We would like to thank members of the Tessier lab for critical reading of this manuscript and helpful suggestions during the preparation of this protocol.

1. רעב <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הכן לטוס בקבוקונים רעבים על ידי להרוות כדור צמר גפן עם 18.2 MΩ מים בתחתית בקבוקון זבוב סטנדרטי. לחלופין, בדומה להרוות רצועה קטנה של נייר סינון עם 18.2 MΩ מים ומקום בזווית בתוך הבקבוקון. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אסוף זבובים לתוך סטים של ~ 100 בעלי חיים על כרית CO 2 ולאחר מכן להוסיף את הזבובים כדי בקבוקון מוכן. הערה: התוצאות הטובות ביותר מושגות עם חיות כי הם פחות מ 5 ימים. עם זאת, את הגיל המדויק של החיות ניתן לשלוט כמשתנה ניסיוני לקבוע לשינויים בהעדפות הטעם לאורך זמן. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> השתמש פקק כדור או קצף כותנה להבטחת הבקבוקונים סגורים. מניחים צלוחיות לצידם באינקובטור נשלט לסביבה. לשמור על טמפרטורה של 25 מעלות צלזיוס, ואת לחות מעל 70%. השאירו בקבוקונים כפי שהיא למשך 24 שעות. </li></ol> 2. Assay העדפות טעם <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הכן את כל tastants עבור assay באותו יוםבדיקות s. הערה: tastants המדויק לשמש ישתנה בהתאם שאלת ניסוי שהתבקש. להלן tastants למשל בשימוש בפרוטוקול זה. ראו סעיף 4 עבור אופטימיזציות. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הכן מלאה tastant (1 מ&quot;מ סוכרוז) על ידי שילוב 10 μl של פתרון סוכרוז 100 מ&quot;מ, 13 μl של צבע מאכל אדום, ו 977 μl של 18.2 MΩ מים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הכן tastant ניסיוני (סוכרוז 5 מ&quot;מ) על ידי שילוב 50 μl של 100 מ&quot;מ תמיסת סוכרוז, 10 μl של צבע מאכל כחול, 940 μl של 18.2 MΩ מים. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הפוך תאי assay באמצעות צלחת פטרי פלסטיק רגיל 100 מ&quot;מ x 15 מ&quot;מ ערוכים באופן הבא: <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מניחים שלושה 10 טיפות μl שליטה tastant הקרוב שולי הצלחת בשעה 12 ועוד 3 טיפות בשעה 6. ודא כי המרווח בין טיפות דומה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מניחים שלושה 10 טיפות μl של tastant ניסיוני הקרוב שולי הצלחת ב -3 בבוקר,3 אחרים טיפות בשעה 9. ודא כי המרווח בין טיפות דומה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חזור על שלבים 2.2.1 ו 2.2.2 עבור רבים משכפל כרצונכם. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בקבוקון 1 ריק זבובים ~ 100 מורעבים על כרית CO 2 רק מספיק זמן כדי להרדים את כל החיות (כ -10 שניות). מבריש את החיות לאמצע בתא assay מוכן וכסו מכסת הצלחת. הערה: ארוכה יותר בתקופות של חשיפת CO 2 יש להימנע כדי לשפר את זמן התאוששות והפרעת גבול עם התנהגות האכילה. חשיפת הקרח (~ 5 דקות) ניתן להשתמש הרדמה כדי למנוע תופעות התנהגותיות CO 2 שיכולים לנבוע גם חשיפה מוגבלת. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מניחים את החדר assay בקופסת קרטון אטום. הקפד לתייג את מחוץ לקופסא עם המצב ואת הגנוטיפ נבדקת. