) / (المساحة السطحية للx عدد مجهر صورة المصنف الخلايا) ويمكن تطبيع الغزو في المئة إلى بعض حالة التحكم (عادة حالة ثابتة) للسماح للمقارنة بين تجارب مستقلة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> حساب معدل تدفق متوسط: تقسيم إجمالي حجم مزال في حالة تدفق في الوقت حضانة (على سبيل المثال، 24 ساعة). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> حساب سرعة تدفق متوسط: تقسيم معدل تدفق متوسط ​​من منطقة مستعرضة من هلام / غشاء (في هذه الحالة 60 ملم 2). </li></ol> 4. ممثل النتائج لقياس ورم غزو الخلية تحت تدفق خلالي، أجرينا لدينا غزو تدفق 3-D فحص باستخدام MDA-MB-435S خلايا سرطان الجلد المنتشر. وقد سبق هذه الخلايا أظهرت لغزو استجابة لتدفق السائل الخلالي 13-14. كانت جزءا لا يتجزأ من الخلايا في مصفوفة تتكون من 1.3 ملغ / مل تاي الفئرانل نوع وتر الكولاجين أنا و 1 ملغ / مل الغشاء القاعدي مصفوفة Matrigel بتركيز خلية النهائي من 5 خلايا س 5 10 / مل. وتمت مقارنة اثنين من ظروف مختلفة: (1) تدفق الخلالي متوسط ​​= 0.1 ميكرون ق -1 و (2) حالة ثابتة لا = معدل التدفق للقياس (الشكل 1). بعد 24 ساعة، تم صبغ الخلايا التي غزت من خلال مسام الغشاء مع دابي لتسهيل عملية فرز الخلية. ويبين الشكل 2 صورة ممثل غزت الخلايا. تحت brightfield، فقط مسام غشاء مرئية. واستخدمت باستخدام مضان، استخدمت نوى دابي الملطخة لفرز الخلايا والهياكل phalloidin الملون F-الأكتين لتصور جسم الخلية (اختياري). وطالب باستخدام اختبار t افتراض الفروق على قدم المساواة، وأظهرت لنا أن تدفق الخلالي يزيد بشكل كبير MDA-MB-435S غزو من قبل خلية 2.3 أضعاف خلال الظروف ثابت (P = 0.003) (الشكل 3). هذا corroboraالاحصائيين نتائج مماثلة (ولكن مع الظروف مصفوفة مختلفة، وبالتالي تدفق سرعات) باستخدام هذا الخط خلية 13-14. <img alt="الشكل 1" src="/files/ftp_upload/4159/4159fig1.jpg" /> الشكل 1. تخطيطي ل3-D فحص السائل الخلالي غزو تدفق. تعد أول حل الجل باستخدام تركيزات مناسبة ومجلدات. ثم تضاف إلى الخلايا حل هلام ونقل إلى إدراج ثقافة الخلية. إضافة أخيرا حجم مناسب من وسائل الإعلام إلى كل حالة واحتضان. والدافع الخلالي تدفق السوائل التي يقوم بها رئيس ضغط السائل. <img alt="الشكل 2" src="/files/ftp_upload/4159/4159fig2.jpg" /> Transmigrated الشكل 2. MDA-MB-435S الخلايا على غشاء. تم إصلاح الخلايا غزا بعد فحص لدينا السائل الخلالي غزو تدفق والملون مع فلور دابي واليكسا 488-مترافق phalloidin لتسهيل عد الخلايا غزت؛ صورة) من الغشاء تحت حقل مشرق ب) دابي ستاINED نوى (باللون الأزرق) ج) اليكسا فلور 488-F-phalloidin الملون الأكتين (باللون الأخضر). شريط الحجم يمثل 50 ميكرون. <img alt="الشكل (3)" src="/files/ftp_upload/4159/4159fig3.jpg" /> زيادة الرقم 3. غزو MDA-MB-435S الخلايا تحت تدفق. غزو ​​الخلية بعد 24 ساعة تعزز إلى حد كبير من قبل تدفق الخلالي (P = 0.003). تم تطبيع النتائج إلى حالة ثابت متوسط ​​والقيم يعني ± SEM تمثل من 6 إدراج ثقافة الخلية.

