We would like to thank members of the Tessier lab for critical reading of this manuscript and helpful suggestions during the preparation of this protocol.

1. Starvation <ol><li> Préparer voler des flacons de famine en saturant une boule de coton avec 18,2 MQ eau au fond d&#39;un flacon de mouche standard. Alternativement, saturer de même une petite bande de papier filtre avec 18,2 MQ eau et lieu à un angle dans le flacon. </li><li> Recueillir les mouches dans des ensembles de ~ 100 animaux sur un coussin de CO 2, puis ajouter les mouches à un flacon préparé. Remarque: Les meilleurs résultats sont obtenus avec les animaux qui sont âgés de moins de 5 jours. Cependant, l&#39;âge exact des animaux peut être contrôlée comme une variable expérimentale pour déterminer les changements dans les préférences des goûts au fil du temps. </li><li> Utiliser une boule de coton ou de mousse bouchon pour fixer les flacons fermés. Placez les flacons de leur côté dans un incubateur à environnement contrôlé. Maintenir la température à 25 ° C et le taux d&#39;humidité supérieur à 70%. Laisser les flacons intacts pendant 24 heures. </li></ol> 2. Goût préférence Assay <ol><li> Préparer tous sapides pour le test le même jour uns tests. Remarque: Les tastants exactes à utiliser varie en fonction de la question expérimentale posées. Ce qui suit est un exemple tastants utilisés dans ce protocole. Voir la section 4 pour les optimisations. <ol><li> Préparer le contrôle exhausteur de goût (1 mM de saccharose) en combinant 10 ul de 100 mM solution de saccharose, 13 pi de colorant alimentaire rouge, et 977 pi de 18,2 MQ eau. </li><li> Préparer exhausteur de goût expérimental (5 mM de saccharose) en combinant 50 ul de 100 mM solution de saccharose, 10 pi de colorant alimentaire bleu, et 940 pi de 18,2 MQ eau. </li></ol></li><li> Faire des chambres d&#39;essai en utilisant un x 15 mm plat en plastique de Pétri 100 mm standard préparé de la manière suivante: <ol><li> Placez trois 10 gouttes ul de contrôle exhausteur de goût le plus proche du bord de la plaque à 12 heures et un autre 3 gouttes à 6 heures. Assurez-vous que l&#39;espacement entre les gouttes est similaire. </li><li> Placez trois 10 gouttes ul d&#39;exhausteur de goût expérimental le plus proche du bord de la plaque à 3 heures et uneautre 3 gouttes à 9 heures. Assurez-vous que l&#39;espacement entre les gouttes est similaire. </li><li> Répétez les étapes 2.2.1 et 2.2.2 pour autant de répétitions que désiré. </li></ol></li><li> Empty 1 flacon de ~ 100 mouches affamées sur un tampon juste assez longtemps pour anesthésier les animaux (environ 10 sec) CO 2. Badigeonner les animaux dans le milieu d&#39;une chambre de dosage préparée et couvrir avec le couvercle plat. Remarque: plus longue période de CO 2 l&#39; exposition doit être évitée afin d&#39; améliorer le temps de récupération et de limiter les interférences avec le comportement alimentaire. L&#39; exposition à la glace (~ 5 min) peut être utilisé pour anesthésier pour éviter CO 2 effets comportementaux qui peuvent découler de même exposition limitée. </li><li> Placer la chambre de dosage dans une boîte en carton opaque. Assurez-vous