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מניח את ההתקנה כולה (קאמרי assay בתוך ארגז קרטון של שלב 2.4) לתוך C חממת 25 ° עם לחות של 70% לפחות 2 שעות. </li&gt; <li style=";text-align:right;direction:rtl"> חזור על שלבים 2.3 דרך 2.5 לכל משכפל. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאחר 2 שעות, במקום לתאי assay, עדיין בתוך קופסאות קרטון, ישירות לתוך המקפיא -20 ° C עד מוכן לכמת. </li></ol> כימות Assay 3. טעם העדפות <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אפשר בתא assay יחיד להתחמם לטמפרטורת החדר (כ 5 דקות). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> תחת מיקרוסקופ לנתיחה, בעזרת מברשת או זוג מלקחיים, חיות קבוצה המבוססת על צבע של הבטן שלהם: אדום, כחול, סגול או ברורה (איור 1). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> רשמו את מספר בעלי החיים בכל קיבוץ. שקול חיות ברורות שלא השתתפו assay ולכן אינו כולל אותם בכל חישובים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חשב את מדד העדפה על פי אחת המשוואות הבאות: <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אם tastant עניין ניסיוני מתווסף צבע אדום, ולאחר מכן להשתמש (אדום N + 0.5N סגול) / (אדום N + N purpl כחול + Nה). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אם tastant ניסיוני מתווסף צבע כחול, ולאחר מכן להתאים את המשוואה (N כחול + 0.5N סגול) / (N כחול + N אדום + N סגול). </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חזור על החישובים עבור כל תנאי הניסוי ו המשכפלת. </li></ol> 4. אופטימיזציה של Assay העדפות טעם <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> באופן אמפירי לקבוע את הריכוז של אינדיקטורים צבעי מאכל לשמש כך צבעי מאכל אינו משפיעים על התוצאה של assay הטעם, כדלקמן: <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כן 4 tastants באמצעות באותו מתחם הבסיס (למשל 5 סוכרוז מ&quot;מ) כמצוין בשלב 2.1, אך השמט את צבעי מאכל. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להוסיף צבע מאכל אדום 1.3% לאחת tastants. הפוך את 3 tastants הנותרים עם צבע מאכל כחול של ריכוזים שונים בצינור אחד (למשל 0.6%, 1%, ו -1.3%). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> פרוטוקול מלא צעדי 2.2 דרך 3.4 עבור כל זוג tastant: מול אדום 1.3% 0.6% כחולים; 1.3% אדום לעומת 1% כחול1.3% אדומים לעומת 1.3% כחולים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חזור על שלב 4.1.1-4.1.3 עם אחוזים שונים של צבע מאכל הכחול עד ממוצעי מדד העדפת ערך של 0 (איור 2). הערה: כנקודת מוצא, צבע מאכל אדום 1.3% בשילוב עם צבעי מאכל כחול 1% בדרך כלל מניב תוצאות טובות. אם אין ריכוז משביע רצון של צבע מאכל הכחול ניתן להתאים צבע 1.3%, ולאחר מכן צעד 4.1.1 דרך 4.1.3 ניתן לחזור עם ריכוזים שונים של צבע אדום וריכוז מתמיד של צבע מאכל הכחול. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לנתח את כל התנאים כדי להיבדק עם ריכוזי הצבעים מאכלים אותו מותאמים. </li></ol></li></ol>