<ol>
	<li>Cichon, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microenvironmental+influences+that+drive+progression+from+benign+breast+disease+to+invasive+breast+cancer.">Microenvironmental influences that drive progression from benign breast disease to invasive breast cancer.</a> J. Mammary Gland. Biol. Neoplasia. 15, 389-3897 (2010).</li><li>Proia, D. A., Kuperwasser, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Stroma:+tumor+agonist+or+antagonist.">Stroma: tumor agonist or antagonist.</a> Cell Cycle. 4, 1022-1025 (2005).</li><li>Dvorak, H. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tumor+microenvironment+and+progression.">Tumor microenvironment and progression.</a> J .Surg. Oncol. 103, 468-474 (2011).</li><li>Provenzano, P. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Collagen+density+promotes+mammary+tumor+initiation+and+progression.">Collagen density promotes mammary tumor initiation and progression.</a> BMC Med. 6, 11 (2008).</li><li>Engler, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Matrix+elasticity+directs+stem+cell+lineage+specification.">Matrix elasticity directs stem cell lineage specification.</a> Cell. 126, 677-689 (2006).</li><li>Paszek, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tensional+homeostasis+and+the+malignant+phenotype.">Tensional homeostasis and the malignant phenotype.</a> Cancer Cell. 8, 241-254 (2005).</li><li>Levental, K. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Matrix+crosslinking+forces+tumor+progression+by+enhancing+integrin+signaling.">Matrix crosslinking forces tumor progression by enhancing integrin signaling.</a> Cell. 139, 891-906 (2009).</li><li>Butler, T. P., Grantham, F. H., Gullino, P. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bulk+transfer+of+fluid+in+the+interstitial+compartment+of+mammary+tumors.">Bulk transfer of fluid in the interstitial compartment of mammary tumors.</a> Cancer Res. 35, 3084-3088 (1975).</li><li>Dafni, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Overexpression+of+vascular+endothelial+growth+factor+165+drives+peritumor+interstitial+convection+and+induces+lymphatic+drain:+magnetic+resonance+imaging,+confocal+microscopy,+and+histological+tracking+of+triple-labeled+albumin.">Overexpression of vascular endothelial growth factor 165 drives peritumor interstitial convection and induces lymphatic drain: magnetic resonance imaging, confocal microscopy, and histological tracking of triple-labeled albumin.</a> Cancer Res. 62, 6731-6739 (2002).</li><li>Chary, S. R., Jain, R. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Direct+measurement+of+interstitial+convection+and+diffusion+of+albumin+in+normal+and+neoplastic+tissues+by+fluorescence+photobleaching.">Direct measurement of interstitial convection and diffusion of albumin in normal and neoplastic tissues by fluorescence photobleaching.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 86, 5385-5389 (1989).</li><li>Heldin, C. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High+interstitial+fluid+pressure+-+an+obstacle+in+cancer+therapy.">High interstitial fluid pressure - an obstacle in cancer therapy.</a> Nat. Rev. Cancer. 4, 806-813 (2004).</li><li>Fukumura, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tumor+microvasculature+and+microenvironment:+novel+insights+through+intravital+imaging+in+pre-clinical+models.">Tumor microvasculature and microenvironment: novel insights through intravital imaging in pre-clinical models.</a> Microcirculation. 17, 206-225 (2010).</li><li>Shields, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Autologous+chemotaxis+as+a+mechanism+of+tumor+cell+homing+to+lymphatics+via+interstitial+flow+and+autocrine+CCR7+signaling.">Autologous chemotaxis as a mechanism of tumor cell homing to lymphatics via interstitial flow and autocrine CCR7 signaling.</a> Cancer Cell. 11, 526-538 (2007).</li><li>Shieh, A. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tumor+cell+invasion+is+promoted+by+interstitial+flow-induced+matrix+priming+by+stromal+fibroblasts.">Tumor cell invasion is promoted by interstitial flow-induced matrix priming by stromal fibroblasts.</a> Cancer Res. 71, 790-800 (2011).</li><li>Shi, Z. D., Wang, H., Tarbell, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Heparan+sulfate+proteoglycans+mediate+interstitial+flow+mechanotransduction+regulating+MMP-13+expression+and+cell+motility+via+FAK-ERK+in+3D+collagen.">Heparan sulfate proteoglycans mediate interstitial flow mechanotransduction regulating MMP-13 expression and cell motility via FAK-ERK in 3D collagen.</a> PLoS One. 6, e15956 (2011).</li><li>Fleury, M. E., Boardman, K. C., Swartz, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Autologous+morphogen+gradients+by+subtle+interstitial+flow+and+matrix+interactions.">Autologous morphogen gradients by subtle interstitial flow and matrix interactions.</a> Biophys J. 91, 113-121 (2006).</li><li>Miteva, D. O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transmural+flow+modulates+cell+and+fluid+transport+functions+of+lymphatic+endothelium.">Transmural flow modulates cell and fluid transport functions of lymphatic endothelium.</a> Circ. Res. 106, 920-931 (2010).</li><li>Ng, C. P., Hinz, B., Swartz, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Interstitial+fluid+flow+induces+myofibroblast+differentiation+and+collagen+alignment+in+vitro.">Interstitial fluid flow induces myofibroblast differentiation and collagen alignment in vitro.</a> J. Cell. Sci. 118, 4731-4739 (2005).</li><li>Kunder, C. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mast+cell-derived+particles+deliver+peripheral+signals+to+remote+lymph+nodes.">Mast cell-derived particles deliver peripheral signals to remote lymph nodes.</a> J. Exp. Med. 206, 2455-2467 (2009).</li><li>Helm, C. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Synergy+between+interstitial+flow+and+VEGF+directs+capillary+morphogenesis+in+vitro+through+a+gradient+amplification+mechanism.">Synergy between interstitial flow and VEGF directs capillary morphogenesis in vitro through a gradient amplification mechanism.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 102, 15779-15784 (2005).</li><li>McGuire, P. G., Seeds, N. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+interaction+of+plasminogen+activator+with+a+reconstituted+basement+membrane+matrix+and+extracellular+macromolecules+produced+by+cultured+epithelial+cells.">The interaction of plasminogen activator with a reconstituted basement membrane matrix and extracellular macromolecules produced by cultured epithelial cells.</a> J Cell Biochem. 40, 215-227 (1989).</li><li>Kleinman, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Isolation+and+characterization+of+type+IV+procollagen,+laminin,+and+heparan+sulfate+proteoglycan+from+the+EHS+sarcoma.">Isolation and characterization of type IV procollagen, laminin, and heparan sulfate proteoglycan from the EHS sarcoma.</a> Biochemistry. 21, 6188-6193 (1982).</li><li>Haessler, U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Migration+dynamics+of+breast+cancer+cells+in+a+tunable+3D+interstitial+flow+chamber.">Migration dynamics of breast cancer cells in a tunable 3D interstitial flow chamber.</a> Integr. Biol. (Camb). , (2011).</li><li>Polacheck, W. J., Charest, J. L., Kamm, R. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Interstitial+flow+influences+direction+of+tumor+cell+migration+through+competing+mechanisms.">Interstitial flow influences direction of tumor cell migration through competing mechanisms.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 108, 11115-11120 (2011).</li></ol>