d&#39;étiqueter l&#39;extérieur de la boîte avec la condition et le génotype testé. </li><li> Placer l&#39;ensemble de l&#39;installation (chambre dosage contenue dans une boîte en carton à l&#39;étape 2.4) dans un incubateur à 25 ° d&#39;au moins 70% d&#39;humidité pendant 2 heures. </li&gt; <li> Répétez les étapes 2.3 à 2.5 pour toutes les répétitions. </li><li> Après 2 heures, placer les chambres d&#39;analyse, encore contenus dans des boîtes en carton, directement dans un -20 ° C au congélateur jusqu&#39;au moment pour la quantification. </li></ol> 3. Goût préférence Assay Quantification <ol><li> Permettre une chambre de dosage unique se réchauffer à la température ambiante (environ 5 min). </li><li> Sous un microscope de dissection, en utilisant une brosse ou une paire de pinces, les animaux du groupe sur la base de la couleur de leur abdomen: rouge, bleu, violet ou clair (Figure 1). </li><li> Notez le nombre d&#39;animaux dans chaque groupe. Considérer les animaux claires de ne pas avoir participé à l&#39;essai, et donc ne pas les inclure dans les calculs. </li><li> Calculer l&#39;indice de préférence selon l&#39;une des équations suivantes: <ol><li> Si l&#39;exhausteur de goût expérimental d&#39;intérêt est ajouté au colorant rouge, puis utilisez (N rouge + 0,5N violet) / (N + N rouge bleu + N purple). </li><li> Si l&#39;exhausteur de goût expérimental est ajouté au colorant bleu, puis ajuster l&#39;équation (N bleu + 0,5N violet) / (N + N bleu rouge + N violet). </li></ol></li><li> Répéter les calculs pour toutes les conditions expérimentales et répétitions. </li></ol> 4. Optimisation du Goût Préférence Assay <ol><li> Déterminer empiriquement la concentration des indicateurs de colorants alimentaires à être utilisé si le colorant alimentaire ne modifie pas les résultats de l&#39;essai de goût, de la manière suivante: <ol><li> Préparer 4 tastants en utilisant le même composé de base (par exemple mM de sucrose 5) comme indiqué dans l&#39; étape 2.1, mais omettre le colorant alimentaire. </li><li> Ajouter 1,3% colorant alimentaire rouge à l&#39;un des sapides. Faire les 3 tastants restants avec colorant alimentaire bleu de concentrations variables dans chaque tube (par exemple 0,6%, 1% et 1,3%). </li><li> protocole complète les étapes 2.2 à 3.4 pour chaque paire exhausteur de goût: 1,3% contre 0,6% rouge bleu; 1,3% contre 1% rouge et bleu1,3% contre 1,3% rouge bleu. </li><li> Répétez l&#39; étape 4.1.1-4.1.3 avec différents pourcentages de colorant alimentaire bleu jusqu&#39;à ce que les moyennes de l&#39; indice de préférence une valeur de 0 (Figure 2). Remarque: En tant que point de départ, 1,3% du colorant alimentaire rouge couplé avec 1% de colorant alimentaire bleu donne généralement de bons résultats. Si aucune concentration satisfaisante de colorant alimentaire bleu peut être adaptée à 1,3% de colorant, puis l&#39;étape 4.1.1 à travers 4.1.3 peut être répété avec des concentrations variables de colorant rouge et une concentration constante de colorant alimentaire bleu. </li><li> Analyser toutes les conditions à tester avec les mêmes concentrations optimisées de colorant alimentaire. </li></ol></li></ol>