<ol>
	<li>Herrero, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fruit+fly+behavior+in+response+to+chemosensory+signals.">Fruit fly behavior in response to chemosensory signals.</a> Peptides. 38 (2), 228-237 (2012).</li><li>Vosshall, L. B., Stocker, R. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Molecular+architecture+of+smell+and+taste+in+Drosophila.">Molecular architecture of smell and taste in Drosophila.</a> Annu Rev Neurosci. 30, 505-533 (2007).</li><li>Harris, D. T., Kallman, B. R., Mullaney, B. C., Scott, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Representations+of+Taste+Modality+in+the+Drosophila+Brain.">Representations of Taste Modality in the Drosophila Brain.</a> Neuron. 86 (6), 1449-1460 (2015).</li><li>Hong, E. J., Wilson, R. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Simultaneous+encoding+of+odors+by+channels+with+diverse+sensitivity+to+inhibition.">Simultaneous encoding of odors by channels with diverse sensitivity to inhibition.</a> Neuron. 85 (3), 573-589 (2015).</li><li>Kain, P., Dahanukar, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Secondary+taste+neurons+that+convey+sweet+taste+and+starvation+in+the+Drosophila+brain.">Secondary taste neurons that convey sweet taste and starvation in the Drosophila brain.</a> Neuron. 85 (4), 819-832 (2015).</li><li>Masek, P., Worden, K., Aso, Y., Rubin, G. M., Keene, A. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+dopamine-modulated+neural+circuit+regulating+aversive+taste+memory+in+Drosophila.">A dopamine-modulated neural circuit regulating aversive taste memory in Drosophila.</a> Curr Biol. 25 (11), 1535-1541 (2015).</li><li>Charlu, S., Wisotsky, Z., Medina, A., Dahanukar, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Acid+sensing+by+sweet+and+bitter+taste+neurons+in+Drosophila+melanogaster.">Acid sensing by sweet and bitter taste neurons in Drosophila melanogaster.</a> Nat Commun. 4, 2042 (2013).</li><li>Clyne, P. J., Warr, C. G., Carlson, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Candidate+taste+receptors+in+Drosophila.">Candidate taste receptors in Drosophila.</a> Science. 287 (5459), 1830-1834 (2000).</li><li>Scott, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+chemosensory+gene+family+encoding+candidate+gustatory+and+olfactory+receptors+in+Drosophila.">A chemosensory gene family encoding candidate gustatory and olfactory receptors in Drosophila.</a> Cell. 104 (5), 661-673 (2001).</li><li>Kim, S. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Drosophila+TRPA1+channel+mediates+chemical+avoidance+in+gustatory+receptor+neurons.">Drosophila TRPA1 channel mediates chemical avoidance in gustatory receptor neurons.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 107 (18), 8440-8445 (2010).</li><li>Koh, T. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Drosophila+IR20a+clade+of+ionotropic+receptors+are+candidate+taste+and+pheromone+receptors.">The Drosophila IR20a clade of ionotropic receptors are candidate taste and pheromone receptors.</a> Neuron. 83 (4), 850-865 (2014).</li><li>Zhang, Y. V., Ni, J., Montell, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+molecular+basis+for+attractive+salt-taste+coding+in+Drosophila.">The molecular basis for attractive salt-taste coding in Drosophila.</a> Science. 340 (6138), 1334-1338 (2013).</li><li>Zhang, Y. V., Raghuwanshi, R. P., Shen, W. L., Montell, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Food+experience-induced+taste+desensitization+modulated+by+the+Drosophila+TRPL+channel.">Food experience-induced taste desensitization modulated by the Drosophila TRPL channel.</a> Nat Neurosci. 16 (10), 1468-1476 (2013).</li><li>Liman, E. R., Zhang, Y. V., Montell, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Peripheral+coding+of+taste.">Peripheral coding of taste.</a> Neuron. 81 (5), 984-1000 (2014).</li><li>Rodrigues, V., Cheah, P. Y., Ray, K., Chia, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=malvolio,+the+Drosophila+homologue+of+mouse+NRAMP-1+(Bcg),+is+expressed+in+macrophages+and+in+the+nervous+system+and+is+required+for+normal+taste+behaviour.">malvolio, the Drosophila homologue of mouse NRAMP-1 (Bcg), is expressed in macrophages and in the nervous system and is required for normal taste behaviour.</a> EMBO J. 14 (13), 3007-3020 (1995).</li><li>Tanimura, T., Isono, K., Yamamoto, M. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Taste+sensitivity+to+trehalose+and+its+alteration+by+gene+dosage+in+Drosophila+melanogaster.">Taste sensitivity to trehalose and its alteration by gene dosage in Drosophila melanogaster.</a> Genetics. 119 (2), 399-406 (1988).</li><li>Weiss, L. A., Dahanukar, A., Kwon, J. Y., Banerjee, D., Carlson, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+molecular+and+cellular+basis+of+bitter+taste+in+Drosophila.">The molecular and cellular basis of bitter taste in Drosophila.</a> Neuron. 69 (2), 258-272 (2011).</li><li>French, A. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dual+mechanism+for+bitter+avoidance+in+Drosophila.">Dual mechanism for bitter avoidance in Drosophila.</a> J Neurosci. 35 (9), 3990-4004 (2015).</li><li>Deshpande, S. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quantifying+Drosophila+food+intake:+comparative+analysis+of+current+methodology.">Quantifying Drosophila food intake: comparative analysis of current methodology.</a> Nat Methods. 11 (5), 535-540 (2014).</li></ol>