الإعلان عن أي تضارب في المصالح.

هنا وقد وصفت لدينا منهجية لقياس تأثير تدفق الخلالي على غزو الخلايا السرطانية، وذلك باستخدام الخلايا جزءا لا يتجزأ من مصفوفة 3-D داخل خلية إدراج الثقافة. وقد استخدمت هذه الأساليب ومماثلة لدراسة تأثير تدفق الخلالي على مجموعة متنوعة من أنواع الخلايا 13-15، 17. نهجنا ي...

<table border="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><td> اسم كاشف </td><td> شركة </td><td> فهرس العدد </td><td> تعليقات </td></tr><tr><td> الكولاجين (ذيل الجرذ) </td><td> دينار بحريني </td><td> 354236 </td><td> تبقى عقيمة </td></tr><tr><td> Millicell إدراج خلية ثقافة </td><td> ميليبور </td><td> PI8P01250 </td><td> 8 قطرها ميكرون المسام، والبولي غشاء </td></tr><tr><td> Matrigel </td><td> دينار بحريني </td><td> 354234 </td><td> تبقى عقيمة </td></tr><tr><td> برنامج تلفزيوني </td><td> سيجما ألدريتش </td><td> 100M-8202 </td><td> 10X لإعداد حل هلام، 1X لغسل خطوات </td></tr><tr><td> هيدروكسيد الصوديوم، والحل 1.0N </td><td> سيجما ألدريتش </td><td> S2770 </td><td> تبقى عقيمة </td></tr><tr><td> DMEM 1X </td><td> CellGro </td><td> 10-013-CV </td><td> تبقى عقيمة </td></tr><tr><td> الأبقار مصل الجنين </td><td> اتلانتا البيولوجية </td><td> 511150 </td><td> تبقى عقيمة </td></tr><tr><td> البنسلين الستربتوميسين </td><td> CellGro </td><td> 30002CI </td><td> تبقى عقيمة </td></tr><tr><td> تريتون X-100 </td><td> سيجما ألدريتش </td><td> X100-500 مل </td><td> 0.5٪ في برنامج تلفزيوني </td></tr><tr><td> بارافورمالدهيد </td><td> فيشر العلمية </td><td> 04042-500 </td><td> 4٪ في برنامج تلفزيوني </td></tr><tr><td> منزوع الأيونات الماء </td><td></td><td></td><td> تبقى عقيمة </td></tr><tr><td> 4 &#39;،6-diaminido-2-phenylindole (دابي) </td><td> النائب Biomedicals </td><td> 0215757401 </td><td> 1 ملغ / مل حل الأوراق المالية </td></tr><tr><td> تصاعد الحل </td><td> الحرارية العلمية </td><td> TA-030-FM </td><td></td></tr><tr><td> التربسين-EDTA </td><td> CellGro </td><td> 25-052-CI </td><td> تبقى عقيمة </td></tr></tbody> &lt;/ الجدول&gt;

three-dimensional cell culture model for measuring the effects of interstitial fluid flow on tumor cell invasion