<ol>
	<li>Herrero, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fruit+fly+behavior+in+response+to+chemosensory+signals.">Fruit fly behavior in response to chemosensory signals.</a> Peptides. 38 (2), 228-237 (2012).</li><li>Vosshall, L. B., Stocker, R. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Molecular+architecture+of+smell+and+taste+in+Drosophila.">Molecular architecture of smell and taste in Drosophila.</a> Annu Rev Neurosci. 30, 505-533 (2007).</li><li>Harris, D. T., Kallman, B. R., Mullaney, B. C., Scott, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Representations+of+Taste+Modality+in+the+Drosophila+Brain.">Representations of Taste Modality in the Drosophila Brain.</a> Neuron. 86 (6), 1449-1460 (2015).</li><li>Hong, E. J., Wilson, R. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Simultaneous+encoding+of+odors+by+channels+with+diverse+sensitivity+to+inhibition.">Simultaneous encoding of odors by channels with diverse sensitivity to inhibition.</a> Neuron. 85 (3), 573-589 (2015).</li><li>Kain, P., Dahanukar, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Secondary+taste+neurons+that+convey+sweet+taste+and+starvation+in+the+Drosophila+brain.">Secondary taste neurons that convey sweet taste and starvation in the Drosophila brain.</a> Neuron. 85 (4), 819-832 (2015).</li><li>Masek, P., Worden, K., Aso, Y., Rubin, G. M., Keene, A. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+dopamine-modulated+neural+circuit+regulating+aversive+taste+memory+in+Drosophila.">A dopamine-modulated neural circuit regulating aversive taste memory in Drosophila.</a> Curr Biol. 25 (11), 1535-1541 (2015).</li><li>Charlu, S., Wisotsky, Z., Medina, A., Dahanukar, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Acid+sensing+by+sweet+and+bitter+taste+neurons+in+Drosophila+melanogaster.">Acid sensing by sweet and bitter taste neurons in Drosophila melanogaster.</a> Nat Commun. 4, 2042 (2013).</li><li>Clyne, P. J., Warr, C. G., Carlson, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Candidate+taste+receptors+in+Drosophila.">Candidate taste receptors in Drosophila.</a> Science. 287 (5459), 1830-1834 (2000).</li><li>Scott, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+chemosensory+gene+family+encoding+candidate+gustatory+and+olfactory+receptors+in+Drosophila.">A chemosensory gene family encoding candidate gustatory and olfactory receptors in Drosophila.</a> Cell. 104 (5), 661-673 (2001).</li><li>Kim, S. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Drosophila+TRPA1+channel+mediates+chemical+avoidance+in+gustatory+receptor+neurons.">Drosophila TRPA1 channel mediates chemical avoidance in gustatory receptor neurons.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 107 (18), 8440-8445 (2010).</li><li>Koh, T. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Drosophila+IR20a+clade+of+ionotropic+receptors+are+candidate+taste+and+pheromone+receptors.">The Drosophila IR20a clade of ionotropic receptors are candidate taste and pheromone receptors.</a> Neuron. 83 (4), 850-865 (2014).</li><li>Zhang, Y. V., Ni, J., Montell, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+molecular+basis+for+attractive+salt-taste+coding+in+Drosophila.">The molecular basis for attractive salt-taste coding in Drosophila.</a> Science. 340 (6138), 1334-1338 (2013).</li><li>Zhang, Y. V., Raghuwanshi, R. P., Shen, W. L., Montell, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Food+experience-induced+taste+desensitization+modulated+by+the+Drosophila+TRPL+channel.">Food experience-induced taste desensitization modulated by the Drosophila TRPL channel.</a> Nat Neurosci. 16 (10), 1468-1476 (2013).</li><li>Liman, E. R., Zhang, Y. V., Montell, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Peripheral+coding+of+taste.">Peripheral coding of taste.</a> Neuron. 81 (5), 984-1000 (2014).</li><li>Rodrigues, V., Cheah, P. Y., Ray, K., Chia, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=malvolio,+the+Drosophila+homologue+of+mouse+NRAMP-1+(Bcg),+is+expressed+in+macrophages+and+in+the+nervous+system+and+is+required+for+normal+taste+behaviour.">malvolio, the Drosophila homologue of mouse NRAMP-1 (Bcg), is expressed in macrophages and in the nervous system and is required for normal taste behaviour.</a> EMBO J. 14 (13), 3007-3020 (1995).</li><li>Tanimura, T., Isono, K., Yamamoto, M. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Taste+sensitivity+to+trehalose+and+its+alteration+by+gene+dosage+in+Drosophila+melanogaster.">Taste sensitivity to trehalose and its alteration by gene dosage in Drosophila melanogaster.</a> Genetics. 119 (2), 399-406 (1988).</li><li>Weiss, L. A., Dahanukar, A., Kwon, J. Y., Banerjee, D., Carlson, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+molecular+and+cellular+basis+of+bitter+taste+in+Drosophila.">The molecular and cellular basis of bitter taste in Drosophila.</a> Neuron. 69 (2), 258-272 (2011).</li><li>French, A. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dual+mechanism+for+bitter+avoidance+in+Drosophila.">Dual mechanism for bitter avoidance in Drosophila.</a> J Neurosci. 35 (9), 3990-4004 (2015).</li><li>Deshpande, S. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quantifying+Drosophila+food+intake:+comparative+analysis+of+current+methodology.">Quantifying Drosophila food intake: comparative analysis of current methodology.</a> Nat Methods. 11 (5), 535-540 (2014).</li></ol>

