كيفن ماكلويد أن نعترف لاستخدام موسيقاه الإبداعية العموم المرخصة في الفيديو المرتبطة بها، بما في ذلك (بترتيب ظهورها) له المسارات &quot;استراحة المطار&quot; &quot;جدران&quot;، و &quot;ميلودراما المساء.&quot; نود أيضا أن نعترف Ndubisi Okeke وTorstrick فريدريك لمساعدتهم مع الفيديو الجراحة.

<ol>
	<li>Bailey, A. M., O'Neill, T. J., Morris, C. E., Peirce, S. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Arteriolar+Remodeling+Following+Ischemic+Injury+Extends+from+Capillary+to+Large+Arteriole+in+the+Microcirculation.">Arteriolar Remodeling Following Ischemic Injury Extends from Capillary to Large Arteriole in the Microcirculation.</a> Microcirculation. 15, 389-404 (2010).</li><li>Bruce, A. C., Peirce, S. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Exogenous+Thrombin+Delivery+Promotes+Collateral+Capillary+Arterialization+and+Tissue+Reperfusion+in+the+Murine+Spinotrapezius+Muscle+Ischemia+Model.">Exogenous Thrombin Delivery Promotes Collateral Capillary Arterialization and Tissue Reperfusion in the Murine Spinotrapezius Muscle Ischemia Model.</a> Microcirculation. 19, 143-154 (2012).</li><li>Mac Gabhann, F., Peirce, S. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Collateral+capillary+arterialization+following+arteriolar+ligation+in+murine+skeletal+muscle.">Collateral capillary arterialization following arteriolar ligation in murine skeletal muscle.</a> Microcirculation. 17, 333-347 (2010).</li><li>Niiyama, H., Huang, N. F., Rollins, M. D., Cooke, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Murine+Model+of+Hindlimb+Ischemia.">Murine Model of Hindlimb Ischemia.</a> J. Vis. Exp. (23), e1035 (2009).</li><li>Madeddu, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Murine+models+of+myocardial+and+limb+ischemia:+diagnostic+end-points+and+relevance+to+clinical+problems.">Murine models of myocardial and limb ischemia: diagnostic end-points and relevance to clinical problems.</a> Vascul. Pharmacol. 45, 281-301 (2006).</li><li>Cardinal, T. R., Kurjiaka, D. T., Hoying, J. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chronic+hindlimb+ischemia+impairs+functional+vasodilation+and+vascular+reactivity+in+mouse+feed+arteries.">Chronic hindlimb ischemia impairs functional vasodilation and vascular reactivity in mouse feed arteries.</a> Front. Physio. 2, 91 (2011).</li><li>Sefcik, L. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Selective+Activation+of+Sphingosine+1-Phosphate+Receptors+1+and+3+Promotes+Local+Microvascular+Network+Growth.">Selective Activation of Sphingosine 1-Phosphate Receptors 1 and 3 Promotes Local Microvascular Network Growth.</a> Tissue Eng. Part A. 17, 617-629 (2011).</li><li>Deindl, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Role+of+Ischemia+and+of+Hypoxia-Inducible+Genes+in+Arteriogenesis+After+Femoral+Artery+Occlusion+in+the+Rabbit.">Role of Ischemia and of Hypoxia-Inducible Genes in Arteriogenesis After Femoral Artery Occlusion in the Rabbit.</a> Circulation Research. 89, 779-786 (2001).</li><li>Chalothorn, D., Zhang, H., Smith, J. E., Edwards, J. C., Faber, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chloride+Intracellular+Channel-4+Is+a+Determinant+of+Native+Collateral+Formation+in+Skeletal+Muscle+and+Brain.">Chloride Intracellular Channel-4 Is a Determinant of Native Collateral Formation in Skeletal Muscle and Brain.</a> Circulation Research. 105, 89-98 (2009).</li><li>Scholz, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Contribution+of+Arteriogenesis+and+Angiogenesis+to+Postocclusive+Hindlimb+Perfusion+in+Mice.">Contribution of Arteriogenesis and Angiogenesis to Postocclusive Hindlimb Perfusion in Mice.</a> Journal of Molecular and Cellular Cardiology. 34, 775-787 (2002).</li><li>McClung, J. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Skeletal+muscle-specific+genetic+determinants+contribute+to+the+differential+strain-dependent+effects+of+hindlimb+ischemia+in+mice.">Skeletal muscle-specific genetic determinants contribute to the differential strain-dependent effects of hindlimb ischemia in mice.</a> Am. J. Pathol. 180, 2156-2169 (2012).</li><li>Dokun, A. O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+quantitative+trait+locus+(LSq-1)+on+mouse+chromosome+7+is+linked+to+the+absence+of+tissue+loss+after+surgical+hindlimb+ischemia.">A quantitative trait locus (LSq-1) on mouse chromosome 7 is linked to the absence of tissue loss after surgical hindlimb ischemia.</a> Circulation. 117, 1207-1215 (2008).</li><li>Faber, J. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Aging+causes+collateral+rarefaction+and+increased+severity+of+ischemic+injury+in+multiple+tissues.">Aging causes collateral rarefaction and increased severity of ischemic injury in multiple tissues.</a> Arterioscler. Thromb. Vasc. Biol. 31, 1748-1756 (2011).</li><li>Peng, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Gender+differences+affect+blood+flow+recovery+in+a+mouse+model+of+hindlimb+ischemia.">Gender differences affect blood flow recovery in a mouse model of hindlimb ischemia.</a> Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. 300, 2027-2034 (2011).</li><li>Li, Y., Guan, H., Hazarika, S., Liu, C., Annex, B. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Impaired+angiogenesis+following+hind-limb+ischemia+in+diabetes+mellitus+mice.">Impaired angiogenesis following hind-limb ischemia in diabetes mellitus mice.</a> Chin. Med. Sci. J. 22, 232-237 (2007).</li></ol>

الكتاب تعلن أنها لا تملك المصالح المتنافسة المالية.