نمو وتطور الأورام الصلبة معظم تعتمد على التحول الأولي للخلايا السرطانية واستجابتها لسدى المرتبطة يشير في المكروية ورم 1. سابقا، وركز البحث على المكروية ورم في المقام الأول على الورم اللحمية التفاعلات 1-2. ومع ذلك، فإن المكروية ورم تتضمن أيضا مجموعة متنوعة من القوى الطبيعية الحيوية، وآثارها لا تزال غير مفهومة تماما. هذه القوى هي عواقب النشاط الحيوي لنمو الورم التي تؤدي إلى تغيرات في التعبير الجيني، وانقسام الخلايا، والتمايز وغزو 3. يتم تغيير جميع المصفوفة كثافة 4، صلابة 5-6، وهيكل 6-7، ضغط السائل الخلالي 8، وتدفق السوائل الخلالية 8 أثناء تقدم السرطان. الخلالي تدفق السوائل على وجه الخصوص هو أعلى في الأورام بالمقارنة مع الأنسجة الطبيعية 8-10. ويقدر فلوريدا السائل الخلاليوتم قياس السرعات آه وجدت لتكون في حدود 0،1-3 ميكرومتر ق -1، اعتمادا على حجم الورم والتمايز 9 و 11. هذا يرجع إلى ارتفاع ضغط السائل الخلالي الناجم عن الورم الناجم عن الأوعية الدموية وزيادة نفاذية الأوعية الدموية 12. وقد تبين الخلالي تدفق السوائل لزيادة غزو الخلايا السرطانية 13-14، الليفية الوعائية وخلايا العضلات الملساء 15. هذا قد يكون عائدا لغزو التدرجات الكيميائي ذاتي خلقت حول الخلايا في D-3 16 أو زيادة مصفوفة الفلزي (MMP) التعبير 15، إفراز chemokine والتعبير جزيء التصاق الخلية 17. ومع ذلك، لم يتم الآلية التي تستشعر الخلايا تدفق السوائل مفهومة جيدا. بالإضافة إلى تغيير سلوك الخلية السرطانية، الخلالي تدفق السوائل ينظم نشاط الخلايا الأخرى في المكروية ورم. ويرتبط هذا مع التمايز القيادة (أ) من الخلايا الليفية إلى الأورام وmyofibrأقاليم 18، (ب) نقل من مولدات المضادات، وعوامل أخرى قابلة للذوبان إلى الغدد الليمفاوية 19، و (ج) تحوير التشكل الليمفاوية الخلية البطانية 20. هذه التقنية المقدمة هنا يفرض الخلالي تدفق السوائل في الخلايا في المختبر، والكمي آثاره على غزو (الشكل 1). وقد تم نشر هذه الطريقة في دراسات متعددة لقياس الآثار المترتبة على تدفق السوائل في انسجة وخلية السرطان غزو 13-15، 17. من خلال تغيير التركيبة مصفوفة، نوع من الخلايا، وتركيز خلية، يمكن تطبيق هذه الطريقة على غيرها من الأمراض، ونظم الفسيولوجية لدراسة الآثار المترتبة على تدفق فراغي في العمليات الخلوية مثل غزو الانتشار، والتفريق، والتعبير الجيني.

Watch this Scientific Journal Video about Three-dimensional Cell Culture Model for Measuring the Effects of Interstitial Fluid Flow on Tumor Cell Invasion at JoVE.com

Three-dimensional Cell Culture Model for Measuring the Effects of Interstitial Fluid Flow on Tumor Cell Invasion

وارتقى الخلالي تدفق السوائل في الأورام الصلبة، ويمكن أن تعدل ورم غزو الخلية. نحن هنا وصفا لأسلوب لتطبيق الخلالي تدفق السوائل إلى الخلايا جزءا لا يتجزأ من مصفوفة ومن ثم قياس آثارها على غزو الخلية. ويمكن تكييف هذه التقنية بسهولة لدراسة النظم الأخرى.

نموذج ثلاثي الأبعاد للخلية ثقافة قياس آثار تدفق السائل الخلالي على غزو الخلايا السرطانية

The growth and progression of most solid tumors depend on the initial transformation of the cancer cells and their response to stroma-associated signaling ...

three-dimensional-cell-culture-model-for-measuring-effects

Research

JoVE Journal

Bioengineering

16.4K Views.  Drexel University. وارتقى الخلالي تدفق السوائل في الأورام الصلبة، ويمكن أن تعدل ورم غزو الخلية. نحن هنا وصفا لأسلوب لتطبيق الخلالي تدفق السوائل إلى الخلايا جزءا لا يتجزأ من مصفوفة ومن ثم قياس آثارها على غزو الخلية. ويمكن تكييف هذه التقنية بسهولة لدراسة النظم الأخرى.