The authors declare that they have no competing financial interests.

Nous avons décrit un protocole simple mais efficace pour déterminer la préférence de goût chez la drosophile. Les versions de ce test sont couramment utilisés dans des expériences pour déterminer les contributions des récepteurs gustatifs (Grs) pour percevoir les différentes qualités (amer, sucré, acide, salé et umami) des composés de goût. Le génome de la Drosophile contient environ 60 gènes qui codent pour 68 récepteurs gustatifs identifiés par l&#39; épissage alternatif 8,9....

Les animaux utilisent chemosensation pour distinguer des conditions avantageuses en dehors des conditions désavantageuses. Cette perception peut être critique pour des choses telles que la détermination de la meilleure source alimentaire, en évitant les substances toxiques ou de déterminer le meilleur partenaire d&#39;accouplement 1. Chemosensation est souvent divisée en deux composants sensoriels: sens olfactif et les sens gustatifs. Une principale caractéristique distinctive de ces sens est que l&#39;olfaction (odorat) est utilisé pour échantillonner l&#39;environnement chimique gazeux environnant tout gustation (goût) nécessite un contact physique avec un substrat non volatile. Les deux modalités sensorielles stimulent les réponses neurologiques qui sont traités et décodés dans le cerveau pour produire le comportement attractives ou répulsives appropriée 2. Ces sens sont donc essentiels pour la survie des animaux. La mouche des fruits Drosophila melanogaster est un organisme modèle qui continue de croître en popularité pour une utilisation dans comprendrement comment les insectes perçoivent l&#39;odeur et le goût. Les mouches des fruits offrent d&#39;énormes avantages par rapport aux autres systèmes de modèles en raison de la richesse des outils génétiques disponibles pour la dissection des voies moléculaires, cellulaires et comportementales. Le travail au cours des 15 dernières années a été particulièrement important dans la caractérisation des identités cellulaires spécifiques, des récepteurs neuronaux, et les mécanismes impliqués à la fois l&#39;odeur et le goût de signalisation. Maintenant, la puissance de la génétique chez la drosophile est utilisée pour élucider la façon dont ces processus sont codés au neurone unique et un seul circuit niveau 3-6. Par conséquent, les essais qui fournissent facilement marqué des lectures altérations des voies sensorielles sont essentielles à l&#39;avance continue de ces champs. Alors que beaucoup est connu sur la façon dont les signaux olfactifs sont codées et traitées dans le cerveau, beaucoup moins, on entend à propos des mécanismes similaires dans la voie de gustatifs. Nous décrivons ici un protocole qui peut être utilisé pour déterminer le goût préférenCE chez la drosophile. Drosophila, comme les mammifères, préfèrent généralement composés de goût sucré , par opposition à des composés de goût amer. Toute combinaison de ces sources de nourriture peut être utilisée dans cette conception expérimentale pour déterminer comment des altérations génétiques connues affectent le choix du goût. En outre, les stratégies d&#39;intervention pharmacologiques peuvent être évalués de manière similaire pour leurs effets sur la préférence du goût des animaux. La facilité et la flexibilité de ce test, il est un paradigme utile pour comprendre la nature de la perception gustative chez la drosophile.

<table><tbody><tr><td>Blue Food Coloring (Water, Propylene Glycol, FD&amp;amp;C Blue 1 and Red 40, Propylparaben)</td><td>McCormick</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>Cryo/Freezer Boxes w/o Dividers</td><td>Fisher</td><td>03-395-455</td><td></td></tr><tr><td>Dumont #5 Forceps</td><td>Fine Science Tools</td><td>11251-20</td><td></td></tr><tr><td>Glacial Acetic Acid</td><td>Fisher</td><td>BP2401-500</td><td></td></tr><tr><td>Leica S6 E Stereozoom 0.63X-4.0X microscope</td><td>W. Nuhsbaum, Inc.</td><td>10446294</td><td></td></tr><tr><td>Petri dish (100 mm x 15 mm)</td><td>BD Falcon</td><td>351029</td><td>Reuseable if thoroughly washed and dried</td></tr><tr><td>Quick-Snap Microtubes</td><td>Alkali Scientific Inc.</td><td>C3017</td><td></td></tr><tr><td>Red Food Coloring (Water, Propylene Glycol, FD&amp;amp;C Reds 40 and 3, Propylparaben)</td><td>McCormick</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>Sucrose</td><td>IBI Scientific</td><td>IB37160</td><td></td></tr></tbody></table>