وربط spinotrapezius الفئران النموذج المقدم هنا هو نموذج فعال الحيوان الصغير الذي لدراسة التعديلات الوظيفية والهيكلية التي تنجم عن انسداد الشرايين. هذا النموذج هو مكملا للنموذج استخداما نقص التروية hindlimb 4، من حيث أنه يقدم وجهة نظر كامل العضلات شبكات الاوعية الدموية الدقيقة سليمة لقرار مكانية عالية. وعلاوة على ذلك، لأنه يقع هذا العضلات فقط تحت الجلد الظهرية، فإنه يمكن الوصول إلى التصوير المجهري مع المسلسل intravital، وتقديم الأدوية المحلية عن طريق زرع رقيقة أو superfusion الفيلم 2. هذه الميزات تجعل من جاذبية النموذج الحيواني الصغيرة التي لدراسة آثار من الأهداف العلاجية الرواية على إعادة عرض الأوعية الدموية وتوسع الأوعية الوظيفية التالية انسداد الشرايين. ملاحظة يجب أن تستخدم بحذر عند مقارنة البيانات التي حصل عليها في نموذج ربط البيانات لspinotrapezius المكتسبة في نموذج ربط hindlimb بسبب د رئيسية عديدةifferences. أولا، يتم تثبيت العضلات spinotrapezius العضلات، وأنها تختلف عن عضلات الساق من حيث الوظيفة ونوع الألياف التوزيع. وقد أثبتت مجموعتنا سبق أن ربط تصلب في العضلات spinotrapezius يخلق نقص الأكسجة أو أقل لا يذكر في سلالات متطورة مع شبكات الضمان شريني، بالمقارنة مع نقص الأكسجة التي لوحظت في hindpaw بعد ربط الشريان الفخذي في النموذج hindlimb 1،8 - 10. لقد أظهرنا أيضا أن النموذج ربط spinotrapezius تنتج استجابة إعادة عرض مختلفة في BALB / ج الفئران مقارنة C57BL / الفئران 6، مع BALB / ج الفئران عن طريق إعادة عرض شبكات الضمانات الاحتياطية وإعادة عرض الشعرية C57BL / 6 عن طريق توسيع الاتصالات شريني القائمة 3. هناك اهتمام مواز بين هذه الملاحظات وتلك المصنوعة في نماذج ربط hindlimb، حيث BALB / ج الفئران تعاني من الانتعاش لفترة طويلة بعد ربط نضح مقارنة C57BL / 6 الفئران 9،11،12 &lt;/ سوب&gt;. في نماذج أخرى من نقص تروية الأنسجة، العمر 13 الجنس الماوس (14) وجود المرض يؤثر أيضا 15 الردود الأنسجة &#39;إلى انسداد شريني، على الرغم من أننا لم تختبر بعد هذه تنبؤ في نموذج ربط spinotrapezius. الثانية، وحجم الشريان الذي ligated في النموذج spinotrapezius أصغر بكثير من شريان الفخذ، وبالتالي فإن ربط يؤثر على حجم أصغر الأنسجة التي هي مزيد من المصب، أي على مستوى أدنى من شجرة الدورة الدموية، في spinotrapezius مقارنة hindlimb 3. وبالتالي، ينبغي النظر في الفرق التشريحية في موقع ربط في هذين النموذجين عند مقارنة ردود الفسيولوجية منها (على سبيل المثال إعادة عرض الأوعية الدموية) لهذا التدخل. الثالث، قد النحافه من spinotrapezius تسمح الأكسجين للوصول إلى جزء من النسيج unperfused من الدول المجاورةالأنسجة، مقارنة مع نقص التروية ونقص الأكسجة مجتمعة في النموذج hindlimb كما ذكر أعلاه 3. الرابعة، واستعادة التدفق إلى جزء من المصب spinotrapezius من ربط أسرع مما كانت عليه في ربط hindlimb. نموذج ربط spinotrapezius هو نموذج فريد المزمن وينبغي عدم الخلط مع نماذج أخرى من انسداد الشرايين عابرة أو نماذج من الاصابة ضخه نقص التروية. نرى أنه من الممكن تكييف هذا النموذج لاستيعاب هذه الأنواع من الظروف، ولكن هذا خارج نطاق العمل الواردة في هذه الوثيقة. وأخيرا، فإننا نحذر من له صلة مباشرة ما قبل السريرية الملاحظات في هذا النموذج إلى المظاهر السريرية للمرض نقص تروية في البشر، وخصوصا عندما تستخدم الشباب والأصحاء والفئران بسبب الحدود الفسيولوجية الكامنة مثل ارتفاع معدل القلب 5. ومع ذلك، فإننا نعتبر هذا النموذج الجديد باعتباره أداة قيمة لكشف الآليات الأساسية للاستجابات لربط الأنسجة وتحديد الإمكاناتrapeutic الأهداف في جو المجراة في. بالإضافة إلى الملاحظات المقدمة الجراحية في إجراء عملية ربط الشريان تغذية spinotrapezius (ملاحظة التشريحية (6A)، التمييز بين الشريان من الوريد (9A)، واستخدام رباط واحد (11A))، وبعض الجوانب الأخرى من الاستفادة من الإجراء المناقشة. أولا، يتم إجراء شق مثالي الأولية التي عبر الحدود منصة الدهون الظهرية (أو مم عدة الذيلية إلى الكتف، إذا التصور عبر الجلد من غير الممكن) صغيرة مثل الجراح هو مريح مع، وتوسعت خلال الإجراء إذا لزم الأمر. هذه الممارسة يقلل من خياطة اللازمة لإغلاق الشق، وهو مناسب للجراح، ويقلل من الوقت الداخلي، وأيضا أقل تهيجا للحيوان خلال الانتعاش. بدلا من ذلك، قد شق الجلد أكبر من المناسب وفقا لتفضيل الجراح، منذ العضلات يمكن أن يكون أسهل لتحديد موقع مع حقل الموسعة. في هذه الحالة، قد شقالاستفادة من شكل حصان الأحذية المفتوحة مع وجه الإنسي للسماح للطي نحو العمود الفقري. في حين جعل شق الجلد وتمتد من خلال طبقات الجلد الثانوية، في حالة تلف سطح سفينة ويسبب نزيف، وتطبيق الضغط الخفيف مع شاش معقم وتوفير الوقت لالإرقاء. أيضا من ملاحظة، فمن المهم للتعامل مع الأنسجة مع الحد الأدنى من القوة المطلوبة، وحيثما كان ذلك ممكنا الاستمرار مع ملقط أقرب إلى الحدود العضلات الجانبية للوبعيدا عن المنطقة الدماغية المقصود. هذه الممارسة تساعد على تجنب الإصابة سحق، الذي يمكن أن يؤدي إلى التهاب الأنسجة ردود إضافية بوساطة التي قد تؤدي إلى تشويش استجابة الأوعية الدموية إعادة عرض أثار من قبل ربط الشرايين. في الختام، لقد أثبتنا استخدام العضلات spinotrapezius الفئران كنموذج لدراسة الأوعية الدموية الجراحية والأنسجة الردود على ربط شريني. هذا النموذج هو مناسبة لتقييم التغيرات intravital الأوعية الدموية (على سبيلسبيل المثال، توسع الأوعية الوظيفية)، وفيفو السابقين لتقييم التغيرات الوعائية (على سبيل المثال، والتصوير مناعي وتحديد الكميات من شبكات الأوعية الدموية). وقد أثبتت كل الدراسات ما قبل السريرية والسريرية أن استجابة الفرد لعرقلة شريني (على سبيل المثال عن طريق ربط في الفئران أو لويحات تصلب الشرايين لدى البشر) يعتمد على سنهم وجود أو عدم وجود مرض (مثل داء السكري) من قطر الشريان عرقلت ، التركيبة الجينية للفرد، والطلب التمثيل الغذائي في الأنسجة 11-15. نماذج الفئران، مثل تلك التي عرضت هنا، الباحث الاستفادة من الخلافات سلالة محددة التشريحية والوراثية والظواهر بأمراض محددة، مما يسهل تحقيق في هذه العلاقات المعقدة.