Video: Three-dimensional Cell Culture Model for Measuring the Effects of Interstitial Fluid Flow on Tumor Cell Invasion

Alginate Hydrogels for Three-Dimensional Organ Culture of Ovaries and Oviducts

Ovarian cancer is the fifth leading cause of cancer deaths in women and has a 63% mortality rate in the United States1. The cell type of origin for ovarian cancers is still in question and might be either the ovarian surface epithelium (OSE) or the distal epithelium of the fallopian tube fimbriae2,3. Culturing the normal cells as a primary culture in vitro will enable scientists to model specific changes that might lead to ovarian cancer in the distinct epithelium, thereby definitively determining the cell type of origin. This will allow development of more accurate biomarkers, animal models with tissue-specific gene changes, and better prevention strategies targeted to this disease.
Maintaining normal cells in alginate hydrogels promotes short term in vitro culture of cells in their three-dimensional context and permits introduction of plasmid DNA, siRNA, and small molecules. By culturing organs in pieces that are derived from strategic cuts using a scalpel, several cultures from a single organ can be generated, increasing the number of experiments from a single animal. These cuts model aspects of ovulation leading to proliferation of the OSE, which is associated with ovarian cancer formation. Cell types such as the OSE that do not grow well on plastic surfaces can be cultured using this method and facilitate investigation into normal cellular processes or the earliest events in cancer formation4.
Alginate hydrogels can be used to support the growth of many types of tissues5. Alginate is a linear polysaccharide composed of repeating units of &beta;-D-mannuronic acid and &alpha;-L-guluronic acid that can be crosslinked with calcium ions, resulting in a gentle gelling action that does not damage tissues6,7. Like other three-dimensional cell culture matrices such as Matrigel, alginate provides mechanical support for tissues; however, proteins are not reactive with the alginate matrix, and therefore alginate functions as a synthetic extracellular matrix that does not initiate cell signaling5. The alginate hydrogel floats in standard cell culture medium and supports the architecture of the tissue growth in vitro.
A method is presented for the preparation, separation, and embedding of ovarian and oviductal organ pieces into alginate hydrogels, which can be maintained in culture for up to two weeks. The enzymatic release of cells for analysis of proteins and RNA samples from the organ culture is also described. Finally, the growth of primary cell types is possible without genetic immortalization from mice and permits investigators to use knockout and transgenic mice.

Culture of normal cells in their three-dimensional context represents an alternative method to study early events required for cellular transformation and tumorigenesis. This method is used to grow normal ovarian and oviductal cells to study early events in ovarian cancer formation.

ألجينات الهلاميات المائية للثقافة الجهاز ثلاثي الأبعاد من المبيضين وناقلة البيضات

Ovarian cancer is the fifth leading cause of cancer deaths in women and has a 63% mortality rate in the United States1. The cell type of origin for ...

Investigating the Three-dimensional Flow Separation Induced by a Model Vocal Fold Polyp

The fluid-structure energy exchange process for normal speech has been studied extensively, but it is not well understood for pathological conditions. Polyps and nodules, which are geometric abnormalities that form on the medial surface of the vocal folds, can disrupt vocal fold dynamics and thus can have devastating consequences on a patient&#39;s ability to communicate. Our laboratory has reported particle image velocimetry (PIV) measurements, within an investigation of a model polyp located on the medial surface of an in&#160;vitro driven vocal fold model, which show that such a geometric abnormality considerably disrupts the glottal jet behavior. This flow field adjustment is a likely reason for the severe degradation of the vocal quality in patients with polyps. A more complete understanding of the formation and propagation of vortical structures from a geometric protuberance, such as a vocal fold polyp, and the resulting influence on the aerodynamic loadings that drive the vocal fold dynamics, is necessary for advancing the treatment of this pathological condition. The present investigation concerns the three-dimensional flow separation induced by a wall-mounted prolate hemispheroid with a 2:1 aspect ratio in cross flow, i.e. a model vocal fold polyp, using an oil-film visualization technique. Unsteady, three-dimensional flow separation and its impact of the wall pressure loading are examined using skin friction line visualization and wall pressure measurements.

Vocal fold polyps can disrupt vocal fold dynamics and thus can have devastating consequences on a patient&#39;s ability to communicate. Three-dimensional flow separation induced by a wall-mounted model polyp and its impact on the wall pressure loading are examined using particle image velocimetry, skin friction line visualization, and wall pressure measurements.

التحقيق في فصل التدفق ثلاثي الأبعاد الناجم عن نموذج بوليب أضعاف الصوتية

The fluid-structure energy exchange process for normal speech has been studied extensively, but it is not well understood for pathological conditions. ...