taste preference assay for adult drosophila

Olfactory and gustatory perception of the environment is vital for animal survival. The most obvious application of these chemosenses is to be able to distinguish good food sources from potentially dangerous food sources. Gustation requires physical contact with a chemical compound which is able to signal through taste receptors that are expressed on the surface of neurons. In insects, these gustatory neurons can be located across the animal's body allowing taste to play an important role in many different behaviors. Insects typically prefer compounds containing sugars, while compounds that are considered bitter tasting are avoided. Given the basic biological importance of taste, there is intense interest in understanding the molecular mechanisms underlying this sensory modality. We describe an adult Drosophila taste assay which reflects the preference of the animals for a given tastant compound. This assay may be applied to animals of any genetic background to examine the taste preference for a desired soluble compound.

Quelques résultats typiques de goût des tests de préférence sont présentés ci-dessous. Dans la plupart des expériences une certaine variation de l&#39;intensité de la coloration abdominale On voit (figure 1). Toute coloration dans l&#39;abdomen si intense ou faible est considéré comme une ingestion positive. Il est donc conseillé aux chercheurs de marquer les animaux tout en aveugle à la condition expérimentale afin de limiter les biais potentiels. <p cl...

Watch this Scientific Journal Video about Taste Preference Assay for Adult Drosophila at JoVE.com

Taste Preference Assay for Adult Drosophila

Taste is an important sensory process which facilitates attraction to beneficial substances and avoidance of toxic substances. This protocol describes a simple ingestion assay for determining Drosophila gustatory preference for a given chemical compound.

Goût préférence Essai pour adultes<em&gt; Drosophila</em

Olfactory and gustatory perception of the environment is vital for animal survival.  The most obvious application of these chemosenses is to be able to ...

taste-preference-assay-for-adult-drosophila

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Taste Preference Assay for Adult Drosophila

9.6K vues.  Indiana University School of Medicine-South Bend. Taste is an important sensory process which facilitates attraction to beneficial substances and avoidance of toxic substances. This protocol describes a simple ingestion assay for determining Drosophila gustatory preference for a given chemical compound.

Vidéo: Taste Preference Assay for Adult Drosophila

Appetitive Associative Olfactory Learning in Drosophila Larvae

In the following we describe the methodological details of appetitive associative olfactory learning in Drosophila larvae. The setup, in combination with genetic interference, provides a handle to analyze the neuronal and molecular fundamentals of specifically associative learning in a simple larval brain.
Organisms can use past experience to adjust present behavior. Such acquisition of behavioral potential can be defined as learning, and the physical bases of these potentials as memory traces1-4. Neuroscientists try to understand how these processes are organized in terms of molecular and neuronal changes in the brain by using a variety of methods in model organisms ranging from insects to vertebrates5,6. For such endeavors it is helpful to use model systems that are simple and experimentally accessible. The Drosophila larva has turned out to satisfy these demands based on the availability of robust behavioral assays, the existence of a variety of transgenic techniques and the elementary organization of the nervous system comprising only about 10,000 neurons (albeit with some concessions: cognitive limitations, few behavioral options, and richness of experience questionable)7-10.
Drosophila larvae can form associations between odors and appetitive gustatory reinforcement like sugar11-14. In a standard assay, established in the lab of B. Gerber, animals receive a two-odor reciprocal training: A first group of larvae is exposed to an odor A together with a gustatory reinforcer (sugar reward) and is subsequently exposed to an odor B without reinforcement 9. Meanwhile a second group of larvae receives reciprocal training while experiencing odor A without reinforcement and subsequently being exposed to odor B with reinforcement (sugar reward). In the following both groups are tested for their preference between the two odors. Relatively higher preferences for the rewarded odor reflect associative learning - presented as a performance index (PI). The conclusion regarding the associative nature of the performance index is compelling, because apart from the contingency between odors and tastants, other parameters, such as odor and reward exposure, passage of time and handling do not differ between the two groups9.