النماذج الحيوانية من نقص التروية المزمن هي أدوات قيمة للتحقيق في الفيزيولوجيا المرضية للأمراض الدماغية، مثل مرض الشريان المحيطي، مرض الشريان التاجي، والأمراض الدماغية الوعائية. في القوارض، كما هو الحال في البشر، وانسداد الشرايين يؤدي إلى إعادة عرض الهيكلي للشبكة الأوعية الدموية، بما في ذلك تخلق الشرايين والأوعية الدموية. في المرضى الأصحاء والشباب، وهذا يمكن أن يكون كافيا لإعادة عرض الأنسجة إنقاذ من الاصابة التي يسببها نقص التروية، ولكن شارك في حالة مرضية مثل السكري يمكن أن تضر بشدة إعادة عرض والانتعاش. فهم الآليات الكامنة والأحداث الأوعية الدموية إعادة عرض أمر ضروري لتطوير علاجات التي تحفز هذه العمليات عودة التوعي الذاتية. حاليا، ربط الشريان الفخذي أو استئصال في hindlimb هو الأسلوب القياسي لدراسة نقص التروية المزمن الناجم عن إعادة عرض الأوعية الدموية في الحيوانات الصغيرة 4،5. تحليل القطر، والربط، وتفاعليةو microvessels التي تشكل شبكة الأوعية الدموية المصب من الشريان الفخذي ligated أمر صعب، ولكن نظرا لسمك العضلات. وقد وضعنا نموذجا ربط تصلب في العضلات الماوس spinotrapezius: ربط جانب واحد من الشريان الجانبي تغذية العضلات في هذه الظهرية استقرار 1. وspinotrapezius رقيقة نسبيا (60-200 ميكرون) وهي قابلة للالمناعية وجه EN لتقييم طوبولوجيا شبكة كاملة مع قرار وحيد الخلية، مما يسمح بإجراء فحص مفصل للأحداث إعادة عرض الأوعية الدموية في جميع أنحاء الأنسجة بالكامل. وspinotrapezius أيضا سطحية ويمكن الوصول إليها، وبالتالي يمكن ملاحظتها بسهولة سفنها بواسطة المجهر intravital، لتوصيف الفعال للتأثير إعادة عرض وربط تصلب الأوعية الدموية على التفاعل. في هذا التقرير، ونحن تصف بالتفصيل وشرح ربط الماوس شريني spinotrapezius النموذج. سواء في الجسم الحي وخارج الجسم الحي ليويرد وصف لعملية جراحية تقييم thods التالية، بما في ذلك قياس توسع الأوعية الوظيفية، وهو ما ثبت قد انخفضت في ظل ظروف نقص تروية 6، والتصوير مناعي شبكات الاوعية الدموية الدقيقة كامل العضلات. نحن تشمل أيضا نتائج دراستين منفصلتين رائدة للتدليل على فائدة هذا النموذج. أولا، نحن تستخدم نموذج ربط الشرايين للحث على زيادة ذات دلالة إحصائية في تعرج السفن في C57BL / 6 الفئران (الشكل 2B). زيادات تعرج أثناء تخلق الشرايين في الضمانات شرين. في سلالات الفئران الأخرى، والتي هي أكثر عرضة للنقص التروية بسبب غياب ضمانات الشرايين (على سبيل المثال BALB / ج)، ويلاحظ arterialization الشعرية 10. تم الكشف عن arterialization الشعرية بأقطار زيادة وتنمية العضلات على نحو سلس α تفاعل أكتين. الثاني، التحفيز الكهربائي للعضلات الوظيفية يؤدي إلى توسع الأوعية في الشرايين الطرفية للspinotrapeziلنا (الشكل 3B).