Tissue Engineering of Tumor Stromal Microenvironment with Application to Cancer Cell Invasion

3D organotypic cultures of epithelial cells on a matrix embedded with mesenchymal cells are widely used to study epithelial cell differentiation and invasion. Rat tail type I collagen and/or matrix derived from Engelbreth-Holm-Swarm mouse sarcoma cells have been traditionally employed as the substrates to model the matrix or stromal microenvironment into which mesenchymal cells (usually fibroblasts) are populated. Although experiments using such matrices are very informative, it can be argued that due to an overriding presence of a single protein (such as in type I Collagen) or a high content of basement membrane components and growth factors (such as in matrix derived from mouse sarcoma cells), these substrates do not best reflect the contribution to matrix composition made by the stromal cells themselves. To study native matrices produced by primary dermal fibroblasts isolated from patients with a tumor prone, genetic blistering disorder (recessive dystrophic epidermolysis bullosa), we have adapted an existing native matrix protocol to study tumor cell invasion. Fibroblasts are induced to produce their own matrix over a prolonged period in culture. This native matrix is then detached from the culture dish and epithelial cells are seeded onto it before the entire coculture is raised to the air-liquid interface. Cellular differentiation and/or invasion can then be assessed over time. This technique provides the ability to assess epithelial-mesenchymal cell interactions in a 3D setting without the need for a synthetic or foreign matrix with the only disadvantage being the prolonged period of time required to produce the native matrix. Here we describe the application of this technique to assess the ability of a single molecule expressed by fibroblasts, type VII collagen, to inhibit tumor cell invasion.

Tissue engineered fibroblast-derived native matrix is an emerging tool to generate a stromal substrate which supports epithelial cell proliferation and differentiation. Here a protocol applying this methodology to assess the impact of different stromal cell types on tumor cell biology is presented.

هندسة الأنسجة اللحمية من الورم المكروية مع التطبيق على غزو الخلية السرطانية

3D organotypic cultures of epithelial cells on a matrix embedded with mesenchymal cells are widely used to study epithelial cell differentiation and ...

Analysis of Cell Migration within a Three-dimensional Collagen Matrix

The ability to migrate is a hallmark of various cell types and plays a crucial role in several physiological processes, including&#160;embryonic development, wound healing, and immune responses. However, cell migration is also a key mechanism in cancer enabling these cancer cells to detach from the primary tumor to start metastatic spreading. Within the past years various cell migration assays have been developed to analyze the migratory behavior of different cell types. Because the locomotory behavior of cells markedly differs between a two-dimensional (2D) and three-dimensional (3D) environment it can be assumed that the analysis of the migration of cells that are embedded within a 3D environment would yield in more significant cell migration data. The advantage of the described 3D collagen matrix migration assay is that cells are embedded within a physiological 3D network of collagen fibers representing the major component of the extracellular matrix. Due to time-lapse video microscopy real cell migration is measured allowing the determination of several migration parameters as well as their alterations in response to pro-migratory factors or inhibitors. Various cell types could be analyzed using this technique, including lymphocytes/leukocytes, stem cells, and tumor cells. Likewise, also cell clusters or spheroids could be embedded within the collagen matrix concomitant with analysis of the emigration of single cells from the cell cluster/ spheroid into the collagen lattice. We conclude that the 3D collagen matrix migration assay is a versatile method to analyze the migration of cells within a physiological-like 3D environment.

Cell migration is a biological phenomenon that is involved in a plethora of physiological, such as wound healing and immune responses, and pathophysiological processes, like cancer. The 3D-collagen matrix migration assay is a versatile tool to analyze the migratory properties of different cell types within in a 3D physiological-like environment.

تحليل الهجرة خلية داخل الكولاجين مصفوفة ثلاثية الأبعاد

The ability to migrate is a hallmark of various cell types and plays a crucial role in several physiological processes, including&#160;embryonic ...

Gene Transfection toward Spheroid Cells on Micropatterned Culture Plates for Genetically-modified Cell Transplantation

To improve the therapeutic effectiveness of cell transplantation, a transplantation system of genetically modified, injectable spheroids was developed. The cell spheroids are prepared in a culture system on micropatterned plates coated with a thermosensitive polymer. A number of spheroids are formed on the plates, corresponding to the cell adhesion areas of 100 &#181;m diameter that are regularly arrayed in a two-dimensional manner, surrounded by non-adhesive areas that are coated by a polyethylene glycol (PEG) matrix. The spheroids can be easily recovered as a liquid suspension by lowering the temperature of the plates, and their structure is well maintained by passing them through injection needles with a sufficiently large caliber (over 27 G). Genetic modification is achieved by gene transfection using the original non-viral gene carrier, polyplex nanomicelle, which is capable of introducing genes into cells without disrupting the spheroid structure. For primary hepatocyte spheroids transfected with a luciferase-expressing gene, the luciferase is sustainably obtained in transplanted animals, along with preserved hepatocyte function, as indicated by albumin expression. This system can be applied to a variety of cell types including mesenchymal stem cells.