Appetitive Associative Olfactory Learning in Drosophila Larvae

Drosophila larvae are able to associate odor stimuli with gustatory reward. Here we describe a simple behavioral paradigm that allows the analysis of appetitive associative olfactory learning.

Appétitive apprentissage olfactif associatif en<em&gt; Drosophila</em&gt; Les larves

In the following we describe the methodological  details of appetitive associative olfactory learning in Drosophila larvae. The setup, in combination with ...

Recherche

Neurosciences

A Single-fly Assay for Foraging Behavior in Drosophila

For many animals, hunger promotes changes in the olfactory system in a manner that facilitates the search for appropriate food sources. In this video article, we describe an automated assay to measure the effect of hunger or satiety on olfactory dependent food search behavior in the adult fruit fly Drosophila melanogaster. In a light-tight box illuminated by red light that is invisible to fruit flies, a camera linked to custom data acquisition software monitors the position of six flies simultaneously. Each fly is confined to walk in individual arenas containing a food odor at the center. The testing arenas rest on a porous floor that functions to prevent odor accumulation. Latency to locate the odor source, a metric that reflects olfactory sensitivity under different physiological states, is determined by software analysis. Here, we discuss the critical mechanics of running this behavioral paradigm and cover specific issues regarding fly loading, odor contamination, assay temperature, data quality, and statistical analysis.

A Single-fly Assay for Foraging Behavior in Drosophila

In this video article, we describe an automated assay to measure the effect of hunger or satiety on olfactory dependent food search behavior in the adult fruit fly Drosophila melanogaster.

Une simple mouche Essai de comportement alimentaire dans<em&gt; Drosophila</em

For many animals, hunger promotes changes in the olfactory system in a manner that facilitates the search for appropriate food sources. In this video ...

Testing Drosophila Olfaction with a Y-maze Assay

Detecting signals from the environment is essential for animals to ensure their survival. To this aim, they use environmental cues such as vision, mechanoreception, hearing, and chemoperception through taste, via direct contact or through olfaction, which represents the response to a volatile molecule acting at longer range. Volatile chemical molecules are very important signals for most animals in the detection of danger, a source of food, or to communicate between individuals. Drosophila melanogaster is one of the most common biological models for scientists to explore the cellular and molecular basis of olfaction. In order to highlight olfactory abilities of this small insect, we describe a modified choice protocol based on the Y-maze test classically used with mice. Data obtained with Y-mazes give valuable information to better understand how animals deal with their perpetually changing environment. We introduce a step-by-step protocol to study the impact of odorants on fly exploratory response using this Y-maze assay.

Testing Drosophila Olfaction with a Y-maze Assay

We present a choice test to reveal the influence of odorants on Drosophila behavior using a Y-maze assay.

Expérimentation<em&gt; Drosophila</em&gt; Olfaction avec un dosage labyrinthe en Y

Detecting signals from the environment is essential for animals to ensure their survival. To this aim, they use environmental cues such as vision, ...

High Throughput Assay to Examine Egg-Laying Preferences of Individual Drosophila melanogaster

Recently, egg-laying preference of Drosophila has emerged as a genetically tractable model to study the neural basis of simple decision-making processes. When selecting sites to deposit their eggs, female flies are capable of ranking the relative attractiveness of their options and choosing the &#34;greater of two goods.&#34; However, most egg-laying preference assays are not practical if one wants to take a systematic genetic screening approach to search for the circuit basis underlying this simple decision-making process, as they are population-based and laborious to set up. To increase the throughput of studying of egg-laying preferences of single females, we developed custom chambers that each can simultaneously assay egg-laying preferences of up to thirty individual flies as well as a protocol that ensures each female has a high egg-laying rate (so that their preference is readily discernable and more convincing). Our approach is simple to execute and produces very consistent results. Additionally, these chambers can be equipped with different attachments to allow video recording the egg-laying animals and to deliver light for optogenetics studies. This article provides the blueprints for fabricating these chambers and the procedure for preparing the flies to be assayed in these chambers.