<table border="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><td> اسم </td><td> شركة </td><td> كتالوج رقم </td><td> تعليقات </td></tr><tr><td> قزحية مقص </td><td> FST </td><td> 14090-09 </td><td> النوع: أداة </td></tr><tr><td> حجم 7 ملقط </td><td> FST </td><td> 11271-30 </td><td> النوع: أداة </td></tr><tr><td> الحجم 5 ملقط </td><td> FST </td><td> 11251-20 </td><td> النوع: أداة </td></tr><tr><td> ربيع مقص </td><td> Roboz </td><td> RS5671 </td><td> النوع: أداة </td></tr><tr><td> مسبار مجهري </td><td> FST </td><td> 10140-03 </td><td> النوع: أداة قد تكون بديلا مع التحقيق مباشرة </td></tr><tr><td> إبرة حامل </td><td> FST </td><td> 12500-12 </td><td> النوع: أداة </td></tr><tr><td> الحث غرفة </td><td> JD الطبية ص. المحدودة، وشركة </td><td> IC-1086 </td><td>نوع: معدات </td></tr><tr><td> العين جل </td><td> Dechra </td><td> NDC 17033-211-38 </td><td> نوع: الكاشف </td></tr><tr><td> الحرارة منصة </td><td> FST </td><td> 21060-01 </td><td> نوع: معدات </td></tr><tr><td> درجة حرارة المستقيم التحقيق </td><td> FST </td><td> 21060-01 </td><td> نوع: معدات </td></tr><tr><td> تحفيز كهربائي </td><td> FHC </td><td> UEWSGCSE0N1M </td><td> نوع: معدات </td></tr><tr><td> البوليمر كلاي الحرفيين </td><td> POLYFORM </td><td> N / A </td><td> نوع: معدات </td></tr><tr><td> PowerLab نظام الحصول على البيانات </td><td> ADInstruments </td><td> ML 845 </td><td> نوع: معدات </td></tr><tr><td> المعزل التحفيز </td><td> ADInstruments </td><td> FE 180 </td><td> نوع: معدات </td></tr><tr><td> LabChart </td><td> ADInstruments </td><td> ML S060 / 7 </td><td> نوع: البرمجيات </td></tr&gt; <tr><td> ينعكس الضوء المجهر الفلورسنت </td><td> OLYMPUS </td><td> BFXM </td><td> نوع: معدات </td></tr><tr><td> عالية MW الفلورسنت ديكستران </td><td> سيجما </td><td> FD250S-100MG </td><td> نوع: الكاشف </td></tr><tr><td> فيديو الفرجار </td><td> كولورادو فيديو </td><td> 308 </td><td> نوع: معدات </td></tr><tr><td> تحليل الآلي الأوعية الدموية (AVA) </td><td> Microvision الطبية </td><td></td><td> نوع: البرمجيات </td></tr><tr><td> مكافحة αSMA Fluorophore مترافق </td><td> سيجما </td><td> 1A4-Cy3 </td><td> نوع: الكاشف نسيلي، 1:100 </td></tr><tr><td> مجهر الفلورسنت </td><td> OLYMPUS </td><td> BFXM </td><td> نوع: معدات </td></tr><tr><td> عالية الوزن الجزيئي الفلورسنت ديكستران </td><td> سيجما </td><td> FD250S-100MG </td><td> نوع: الكاشف </td></tr></tbody></table>

murine spinotrapezius model to assess the impact of arteriolar ligation on microvascular function and remodeling

وspinotrapezius الفئران هو، وسطحية رقيقة العضلات الهيكلية الدعم الذي يمتد من T3 إلى L4، ويمكن الوصول إليه بسهولة عن طريق شق الجلد الظهرية. التشريح الفريد يجعل spinotrapezius مفيدة للتحقيق في الإصابة الدماغية وإعادة عرض الاوعية الدموية الدقيقة لاحقة. هنا، علينا أن نبرهن نموذج ربط تصلب في العضلات وspinotrapezius الفئران التي تم تطويرها من قبل فريق البحث ونشرت سابقا 1-3. لبعض سلالات الفئران الضعيفة، مثل الماوس BALB / ج، وهذا يخلق جراحة ربط موثوق الهيكل العظمي نقص تروية العضلات ويخدم كمنصة للتحقيق في العلاجات التي تحفز عودة التوعي. وأظهرت أيضا أساليب التقييم، بما في ذلك استخدام المجهر متحد البؤر intravital و. هي مناسبة تماما لspinotrapezius لدراسات التصوير بسبب هذه سهولة الوصول إليها (التشريح الظهرية السطحية) وركاكة النسبي (60-200 ميكرون). يمكن تركيبه عضلات الوجه spinotrapezius EN، وتيسيرتصوير كامل العضلات شبكات الاوعية الدموية الدقيقة دون باجتزاء النسيجية. وصفنا استخدام المجهر intravital للحصول على قياسات بعد إجراء توسع الأوعية الوظيفية، على وجه التحديد، فإن الزيادة في القطر arterilar نتيجة لتقلص العضلات. علينا أن نبرهن أيضا إجراءات الحصاد وإصلاح الأنسجة، تمهيدا المناعية اللازمة لدراسات واستخدام المجهر متحد البؤر.