This protocol describes a cell transplantation system using genetically modified, injectable spheroids. Cell spheroids are cultured on micropatterned culture plates and recovered after gene introduction using polyplex nanomicelles. This system facilitates prolonged transgene expression from the transplanted cells in host animals while maintaining the innate function of the cells.

الجينات ترنسفكأيشن نحو خلايا كروي على لوحات Micropatterned الثقافة لالمعدلة وراثيا زرع الخلايا

To improve the therapeutic effectiveness of cell transplantation, a transplantation system of genetically modified, injectable spheroids was developed. ...

Fabrication of Inverted Colloidal Crystal Poly(ethylene glycol) Scaffold: A Three-dimensional Cell Culture Platform for Liver Tissue Engineering

The ability to maintain hepatocyte function in vitro, for the purpose of testing xenobiotics&#39; cytotoxicity, studying virus infection and developing drugs targeted at the liver, requires a platform in which cells receive proper biochemical and mechanical cues. Recent liver tissue engineering systems have employed three-dimensional (3D) scaffolds composed of synthetic or natural hydrogels, given their high water retention and their ability to provide the mechanical stimuli needed by the cells. There has been growing interest in the inverted colloidal crystal (ICC) scaffold, a recent development, which allows high spatial organization, homotypic and heterotypic cell interaction, as well as cell-extracellular matrix (ECM) interaction. Herein, we describe a protocol to fabricate the ICC scaffold using poly (ethylene glycol) diacrylate (PEGDA) and the particle leaching method. Briefly, a lattice is made from microsphere particles, after which a pre-polymer solution is added, properly polymerized, and the particles are then removed, or leached, using an organic solvent (e.g., tetrahydrofuran). The dissolution of the lattice results in a highly porous scaffold with controlled pore sizes and interconnectivities that allow media to reach cells more easily. This unique structure allows high surface area for the cells to adhere to as well as easy communication between pores, and the ability to coat the PEGDA ICC scaffold with proteins also shows a marked effect on cell performance. We analyze the morphology of the scaffold as well as the hepatocarcinoma cell (Huh-7.5) behavior in terms of viability and function to explore the effect of ICC structure and ECM coatings. Overall, this paper provides a detailed protocol of an emerging scaffold that has wide applications in tissue engineering, especially liver tissue engineering.

Fabrication of Inverted Colloidal Crystal Polyethylene glycol Scaffold: A Three-dimensional Cell Culture Platform for Liver Tissue Engineering

This manuscript presents a detailed protocol for the fabrication of an emerging three-dimensional hepatocyte culture platform, the inverted colloidal crystal scaffold, and the concomitant techniques to assess hepatocyte behavior. The size-controllable pores, interconnectivity and ability to conjugate extracellular matrix proteins to the poly(ethylene glycol) (PEG) scaffold enhance Huh-7.5 cell performance.

تصنيع مقلوب الغروية كريستال بولي (جلايكول الإثيلين) سقالة: وثلاثي الأبعاد منصة الثقافة خلية للهندسة الأنسجة الكبد

The ability to maintain hepatocyte function in vitro, for the purpose of testing xenobiotics&#39; cytotoxicity, studying virus infection and developing ...

Characterizing Cell Migration Within Three-dimensional In Vitro Wound Environments

Currently, most in vitro models of wound healing, such as well-established scratch assays, involve studying cell migration and wound closure on two-dimensional surfaces. However, the physiological environment in which in vivo wound healing takes place is three-dimensional rather than two-dimensional. It is becoming increasingly clear that cell behavior differs greatly in two-dimensional vs. three-dimensional environments; therefore, there is a need for more physiologically relevant in vitro models for studying cell migration behaviors in wound closure. The method described herein allows for the study of cell migration in a three-dimensional model that better reflects physiological conditions than previously established two-dimensional scratch assays. The purpose of this model is to evaluate cell outgrowth via the examination of cell migration away from a spheroid body embedded within a fibrin matrix in the presence of pro- or anti-migratory factors. Using this method, cell outgrowth from the spheroid body in a three-dimensional matrix can be observed and is easily quantifiable over time via brightfield microscopy and analysis of spheroid body area. The effect of pro-migratory and/or inhibitory factors on cell migration can also be evaluated in this system. This method provides researchers with a simple method of analyzing cell migration in three-dimensional wound associated matrices in vitro, thus increasing the relevance of in vitro cell studies prior to the use of in vivo animal models.

Characterizing Cell Migration Within Three-dimensional In Vitro Wound Environments

The goal of this protocol is to evaluate the effect of pro- and anti-migratory factors on cell migration within a three-dimensional fibrin matrix.