High Throughput Assay to Examine Egg-Laying Preferences of Individual Drosophila melanogaster

This protocol describes a high throughput assay for testing egg-laying preferences of Drosophila melanogaster at single-animal resolution. This assay provides a simple, efficient, and scalable platform to identify genes and circuit components that control a simple decision-making process.

High Throughput Assay pour examiner les préférences de ponte de l&#39;individu<em&gt; Drosophila melanogaster</em

Recently, egg-laying preference of Drosophila has emerged as a genetically tractable model to study the neural basis of simple decision-making processes. ...

A Simple Way to Measure Alterations in Reward-seeking Behavior Using Drosophila melanogaster

We describe a protocol for measuring ethanol self-administration in fruit flies (Drosophila melanogaster) as a proxy for changes in reward states. We demonstrate a simple way to tap into the fly reward system, modify experiences related to natural reward, and use voluntary ethanol consumption as a measure for changes in reward states. The approach serves as a relevant tool to study the neurons and genes that play a role in experience-mediated changes of internal state. The protocol is composed of two discrete parts: exposing the flies to rewarding and nonrewarding experiences, and assaying voluntary ethanol consumption as a measure of the motivation to obtain a drug reward. The two parts can be used independently to induce the modulation of experience as an initial step for further downstream assays or as an independent two-choice feeding assay, respectively. The protocol does not require a complicated setup and can therefore be applied in any laboratory with basic fly culture tools.

A Simple Way to Measure Alterations in Reward-seeking Behavior Using Drosophila melanogaster

We describe a protocol for inducing rewarding and nonrewarding experiences in fruit flies (Drosophila melanogaster) using voluntary ethanol consumption as a measure for changes in reward states.

Un moyen simple pour mesurer Transformations en récompense le comportement de recherche Utilisation<em&gt; Drosophila melanogaster</em

We describe a protocol for measuring ethanol self-administration in fruit flies (Drosophila melanogaster) as a proxy for changes in reward states. We ...

The CApillary FEeder Assay Measures Food Intake in Drosophila melanogaster

For most animals, feeding is an essential behavior for securing survival, and it influences development, locomotion, health and reproduction. Ingestion of the right type and quantity of food therefore has a major influence on quality of life. Research on feeding behavior focuses on the underlying processes that ensure actual feeding and unravels the role of factors regulating internal energy homeostasis and the neuronal bases of decision-making. The model organism Drosophila melanogaster, with its great variety of genetically traceable tools for labeling and manipulating single neurons, allows mapping of neuronal networks and identification of molecular signaling cascades involved in the regulation of food intake. This report demonstrates the CApillary FEeder assay (CAFE) and shows how to measure food intake in a group of flies for time spans ranging from hours to days. This easy-to-use assay consists of glass capillaries filled with liquid food that flies can freely access and feed on. Food consumption in the assay is accurately determined using simple measurement tools. Herein we describe step-by-step the method from setup to successful execution of the CAFE assay, and provide practical examples to analyze the food intake of a group of flies under controlled conditions. The reader is guided through possible limitations of the assay, and advantages and disadvantages of the method compared to other feeding assays in D. melanogaster are evaluated.

The CApillary FEeder Assay Measures Food Intake in Drosophila melanogaster

The CApillary FEeder (CAFE) assay is a simple, budget-friendly, highly reliable method for investigating mechanisms underlying food intake. Used with the highly versatile genetic model organism Drosophila melanogaster, it provides a powerful means of gaining new insights into regulatory mechanisms of food intake.

Capillaire Feeder Assay mesures prise alimentaire dans<em&gt; Drosophila melanogaster</em

For most animals, feeding is an essential behavior for securing survival, and it influences development, locomotion, health and reproduction. Ingestion of ...

A Rapid Food-Preference Assay in Drosophila

To select food with nutritional value while avoiding the consumption of harmful agents, animals need a sophisticated and robust taste system to evaluate their food environment. The fruit fly, Drosophila melanogaster, is a genetically tractable model organism that is widely used to decipher the molecular, cellular, and neural underpinnings of food preference. To analyze fly food preference, a robust feeding method is needed. Described here is a two-choice feeding assay, which is rigorous, cost-saving, and fast. The assay is Petri-dish-based and involves the addition of two different foods supplemented with blue or red dye to the two halves of the dish. Then, ~70 prestarved, 2-4-day-old flies are placed in the dish and&#160;allowed to choose between blue and red foods in the dark for about 90 min. Examination of the abdomen of each fly is followed by the calculation of the preference index. In contrast to multiwell plates, each Petri dish takes only ~20 s to fill and saves time and effort. This feeding assay can be employed to quickly determine whether flies like or dislike a particular food.