ويرد عرض العمليات الجراحية في الشريان الرئيسي تغذية العضلات التي يخضع spinotrapezius ربط في الشكل 1، مع تسميات تشير إلى مجالات الاهتمام. صورة مبائر سبيل المثال في المنطقة وتحصد immunostained من العضلات يقع المصب مباشرة من الشريان ligated بعد أسبوع واحد يظهر في ربط الشكل 2A. الشرايين تحتوي على ضمانات الموسع العضلات الملساء ألفا أكتين التعبير عن خلايا العضلات الملساء (أحمر) عرض تعرج مميزة بعد ربط. تعرج السفينة، كما ورد النسبة بين طول مسار السفينة ومسافة الحبل (أي الخط يمتد على مدى النهاية سفينة المسار نفسه)، في العضلات ligated (يمين) ومما يعزز نسبة إلى العضلات المقابل unligated (الشكل 2B، ن = 8) . ويبين الشكل 3 نتائج الدراسة التجريبية التي تم قياسها محطة شرين توسع الأوعية الوظيفية باستخدام المجهر intravital. كما هو متوقع، شريني دي<html> ameter يزيد بشكل كبير بعد تقلص العضلات التحفيز الكهربائي الناجم عن. <img src="/files/ftp_upload/50218/50218fig1.jpg" alt="الشكل 1" fo:content-width="4in" fo:src="/files/ftp_upload/50218/50218fig1highres.jpg"/> الشكل 1. وligated الجراحي الميداني من العضلات والشرايين ينعكس spinotrapezius الأعلاف. الشريان الأعلاف في الموقعين المشار إليها بواسطة A0. بين هذه الحروف المركبة وعرقلة تدفق الدم بعد، ومقطوع الشريان في موقع المشار إليها بواسطة A. الجزء المستهدف من التحولات الشريان من منصة الدهون البطنية، التي حددها C، في عضلة spinotrapezius، التي حددها D، وأشار في موقع يشار إلى سهم مع اتجاه تدفق B. بواسطة E. سهم متقطع ghres.jpg &quot;/&gt; الشكل 2. صورة مبائر من العضلات spinotrapezius شبكة الاوعية الدموية الدقيقة للدراسة التجريبية لتعرج. (A) المقطوع وimmunostained العضلات كلها محمولة على العضلات الملساء لألفا أكتين والمصورة باستخدام المجهر متحد البؤر. مجال الرؤية معارض منطقة المصب العضلات تقع مباشرة من ligated شرين 1 أسبوع آخر ربط. سفن متعرجة واضحة في العضلات نتيجة للربط (B) نتائج الدراسة التجريبية تظهر زيادة كبيرة (P = 0.035، 1 طالب الذيل تي اختبار). تعرج التي أظهرتها microvessels في العضلات ligated التي تقاس طول مسار السفينة إلى الحبل نسبة المسافة للمحاكمة من الفئران C57BL / 6 (ن = 8) مقارنة مع السيطرة المقابل. <img src="/files/ftp_upload/50218/50218fig3.jpg" alt="الشكل 3" fo:content-width="4.5in" fo:src="/files/ftp_upload/50218/50218fig3highres.jpg"/> فيقوإعادة 3. Intravital التصوير المجهري للتوسع الأوعية الوظيفية في الشرايين spinotrapezius، في الجسم الحي. (A) photomicrographs ممثل الشرايين الطرفية في بقية spinotrapezius (يسار) ومباشرة بعد وقف من 8 هرتز تقلص العضلات (يمين). (B) قطر شرين الطرفية في بقية ( 8.5 ± 0.5 ميكرون، يسار) والتالي مباشرة (11 ± 1 ميكرومتر، الشرق) 90 ثانية من تقلص العضلات، زيادة كبيرة قطرها الذي شريني (P = 0.032؛ الذيل 1-T-إقران اختبار) في BALB / C الفئران (ن = 6). وأشارت نسبة التغير (يمين).

Watch this Scientific Journal Video about Murine Spinotrapezius Model to Assess the Impact of Arteriolar Ligation on Microvascular Function and Remodeling at JoVE.com

Murine Spinotrapezius Model to Assess the Impact of Arteriolar Ligation on Microvascular Function and Remodeling

ونحن يبرهن على وجود رواية نموذج ربط الشرايين في العضلات spinotrapezius الفئران، بما في ذلك إجراء خطوة بخطوة ووصف الأجهزة المطلوبة. وصفنا الجراحة وقياسات النتائج ذات الصلة المتعلقة إعادة عرض شبكة الأوعية الدموية وتوسع الأوعية الوظيفية باستخدام المجهر متحد البؤر intravital و.

Spinotrapezius نموذج الفئران لتقييم أثر ربط شريني ظيفة الاوعية الدموية الدقيقة وعلى إعادة عرض

The murine spinotrapezius is a thin, superficial skeletal support muscle that extends from T3 to L4, and is easily accessible via dorsal skin incision. ...

murine-spinotrapezius-model-to-assess-impact-arteriolar-ligation-on

Research

JoVE Journal

Medicine

12.0K Views.  University of Virginia. ونحن يبرهن على وجود رواية نموذج ربط الشرايين في العضلات spinotrapezius الفئران، بما في ذلك إجراء خطوة بخطوة ووصف الأجهزة المطلوبة. وصفنا الجراحة وقياسات النتائج ذات الصلة المتعلقة إعادة عرض شبكة الأوعية الدموية وتوسع الأوعية الوظيفية باستخدام المجهر متحد البؤر intravita...