The authors declare that they have no competing financial interests.

תארנו פרוטוקול פשוט אך יעיל לקביעת העדפה לטעם תסיסנית. גרסאות של assay זה משמשים באופן שגרתי ניסויים כדי לקבוע את תרומתם של קולטנים התעורר אצלם (GRS) כדי לתפוס את איכויות שונות (מר, מתוק, חמוץ, מלוח, umami) של תרכובות טעם. הגנום תסיסנית מכיל כ 60 גנים המקודדים 68 קולטני?...

בעלי חיים להשתמש chemosensation להבחין תנאי יתרון מלבד תנאים נחותים. תפיסה זו יכולה להיות קריטית עבור דברים כגון קביעת מקור המזון הטוב ביותר, הימנעות חומרים רעילים או קביעת שותף הזדווגות מיטב 1. Chemosensation מחולקת לעתים קרובות לשני מרכיבים חושיים: חושי חוש ריח וחושים התעוררו אצלם. מאפיין מבדיל עיקרי של חושים אלה הוא כי חוש ריח (ריח) משמש כדי לדגום את הסביבה הכימית גזים שמסביב בעוד gustation (טעם) דורש מגע פיזי עם מצע בלתי נדיף. שני אופנים חושיים לעורר תגובות נוירולוגיות שעוברים עיבוד מפוענח במוח כדי לגרום לפעולת 2 דוחה או המושך המתאים. חושים אלה הם אפוא קריטיים להישרדות חיה. זבוב הפירות תסיסנית הוא אורגניזם מודל אשר ממשיכה לצבור פופולריות לשימוש להביןing איך חרקים תופסים ריח וטעם. זבובי פירות להציע יתרונות עצומים על פני מערכות מודל אחר בשל שפע של כלים גנטיים זמין לנתיחה של מסלולים מולקולריים, הסלולר, והתנהגותיים. עבודה במשך 15 השנים האחרונות כבר סייע במיוחד באפיון הזהויות התאיות הספציפיות, קולטנים עצביים, ואיתות מנגנונים מעורבים בשני ריח וטעם. עכשיו, את הכוח של גנטיקה תסיסנית נמצא בשימוש כדי להבהיר עוד כמה תהליכים אלה מסומלים על המעגל נוירון בודד יחיד ברמה 3-6. לכן, מבחנים המספקים בקלות הבקיע מונה המציין שינויי מסלולים חושיים חיוניים מראש המתמשך של שדות אלה. בעוד הרבה ידוע על איך אותות הריח מסומלים ומעובד במוח, הרבה פחות מובן על מנגנונים דומים במסלול התעורר אצלם. אנו מתארים כאן פרוטוקול אשר ניתן להשתמש בהם כדי לברר preferen טעםce תסיסנית. תסיסנית, כמו יונקים, בדרך כלל מעדיף תרכובות טעימות מתוקות בניגוד תרכובות טעימות מרות. כל שילוב של מקורות מזון אלה יכול להיות מנוצל בעיצוב ניסיוני זה כדי לקבוע כיצד שינויים גנטיים ידועים להשפיע על בחירת טעם. בנוסף, אסטרטגיות התערבות פרמקולוגית ניתן להעריך באופן דומה השפיעו על העדפת הטעם של חיות. הקלות והגמישות של assay זה עושה את זה פרדיגמה שימושי להבנת אופי בחוש הטעם תסיסנית.

<table><tbody><tr><td>Blue Food Coloring (Water, Propylene Glycol, FD&amp;amp;C Blue 1 and Red 40, Propylparaben)</td><td>McCormick</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>Cryo/Freezer Boxes w/o Dividers</td><td>Fisher</td><td>03-395-455</td><td></td></tr><tr><td>Dumont #5 Forceps</td><td>Fine Science Tools</td><td>11251-20</td><td></td></tr><tr><td>Glacial Acetic Acid</td><td>Fisher</td><td>BP2401-500</td><td></td></tr><tr><td>Leica S6 E Stereozoom 0.63X-4.0X microscope</td><td>W. Nuhsbaum, Inc.</td><td>10446294</td><td></td></tr><tr><td>Petri dish (100 mm x 15 mm)</td><td>BD Falcon</td><td>351029</td><td>Reuseable if thoroughly washed and dried</td></tr><tr><td>Quick-Snap Microtubes</td><td>Alkali Scientific Inc.</td><td>C3017</td><td></td></tr><tr><td>Red Food Coloring (Water, Propylene Glycol, FD&amp;amp;C Reds 40 and 3, Propylparaben)</td><td>McCormick</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>Sucrose</td><td>IBI Scientific</td><td>IB37160</td><td></td></tr></tbody></table>