وصف الهجرة الخلية في إطار ثلاثي الأبعاد في المختبر الجرح البيئات

Currently, most in vitro models of wound healing, such as well-established scratch assays, involve studying cell migration and wound closure on ...

Evaluation of Keratinocyte Proliferation on Two- and Three-dimensional Type I Collagen Substrates

Type I collagen, useful as a substrate for cell culture, exists in two forms: the two-dimensional, non-fibrous form and three-dimensional, fibril form. Both forms can be prepared with the same type I collagen. In general, the non-fibrous form promotes cell adhesion and proliferation. The fibril form (gels) provides more physiological conditions in many types of cells; therefore, gel culture is useful for examining physiological behaviors of cells, such as drug efficacy.
Researchers can select the appropriate form according to the purpose of its use. For example, in the case of keratinocytes, on-gel culture has been used as a wound healing model. FEPE1L-8, a keratinocyte cell line cultured on the non-fibrous form of type I collagen, promote cell adhesion. Notably, keratinocyte proliferation is slower on the fibril form than the non-fibrous form. Protocols for the preparation of type I collagen for cell culture are simple and have wide applications depending on the experimental needs.

Here, we present a protocol for the preparation of two different forms of culture substrates utilizing type I collagen. Depending on how collagen is handled, collagen molecules either maintain two-dimensional, non-fibrous form or reassemble into three-dimensional, fibril form. Cell proliferation on type I collagen is drastically affected by fibril formation.

تقييم انتشار Keratinocyte على عمليات ثنائية وثلاثية الأبعاد في النوع الأول من ركائز الكولاجين

Type I collagen, useful as a substrate for cell culture, exists in two forms: the two-dimensional, non-fibrous form and three-dimensional, fibril form. ...

Using Multilayered Hydrogel Bioink in Three-Dimensional Bioprinting for Homogeneous Cell Distribution

During the extrusion-based three-dimensional bioprinting process, liquid-like bioinks with low viscosity can protect cells from membrane damage induced by shear stress and improve the survival of the encapsulated cells. However, rapid gravity-driven cell sedimentation in the reservoir could lead to an inhomogeneous cell distribution in bioprinted structures and therefore hinder the application of liquid-like bioinks. Here, we developed a novel multilayered modified strategy for liquid-like bioinks (e.g., gelatin methacryloyl with low viscosity) to prevent the sedimentation of encapsulated cells. Multiple liquid interfaces were manipulated in the multilayered bioink to provide interfacial retention. Consequently, the cell sedimentation action going across adjacent layers in the multilayered system was retarded in the bioink reservoir. It was found that the interfacial retention was much higher than the sedimental pull of cells, demonstrating a critical role of the interfacial retention in preventing cell sedimentation and promoting a more homogeneous dispersion of cells in the multilayered bioink.

Here, we developed a novel multilayered modified strategy for liquid-like bioinks (gelatin methacryloyl with low viscosity) to prevent the sedimentation of encapsulated cells.

باستخدام متعدد الطبقات Hydrogel Bioink في الطباعة الحيوية ثلاثية الأبعاد لتوزيع الخلايا المتجانسة

During the extrusion-based three-dimensional bioprinting process, liquid-like bioinks with low viscosity can protect cells from membrane damage induced by ...

Primary Clarification of CHO Harvested Cell Culture Fluid using an Acoustic Separator

Primary clarification is an essential step in a biomanufacturing process for the initial removal of cells from therapeutic products within the harvested cell culture fluid. While traditional methods like centrifugation or filtration are widely implemented for cell removal, the equipment for these processes have large footprints and operation can involve contamination risks and filter fouling. Additionally, traditional methods may not be ideal for continuous bioprocessing schemes for primary clarification. Thus, an alternate application using acoustic (sound) waves was investigated to continuously separate cells from the cell culture fluid. Presented in this study is a detailed protocol for using a bench-scale acoustic wave separator (AWS) for the primary separation of culture fluid containing a monoclonal IgG1 antibody from a CHO cell bioreactor harvest. Representative data are presented from the AWS and demonstrate how to achieve effective cell clarification and product recovery. Finally, potential applications for AWS in continuous bioprocessing are discussed. Overall, this study provides a practical and general protocol for the implementation of AWS in primary clarification for CHO cell cultures and further describes its application potential in continuous bioprocessing.

Presented here is a protocol for the primary clarification of CHO cell culture using an acoustic separator. This protocol can be used for the primary clarification of shake flask cultures or bioreactor harvests and has the potential application for continuous clarification of the cell bleed material during perfusion bioreactor operations.

التوضيح الأولي لسائل زراعة الخلايا المقطوعة CHO باستخدام فاصل صوتي

Primary clarification is an essential step in a biomanufacturing process for the initial removal of cells from therapeutic products within the harvested ...