Video: Murine Spinotrapezius Model to Assess the Impact of Arteriolar Ligation on Microvascular Function and Remodeling

Coronary Artery Ligation and Intramyocardial Injection in a Murine Model of Infarction

Mouse models are a valuable tool for studying acute injury and chronic remodeling of the myocardium in vivo. With the advent of genetic modifications to the whole organism or the myocardium and an array of biological and/or synthetic materials, there is great potential for any combination of these to assuage the extent of acute ischemic injury and impede the onset of heart failure pursuant to myocardial remodeling. 
Here we present the methods and materials used to reliably perform this microsurgery and the modifications involved for temporary (with reperfusion) or permanent coronary artery occlusion studies as well as intramyocardial injections. The effects on the heart that can be seen during the procedure and at the termination of the experiment in addition to histological evaluation will verify efficacy. 
Briefly, surgical preparation involves anesthetizing the mice, removing the fur on the chest, and then disinfecting the surgical area. Intratracheal intubation is achieved by transesophageal illumination using a fiber optic light. The tubing is then connected to a ventilator. An incision made on the chest exposes the pectoral muscles which will be cut to view the ribs. For ischemia/reperfusion studies, a 1 cm piece of PE tubing placed over the heart is used to tie the ligature to so that occlusion/reperfusion can be customized. For intramyocardial injections, a Hamilton syringe with sterile 30gauge beveled needle is used. When the myocardial manipulations are complete, the rib cage, the pectoral muscles, and the skin are closed sequentially. Line block analgesia is effected by 0.25% marcaine in sterile saline which is applied to muscle layer prior to closure of the skin. The mice are given a subcutaneous injection of saline and placed in a warming chamber until they are sternally recumbent. They are then returned to the vivarium and housed under standard conditions until the time of tissue collection. At the time of sacrifice, the mice are anesthetized, the heart is arrested in diastole with KCl or BDM, rinsed with saline, and immersed in fixative. Subsequently, routine procedures for processing, embedding, sectioning, and histological staining are performed. 
Nonsurgical intubation of a mouse and the microsurgical manipulations described make this a technically challenging model to learn and achieve reproducibility. These procedures, combined with the difficulty in performing consistent manipulations of the ligature for timed occlusion(s) and reperfusion or intramyocardial injections, can also affect the survival rate so optimization and consistency are critical.

Numerous genetic manipulations and/or intramyocardial injections of genes, proteins, cells, and/or biomaterials are superimposed upon the dimension of time in studies of acute ischemia/ reperfusion injury and chronic remodeling in mice. This video illustrates the microsurgical procedures for ischemia/reperfusion, permanent coronary artery ligation, and intramyocardial injection studies.

الشريان التاجي ربط Intramyocardial وحقن الفئران في نموذج من احتشاء

Mouse models are a valuable tool for studying acute injury and chronic remodeling of the myocardium in vivo.  With the advent of genetic modifications to ...

Non-invasive Assessment of Microvascular and Endothelial Function

The authors have utilized capillaroscopy and forearm blood flow techniques to investigate the role of microvascular dysfunction in pathogenesis of cardiovascular disease. Capillaroscopy is a non-invasive, relatively inexpensive methodology for directly visualizing the microcirculation. Percent capillary recruitment is assessed by dividing the increase in capillary density induced by postocclusive reactive hyperemia (postocclusive reactive hyperemia capillary density minus baseline capillary density), by the maximal capillary density (observed during passive venous occlusion). Percent perfused capillaries represents the proportion of all capillaries present that are perfused (functionally active), and is calculated by dividing postocclusive reactive hyperemia capillary density by the maximal capillary density. Both percent capillary recruitment and percent perfused capillaries reflect the number of functional capillaries. The forearm blood flow (FBF) technique provides accepted non-invasive measures of endothelial function: The ratio FBFmax/FBFbase is computed as an estimate of vasodilation, by dividing the mean of the four FBFmax values by the mean of the four FBFbase values. Forearm vascular resistance at maximal vasodilation (FVRmax) is calculated as the mean arterial pressure (MAP) divided by FBFmax. Both the capillaroscopy and forearm techniques are readily acceptable to patients and can be learned quickly.
The microvascular and endothelial function measures obtained using the methodologies described in this paper may have future utility in clinical patient cardiovascular risk-reduction strategies. As we have published reports demonstrating that microvascular and endothelial dysfunction are found in initial stages of hypertension including prehypertension, microvascular and endothelial function measures may eventually aid in early identification, risk-stratification and prevention of end-stage vascular pathology, with its potentially fatal consequences.

Capillaroscopy is a non-invasive, relatively inexpensive methodology for directly visualizing the microcirculation. The forearm blood flow technique provides accepted non-invasive measures of endothelial function.

غير الغازية تقييم وظيفة الاوعية الدموية الدقيقة غشائي

The authors have utilized capillaroscopy and forearm blood flow techniques to investigate the role of microvascular dysfunction in pathogenesis of ...

A Murine Model of Myocardial Ischemia-reperfusion Injury through Ligation of the Left Anterior Descending Artery

Acute or chronic myocardial infarction (MI) are cardiovascular events resulting in high morbidity and mortality. Establishing the pathological mechanisms at work during MI and developing effective therapeutic approaches requires methodology to reproducibly simulate the clinical incidence and reflect the pathophysiological changes associated with MI. Here, we describe a surgical method to induce MI in mouse models that can be used for short-term ischemia-reperfusion (I/R) injury as well as permanent ligation. The major advantage of this method is to facilitate location of the left anterior descending artery (LAD) to allow for accurate ligation of this artery to induce ischemia in the left ventricle of the mouse heart. Accurate positioning of the ligature on the LAD increases reproducibility of infarct size and thus produces more reliable results. Greater precision in placement of the ligature will improve the standard surgical approaches to simulate MI in mice, thus reducing the number of experimental animals necessary for statistically relevant studies and improving our understanding of the mechanisms producing cardiac dysfunction following MI. This mouse model of MI is also useful for the preclinical testing of treatments targeting myocardial damage following MI.

We introduce a surgical method to induce experimental ischemia/reperfusion (I/R) injury to simulate myocardial infarction (MI) in mouse models that allows for more clarity in positioning of the ligation on the left anterior descending artery (LAD) to increase the reproducibility of MI experiments in mice.

A الفئران نموذج من عضلة القلب إصابة نقص التروية، ضخه من خلال ربط الشريان الأمامي اليسار تنازليا

Acute or chronic myocardial infarction (MI) are cardiovascular events resulting in high morbidity and mortality. Establishing the pathological mechanisms ...