taste preference assay for adult drosophila

Olfactory and gustatory perception of the environment is vital for animal survival. The most obvious application of these chemosenses is to be able to distinguish good food sources from potentially dangerous food sources. Gustation requires physical contact with a chemical compound which is able to signal through taste receptors that are expressed on the surface of neurons. In insects, these gustatory neurons can be located across the animal's body allowing taste to play an important role in many different behaviors. Insects typically prefer compounds containing sugars, while compounds that are considered bitter tasting are avoided. Given the basic biological importance of taste, there is intense interest in understanding the molecular mechanisms underlying this sensory modality. We describe an adult Drosophila taste assay which reflects the preference of the animals for a given tastant compound. This assay may be applied to animals of any genetic background to examine the taste preference for a desired soluble compound.

כמה תוצאות אופייניות מבחני העדפה לטעם מוצגות להלן. ברוב הניסויים שונים כלשהי עוצמת צביעת בטן יהיה לראות (איור 1). כל צביעה בבטן אם אינטנסיבי או חלש נחשבת בליעה חיובית. לכן מומלץ לחוקרים להבקיע בעלי חיים תוך עיוור תנאי הניסוי כדי להגביל כל הט?...

Watch this Scientific Journal Video about Taste Preference Assay for Adult Drosophila at JoVE.com

Taste Preference Assay for Adult Drosophila

Taste is an important sensory process which facilitates attraction to beneficial substances and avoidance of toxic substances. This protocol describes a simple ingestion assay for determining Drosophila gustatory preference for a given chemical compound.

Assay העדפות טעם למבוגרים<em&gt; תסיסנית</em

Olfactory and gustatory perception of the environment is vital for animal survival.  The most obvious application of these chemosenses is to be able to ...

taste-preference-assay-for-adult-drosophila

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Taste Preference Assay for Adult Drosophila

9.6K Views.  Indiana University School of Medicine-South Bend. Taste is an important sensory process which facilitates attraction to beneficial substances and avoidance of toxic substances. This protocol describes a simple ingestion assay for determining Drosophila gustatory preference for a given chemical compound.

Video: Taste Preference Assay for Adult Drosophila

Appetitive Associative Olfactory Learning in Drosophila Larvae

In the following we describe the methodological details of appetitive associative olfactory learning in Drosophila larvae. The setup, in combination with genetic interference, provides a handle to analyze the neuronal and molecular fundamentals of specifically associative learning in a simple larval brain.
Organisms can use past experience to adjust present behavior. Such acquisition of behavioral potential can be defined as learning, and the physical bases of these potentials as memory traces1-4. Neuroscientists try to understand how these processes are organized in terms of molecular and neuronal changes in the brain by using a variety of methods in model organisms ranging from insects to vertebrates5,6. For such endeavors it is helpful to use model systems that are simple and experimentally accessible. The Drosophila larva has turned out to satisfy these demands based on the availability of robust behavioral assays, the existence of a variety of transgenic techniques and the elementary organization of the nervous system comprising only about 10,000 neurons (albeit with some concessions: cognitive limitations, few behavioral options, and richness of experience questionable)7-10.
Drosophila larvae can form associations between odors and appetitive gustatory reinforcement like sugar11-14. In a standard assay, established in the lab of B. Gerber, animals receive a two-odor reciprocal training: A first group of larvae is exposed to an odor A together with a gustatory reinforcer (sugar reward) and is subsequently exposed to an odor B without reinforcement 9. Meanwhile a second group of larvae receives reciprocal training while experiencing odor A without reinforcement and subsequently being exposed to odor B with reinforcement (sugar reward). In the following both groups are tested for their preference between the two odors. Relatively higher preferences for the rewarded odor reflect associative learning - presented as a performance index (PI). The conclusion regarding the associative nature of the performance index is compelling, because apart from the contingency between odors and tastants, other parameters, such as odor and reward exposure, passage of time and handling do not differ between the two groups9.