A Rapid Food-Preference Assay in Drosophila

We present a protocol for a two-choice feeding assay for flies. This feeding assay is fast and easy to run and is suitable not only for small-scale laboratory research, but also for high-throughput behavioral screens in flies.

Un test rapide de préférence alimentaire à Drosophila

To select food with nutritional value while avoiding the consumption of harmful agents, animals need a sophisticated and robust taste system to evaluate ...

Feeding Test: Assessment of Feeding Preferences in Drosophila melanogaster

Source: Bovier, T. F., et al. <a href="https://www.jove.com/video/59535/" target="_blank">Methods to Test Endocrine Disruption in Drosophila melanogaster</a>. J. Vis. Exp. (2019).
This video describes a feeding assay for fruit flies in which colored food is used to monitor feeding and the effect added compounds may have on feeding activity. The example protocol tests the effects of several endocrine disrupting chemicals (EDC).

Test d’alimentation : évaluation des préférences alimentaires chez Drosophila melanogaster

Source: Bovier, T. F., et al. Methods to Test Endocrine Disruption in Drosophila melanogaster. J. Vis. Exp. (2019).
This video describes a feeding assay ...

JoVE Encyclopedia of Experiments

Biologie

Drosophila melanogaster (fruit fly)

Adult

Temperature Gradient Assay: A Method to Test Temperature Preference in Drosophila Larvae

Source: Liu, J., et al. <a href="https://www.jove.com/video/57963/" target="_blank">A Temperature Gradient Assay to Determine Thermal Preferences of Drosophila Larvae</a>. J. Vis. Exp. (2018).
Drosophila fruit flies can distinguish small changes in temperature and therefore select environments with favorable thermal conditions. This video describes a behavioral assay that tests the temperature preference of Drosophila larvae on a linear thermal gradient.

Essai de gradient de température : une méthode pour tester la préférence de température chez les larves de drosophile

Source: Liu, J., et al. A Temperature Gradient Assay to Determine Thermal Preferences of Drosophila Larvae. J. Vis. Exp. (2018).
Drosophila fruit flies ...

Larva

Taste Preference Assay: A Method for Measuring Feeding Behavior in Drosophila

Source: Bantel, A. P. and Tessier, C. R. <a href="https://www.jove.com/video/54403/" target="_blank">Taste Preference Assay for Adult Drosophila</a>. J. Vis. Exp. (2016).
This video describes the taste preference assay, a behavioral method used to measure attraction or avoidance towards colored solutions that taste differently by assessing the fly&#39;s abdominal coloration after ingestion of the preferred substance. The featured protocol demonstrates the procedure used to measure flies&#39; preference towards solutions of varying sucrose concentrations.

Dosage de la préférence gustative : une méthode pour mesurer le comportement alimentaire chez la drosophile

Source: Bantel, A. P. and Tessier, C. R. Taste Preference Assay for Adult Drosophila. J. Vis. Exp. (2016).
This video describes the taste preference ...

Goût préférence Essai pour adultes

Résumé

Explorer plus de vidéos

Chapitres dans cette vidéo

Appétitive apprentissage olfactif associatif en

Une simple mouche Essai de comportement alimentaire dans

Expérimentation

High Throughput Assay pour examiner les préférences de ponte de l'individu

Un moyen simple pour mesurer Transformations en récompense le comportement de recherche Utilisation

Capillaire Feeder Assay mesures prise alimentaire dans

Un test rapide de préférence alimentaire à Drosophila

Test d’alimentation : évaluation des préférences alimentaires chez Drosophila melanogaster

Essai de gradient de température : une méthode pour tester la préférence de température chez les larves de drosophile

Dosage de la préférence gustative : une méthode pour mesurer le comportement alimentaire chez la drosophile