A Rat Carotid Balloon Injury Model to Test Anti-vascular Remodeling Therapeutics

The rat carotid balloon injury is a well-established surgical model that has been used to study arterial remodeling and vascular cell proliferation. It is also a valuable model system to test, and to evaluate therapeutics and drugs that negate maladaptive remodeling in the vessel. The injury, or barotrauma, in the vessel lumen caused by an inflated balloon via an inserted catheter induces subsequent neointimal growth, often leading to hyperplasia or thickening of the vessel wall that narrows, or obstructs the lumen. The method described here is sufficiently sensitive, and the results can be obtained in relatively short time (2 weeks after the surgery). The efficacy of the drug or therapeutic against the induced-remodeling can be evaluated either by the post-mortem pathological and histomorphological analysis, or by ultrasound sonography in live animals. In addition, this model system has also been used to determine the therapeutic window or the time course of the administered drug. These studies can leadto the development of a better administrative strategy and a better therapeutic outcome. The procedure described here provides a tool for translational studies that bring drug and therapeutic candidates from bench research to clinical applications.

The rat carotid balloon injury model described below allows researchers to evaluate drugs or therapeutics that negate injury-induced arterial hyperplasia. Detailed pre-surgical preparation, surgical procedure, and post-surgical cares of the animal are described.

بالون إصابة الفئران السباتي نموذج لاختبار التداوي إعادة عرض لمكافحة الأوعية الدموية

The rat carotid balloon injury is a well-established surgical model that has been used to study arterial remodeling and vascular cell proliferation. It is ...

Murine Left Anterior Descending (LAD) Coronary Artery Ligation: An Improved and Simplified Model for Myocardial Infarction

Ischemic heart disease (IHD), or acute coronary syndrome (ACS), is one of the leading causes of death in the United States. IHD is characterized by reduced blood supply to the heart, resulting in the loss of oxygen to and the ensuing necrosis of the heart muscle. The MI model has gained popularity for its use as a short-term ischemia-reperfusion model and a long-term permanent ligation model. Below, we describe a reliable method for the permanent ligation of the LAD. With mouse genetic engineering technology becoming more advanced, and with an increasing availability of quality murine surgical instruments, the mouse has become a popular model for MI surgeries. Our surgical model incorporates the use of an easily reversible anesthetic for the rapid recovery of the mouse; a minimally invasive endotracheal intubation without involving a tracheotomy; and a thoracentesis through the original thoracotomy site without creating an additional incision in the chest, as is done in some other methods, to effectively remove excess blood and air from the chest cavity. This method is comparatively less invasive than other methods, which dramatically reduces surgical and post-surgical complications and mortality and improves reproducibility.

Murine Left Anterior Descending LAD Coronary Artery Ligation: An Improved and Simplified Model for Myocardial Infarction

We provide a reliable method for left anterior descending artery (LAD) ligation in a mouse model. This method is comparatively less invasive than other methods, involving endotracheal intubation, a left-sided thoracotomy approach, and thoracentesis. This method can be used as a model for both acute and chronic myocardial infarction (MI).

الفئران اليسار الأمامي تنازلي (LAD) التاجي ربط الشريان: نموذج تحسين والمبسطة لاحتشاء عضلة القلب

Ischemic heart disease (IHD), or acute coronary syndrome (ACS), is one of the leading causes of death in the United States. IHD is characterized by ...

Assessment of Human Adipose Tissue Microvascular Function Using Videomicroscopy

While obesity is closely linked to the development of metabolic and cardiovascular disease, little is known about mechanisms that govern these processes. It is hypothesized that pro-atherogenic mediators released from fat tissues particularly in association with central/visceral adiposity may promote pathogenic vascular changes locally and systemically, and the notion that cardiovascular disease may be the consequence of adipose tissue dysfunction continues to evolve. Here, we describe a unique method of videomicroscopy that involves analysis of vasodilator and vasoconstrictor responses of intact small human arterioles removed from the adipose depot of living human subjects. Videomicroscopy is used to examine functional properties of isolated microvessels in response to pharmacological or physiological stimuli using a pressured system that mimics in vivo conditions. The technique is a useful approach to gain understanding of the pathophysiology and molecular mechanisms that contribute to vascular dysfunction locally within the adipose tissue milieu. Moreover, abnormalities in the adipose tissue microvasculature have also been linked with systemic diseases. We applied this technique to examine depot-specific vascular responses in obese subjects. We assessed endothelium-dependent vasodilation to both increased flow and acetylcholine in adipose arterioles (50 - 350 &#181;m internal diameter, 2 - 3 mm in length) isolated from two different adipose depots during bariatric surgery from the same individual. We demonstrated that arterioles from visceral fat exhibit impaired endothelium-dependent vasodilation compared to vessels isolated from the subcutaneous depot. The findings suggest that the visceral microenvironment is associated with vascular endothelial dysfunction which may be relevant to clinical observation linking increased visceral adiposity to systemic disease mechanisms. The videomicroscopy technique can be used to examine vascular phenotypes from different fat depots as well as compare findings across individuals with different degrees of obesity and metabolic dysfunction. The method can also be used to examine vascular responses longitudinally in response to clinical interventions.

Videomicroscopy systems are used to examine functional properties of isolated adipose tissue arterioles in response to physiological and pharmacological stimuli. This technique can be used to examine microvascular phenotypes in different adipose tissue domains in obese humans.

تقييم الدالة Microvascular الأنسجة الدهنية البشرية باستخدام فيديوميكروسكوبي

While obesity is closely linked to the development of metabolic and cardiovascular disease, little is known about mechanisms that govern these processes. ...