Appetitive Associative Olfactory Learning in Drosophila Larvae

Drosophila larvae are able to associate odor stimuli with gustatory reward. Here we describe a simple behavioral paradigm that allows the analysis of appetitive associative olfactory learning.

למידה אסוציאטיבית הרחה באפטטיבית<em&gt; דרוזופילה</em&gt; זחלים

In the following we describe the methodological  details of appetitive associative olfactory learning in Drosophila larvae. The setup, in combination with ...

A Single-fly Assay for Foraging Behavior in Drosophila

For many animals, hunger promotes changes in the olfactory system in a manner that facilitates the search for appropriate food sources. In this video article, we describe an automated assay to measure the effect of hunger or satiety on olfactory dependent food search behavior in the adult fruit fly Drosophila melanogaster. In a light-tight box illuminated by red light that is invisible to fruit flies, a camera linked to custom data acquisition software monitors the position of six flies simultaneously. Each fly is confined to walk in individual arenas containing a food odor at the center. The testing arenas rest on a porous floor that functions to prevent odor accumulation. Latency to locate the odor source, a metric that reflects olfactory sensitivity under different physiological states, is determined by software analysis. Here, we discuss the critical mechanics of running this behavioral paradigm and cover specific issues regarding fly loading, odor contamination, assay temperature, data quality, and statistical analysis.

A Single-fly Assay for Foraging Behavior in Drosophila

In this video article, we describe an automated assay to measure the effect of hunger or satiety on olfactory dependent food search behavior in the adult fruit fly Drosophila melanogaster.

יחיד לטוס Assay עבור התנהגות שיחור מזון ב<em&gt; דרוזופילה</em

For many animals, hunger promotes changes in the olfactory system in a manner that facilitates the search for appropriate food sources. In this video ...

Testing Drosophila Olfaction with a Y-maze Assay

Detecting signals from the environment is essential for animals to ensure their survival. To this aim, they use environmental cues such as vision, mechanoreception, hearing, and chemoperception through taste, via direct contact or through olfaction, which represents the response to a volatile molecule acting at longer range. Volatile chemical molecules are very important signals for most animals in the detection of danger, a source of food, or to communicate between individuals. Drosophila melanogaster is one of the most common biological models for scientists to explore the cellular and molecular basis of olfaction. In order to highlight olfactory abilities of this small insect, we describe a modified choice protocol based on the Y-maze test classically used with mice. Data obtained with Y-mazes give valuable information to better understand how animals deal with their perpetually changing environment. We introduce a step-by-step protocol to study the impact of odorants on fly exploratory response using this Y-maze assay.

Testing Drosophila Olfaction with a Y-maze Assay

We present a choice test to reveal the influence of odorants on Drosophila behavior using a Y-maze assay.

בדיקה<em&gt; דרוזופילה</em&gt; Olfaction עם Assay Y-מבוך

Detecting signals from the environment is essential for animals to ensure their survival. To this aim, they use environmental cues such as vision, ...

High Throughput Assay to Examine Egg-Laying Preferences of Individual Drosophila melanogaster

Recently, egg-laying preference of Drosophila has emerged as a genetically tractable model to study the neural basis of simple decision-making processes. When selecting sites to deposit their eggs, female flies are capable of ranking the relative attractiveness of their options and choosing the &#34;greater of two goods.&#34; However, most egg-laying preference assays are not practical if one wants to take a systematic genetic screening approach to search for the circuit basis underlying this simple decision-making process, as they are population-based and laborious to set up. To increase the throughput of studying of egg-laying preferences of single females, we developed custom chambers that each can simultaneously assay egg-laying preferences of up to thirty individual flies as well as a protocol that ensures each female has a high egg-laying rate (so that their preference is readily discernable and more convincing). Our approach is simple to execute and produces very consistent results. Additionally, these chambers can be equipped with different attachments to allow video recording the egg-laying animals and to deliver light for optogenetics studies. This article provides the blueprints for fabricating these chambers and the procedure for preparing the flies to be assayed in these chambers.

High Throughput Assay to Examine Egg-Laying Preferences of Individual Drosophila melanogaster

This protocol describes a high throughput assay for testing egg-laying preferences of Drosophila melanogaster at single-animal resolution. This assay provides a simple, efficient, and scalable platform to identify genes and circuit components that control a simple decision-making process.

Assay תפוקה גבוהה לבחינת העדפות הטלה של פרט<em&gt; תסיסנית</em

Recently, egg-laying preference of Drosophila has emerged as a genetically tractable model to study the neural basis of simple decision-making processes. ...

A Simple Way to Measure Alterations in Reward-seeking Behavior Using Drosophila melanogaster

We describe a protocol for measuring ethanol self-administration in fruit flies (Drosophila melanogaster) as a proxy for changes in reward states. We demonstrate a simple way to tap into the fly reward system, modify experiences related to natural reward, and use voluntary ethanol consumption as a measure for changes in reward states. The approach serves as a relevant tool to study the neurons and genes that play a role in experience-mediated changes of internal state. The protocol is composed of two discrete parts: exposing the flies to rewarding and nonrewarding experiences, and assaying voluntary ethanol consumption as a measure of the motivation to obtain a drug reward. The two parts can be used independently to induce the modulation of experience as an initial step for further downstream assays or as an independent two-choice feeding assay, respectively. The protocol does not require a complicated setup and can therefore be applied in any laboratory with basic fly culture tools.

A Simple Way to Measure Alterations in Reward-seeking Behavior Using Drosophila melanogaster

We describe a protocol for inducing rewarding and nonrewarding experiences in fruit flies (Drosophila melanogaster) using voluntary ethanol consumption as a measure for changes in reward states.

דרך פשוטה למדוד שינויים בהתנהגות שוחרת זכה שימוש<em&gt; תסיסנית</em

We describe a protocol for measuring ethanol self-administration in fruit flies (Drosophila melanogaster) as a proxy for changes in reward states. We ...

The CApillary FEeder Assay Measures Food Intake in Drosophila melanogaster

For most animals, feeding is an essential behavior for securing survival, and it influences development, locomotion, health and reproduction. Ingestion of the right type and quantity of food therefore has a major influence on quality of life. Research on feeding behavior focuses on the underlying processes that ensure actual feeding and unravels the role of factors regulating internal energy homeostasis and the neuronal bases of decision-making. The model organism Drosophila melanogaster, with its great variety of genetically traceable tools for labeling and manipulating single neurons, allows mapping of neuronal networks and identification of molecular signaling cascades involved in the regulation of food intake. This report demonstrates the CApillary FEeder assay (CAFE) and shows how to measure food intake in a group of flies for time spans ranging from hours to days. This easy-to-use assay consists of glass capillaries filled with liquid food that flies can freely access and feed on. Food consumption in the assay is accurately determined using simple measurement tools. Herein we describe step-by-step the method from setup to successful execution of the CAFE assay, and provide practical examples to analyze the food intake of a group of flies under controlled conditions. The reader is guided through possible limitations of the assay, and advantages and disadvantages of the method compared to other feeding assays in D. melanogaster are evaluated.

The CApillary FEeder Assay Measures Food Intake in Drosophila melanogaster

The CApillary FEeder (CAFE) assay is a simple, budget-friendly, highly reliable method for investigating mechanisms underlying food intake. Used with the highly versatile genetic model organism Drosophila melanogaster, it provides a powerful means of gaining new insights into regulatory mechanisms of food intake.

את assay נימי מזין מודד צריכת המזון ב<em&gt; תסיסנית</em

For most animals, feeding is an essential behavior for securing survival, and it influences development, locomotion, health and reproduction. Ingestion of ...

A Rapid Food-Preference Assay in Drosophila

To select food with nutritional value while avoiding the consumption of harmful agents, animals need a sophisticated and robust taste system to evaluate their food environment. The fruit fly, Drosophila melanogaster, is a genetically tractable model organism that is widely used to decipher the molecular, cellular, and neural underpinnings of food preference. To analyze fly food preference, a robust feeding method is needed. Described here is a two-choice feeding assay, which is rigorous, cost-saving, and fast. The assay is Petri-dish-based and involves the addition of two different foods supplemented with blue or red dye to the two halves of the dish. Then, ~70 prestarved, 2-4-day-old flies are placed in the dish and&#160;allowed to choose between blue and red foods in the dark for about 90 min. Examination of the abdomen of each fly is followed by the calculation of the preference index. In contrast to multiwell plates, each Petri dish takes only ~20 s to fill and saves time and effort. This feeding assay can be employed to quickly determine whether flies like or dislike a particular food.