Isometric Contractility Measurement of the Mouse Mesenteric Artery Using Wire Myography

The wire myograph technique is used to assess the contractility of vascular smooth muscles in response to depolarization, GPCR agonists/inhibitors and drugs. It is widely used in many studies on the physiological functions of vascular smooth muscle, the pathogenesis of vascular diseases such as hypertension, and the development of smooth muscle relaxant drugs. The mouse is a widely used model animal with a large pool of disease models and genetically modified strains. We introduced this method to measure the isometric contraction of mouse mesenteric artery in detail. A 1.4-mm segment of mouse mesenteric resistance artery was isolated and mounted on a myograph chamber by passing two steel wires through its lumen. After equilibration and normalization steps, the vessel segment was potentiated by a high-K+ solution twice prior to the contraction assay. As an example of the application of this method in drug development, we measured the relaxant effect of a novel natural substance, neoliensinine, isolated from a Chinese herb, embryos of the lotus seed (Nelumbo nucifera Gaertn.) on mouse mesenteric arteries. The vessel segments mounted on the myograph chamber were stimulated with a high-K+ solution. When the force tension reached a stable sustained phase, cumulative doses of neoliensinine were added to the chamber. We found that neoliensinine had a dose-dependent relaxant effect on smooth muscle contraction, thus suggesting that it bears potential activity against hypertension. In addition, as the vessel segment can survive at least 4 hours after mounting and maintain contractility induced by the high-K+ solution for many times, we suggest that the wire myograph system may be used for the time-consuming process of drug screening.

The wire myograph technique is used to investigate vascular smooth muscle functions and screen new drugs. We report a detailed protocol for measuring the isometric contractility of the mouse mesenteric artery and for screening new relaxants of vascular smooth muscle.

متساوي القياس كونتراكتيليتي القياس الشريان المساريقي العلوي الماوس باستخدام أسلاك ميوجرافي

The wire myograph technique is used to assess the contractility of vascular smooth muscles in response to depolarization, GPCR agonists/inhibitors and ...

Murine Myocardial Infarction Model using Permanent Ligation of Left Anterior Descending Coronary Artery

Myocardial infarction (MI) and acute coronary diseases are among the most prominent causes of death in population with western lifestyle. The murine models of MI with permanent ligation of left-anterior descending (LAD) coronary artery closely mimics MI in humans. Murine models benefit from the extensive genetic engineering available nowadays. Here we propose a reproducible murine surgical model of myocardial infarction by permanent LAD coronary ligation. Our technique comprises anesthesia with ketamine/xylazine that can be rapidly reversed by administration of an antagonist, intubation without tracheotomy for mechanical-assisted ventilation, ventilation with application of extrinsic positive end-expiratory pressure (PEEP) to avoid alveolar collapse, a thoracotomy method limiting to the minimum surgical lesions made to skeletal muscles, and lung inflation without thoracentesis. This method is sparsely invasive, reproducible and reduces post-surgery mortality and complications.

Herein we describe a surgical procedure showing how to achieve permanent ligation of the left-anterior descending coronary artery in mice. This model is of high relevance to investigate the pathophysiology of myocardial infarction and the concomitant biological processes.

نموذج احتشاء عضلة القلب Murine باستخدام الربط الدائم للشريان التاجي الأمامي الأيسر

Myocardial infarction (MI) and acute coronary diseases are among the most prominent causes of death in population with western lifestyle. The murine ...

A Non-Invasive Method for Generating the Cyclic Loading-Induced Intra-Articular Cartilage Lesion Model of the Rat Knee

The pathophysiology of primary osteoarthritis (OA) remains unclear. However, a specific subclassification of OA in relatively younger age groups is likely correlated with a history of articular cartilage damage and ligament avulsion. Surgical animal models of OA of the knee play an important role in understanding the onset and progression of post-traumatic OA and aid in the development of novel therapies for this disease. However, non-surgical models have been recently considered to avoid traumatic inflammation that could affect the evaluation of the intervention. 
In this study, an intra-articular cartilage lesion rat model induced by in vivo cyclic compressive loading was developed, which allowed researchers to (1) determine the optimal magnitude, speed, and duration of load that could cause focal cartilage damage; (2) assess post-traumatic spatiotemporal pathological changes in chondrocyte vitality; and (3) evaluate the histological expression of destructive or protective molecules that are involved in the adaptation and repair mechanisms against joint compressive loads. This report describes the experimental protocol for this novel cartilage lesion in a rat model.

Here, we present the cyclic loading-induced intra-articular cartilage lesion model of the rat knee, generated by 60 cyclic compressions over 20 N, resulting in damage to the femoral condylar cartilage in rats.

طريقة غير جراحية لتوليد نموذج آفة الغضروف داخل المفصل الناجم عن التحميل الدوري لركبة الجرذ

The pathophysiology of primary osteoarthritis (OA) remains unclear. However, a specific subclassification of OA in relatively younger age groups is likely ...

Left Coronary Artery Ligation: A Surgical Murine Model of Myocardial Infarction

Ischemic heart disease and subsequent myocardial infarction (MI) is one of the leading causes of mortality in the United States and around the world. In order to explore the pathophysiological changes after myocardial infarction and design future treatments, research models of MI are required. Permanent ligation of the left coronary artery (LCA) in mice is a popular model to investigate cardiac function and ventricular remodeling post MI. Here we describe a less invasive, reliable, and reproducible surgical murine MI model by permanent ligation of the LCA. Our surgical model comprises of an easily reversible general anesthesia, endotracheal intubation that does not require a tracheotomy, and a thoracotomy. Electrocardiography and troponin measurement should be performed to ensure MI. Echocardiography at day 28 after MI will discern heart function and heart failure parameters. The degree of cardiac fibrosis can be evaluated by Masson's trichrome staining and cardiac MRI. This MI model is useful for studying the pathophysiological and immunological alterations after MI.

Presented here is a surgical procedure for permanent ligation of the left coronary artery in mice. This model can be used to investigate the pathophysiology and associated inflammatory response after myocardial infarction.

ربط الشريان التاجي الأيسر: نموذج الفئران الجراحي لاحتشاء عضلة القلب

Ischemic heart disease and subsequent myocardial infarction (MI) is one of the leading causes of mortality in the United States and around the world. In ...