A Rapid Food-Preference Assay in Drosophila

We present a protocol for a two-choice feeding assay for flies. This feeding assay is fast and easy to run and is suitable not only for small-scale laboratory research, but also for high-throughput behavioral screens in flies.

מבחני העדפת מזון מהירה בדרוסופילה

To select food with nutritional value while avoiding the consumption of harmful agents, animals need a sophisticated and robust taste system to evaluate ...

Feeding Test: Assessment of Feeding Preferences in Drosophila melanogaster

Source: Bovier, T. F., et al. <a href="https://www.jove.com/video/59535/" target="_blank">Methods to Test Endocrine Disruption in Drosophila melanogaster</a>. J. Vis. Exp. (2019).
This video describes a feeding assay for fruit flies in which colored food is used to monitor feeding and the effect added compounds may have on feeding activity. The example protocol tests the effects of several endocrine disrupting chemicals (EDC).

מבחן האכלה: הערכת העדפות האכלה בדרוזופילה מלנוגסטר

Source: Bovier, T. F., et al. Methods to Test Endocrine Disruption in Drosophila melanogaster. J. Vis. Exp. (2019).
This video describes a feeding assay ...

JoVE Encyclopedia of Experiments

Biology

Drosophila melanogaster (fruit fly)

Adult

Temperature Gradient Assay: A Method to Test Temperature Preference in Drosophila Larvae

Source: Liu, J., et al. <a href="https://www.jove.com/video/57963/" target="_blank">A Temperature Gradient Assay to Determine Thermal Preferences of Drosophila Larvae</a>. J. Vis. Exp. (2018).
Drosophila fruit flies can distinguish small changes in temperature and therefore select environments with favorable thermal conditions. This video describes a behavioral assay that tests the temperature preference of Drosophila larvae on a linear thermal gradient.

בדיקת שיפוע טמפרטורה: שיטה לבדיקת העדפת טמפרטורה בזחלי דרוזופילה

Source: Liu, J., et al. A Temperature Gradient Assay to Determine Thermal Preferences of Drosophila Larvae. J. Vis. Exp. (2018).
Drosophila fruit flies ...

Larva

Taste Preference Assay: A Method for Measuring Feeding Behavior in Drosophila

Source: Bantel, A. P. and Tessier, C. R. <a href="https://www.jove.com/video/54403/" target="_blank">Taste Preference Assay for Adult Drosophila</a>. J. Vis. Exp. (2016).
This video describes the taste preference assay, a behavioral method used to measure attraction or avoidance towards colored solutions that taste differently by assessing the fly&#39;s abdominal coloration after ingestion of the preferred substance. The featured protocol demonstrates the procedure used to measure flies&#39; preference towards solutions of varying sucrose concentrations.

בדיקת העדפות טעם: שיטה למדידת התנהגות האכלה בדרוזופילה

Source: Bantel, A. P. and Tessier, C. R. Taste Preference Assay for Adult Drosophila. J. Vis. Exp. (2016).
This video describes the taste preference ...

Assay העדפות טעם למבוגרים

Summary

Explore More Videos

Chapters in this video

למידה אסוציאטיבית הרחה באפטטיבית

יחיד לטוס Assay עבור התנהגות שיחור מזון ב

בדיקה

Assay תפוקה גבוהה לבחינת העדפות הטלה של פרט

דרך פשוטה למדוד שינויים בהתנהגות שוחרת זכה שימוש

את assay נימי מזין מודד צריכת המזון ב

מבחני העדפת מזון מהירה בדרוסופילה

מבחן האכלה: הערכת העדפות האכלה בדרוזופילה מלנוגסטר

בדיקת שיפוע טמפרטורה: שיטה לבדיקת העדפת טמפרטורה בזחלי דרוזופילה

בדיקת העדפות טעם: שיטה למדידת התנהגות האכלה בדרוזופילה