We would like to thank members of the Tessier lab for critical reading of this manuscript and helpful suggestions during the preparation of this protocol.

1. Starvation <ol><li> Bereiten Sie Hunger Fläschchen fliegen durch einen Wattebausch mit 18,2 MOhm Wasser am Boden eines Standard-Fliegen Fläschchen zu sättigen. Alternativ in ähnlicher Weise einen kleinen Streifen aus Filterpapier mit 18,2 MOhm Wasser und in einem Winkel in der Phiole zu sättigen. </li><li> Sammeln Sie Fliegen in Gruppen von ~ 100 Tiere auf einem CO 2 Pad und fügen Sie dann die Fliegen auf einem vorbereiteten Fläschchen. Hinweis: Die besten Ergebnisse werden mit den Tieren erhalten, die weniger als 5 Tage alt sind. Jedoch kann die genaue Alter der Tiere als experimentelle Variable gesteuert werden, um Änderungen in Geschmack bevorzugt im Laufe der Zeit zu bestimmen. </li><li> Verwenden Sie einen Wattebausch oder Schaumstoffstopper zu sichern die Fläschchen verschlossen. Legen Sie Fläschchen auf ihrer Seite in einem umwelt kontrollierten Inkubator. Man hält die Temperatur bei 25 ° C und die Feuchtigkeit über 70%. Lassen Sie Fläschchen unberührt für 24 Stunden. </li></ol> 2. Geschmackspräferenz Assay <ol><li> Bereiten Sie alle tastants für den Test am selben Tag eins-Tests. Hinweis: Die genauen tastants verwendet werden, je nach Versuchs Frage variieren gefragt. Im Folgenden sind beispiels tastants in diesem Protokoll verwendet. Siehe Abschnitt 4 für Optimierungen. <ol><li> Bereiten Kontrolle Geschmacksträger (1 mM Saccharose) von 10 &amp; mgr; l von 100 mM Saccharose-Lösung kombiniert, 13 ul rote Lebensmittelfarbe, und 977 &amp; mgr; l von 18,2 M &amp; Omega; Wasser. </li><li> Bereiten Sie experimentellen Geschmacksträger (5 mM Saccharose) von 50 &amp; mgr; l von 100 mM Saccharose-Lösung kombiniert, 10 ul blauen Lebensmittelfarbe, und 940 &amp; mgr; l von 18,2 M &amp; Omega; Wasser. </li></ol></li><li> Machen Assaykammern unter Verwendung eines Standard 100 mm x 15 mm Kunststoff-Petrischale in der folgenden Weise hergestellt: <ol><li> Platzieren Sie drei 10 ul Tropfen Steuergeschmacksträger am nächsten zu dem Rand der Platte um 12 Uhr und weitere 3 Tropfen bei 6 Uhr. Sicherzustellen, dass der Abstand zwischen den Tropfen ähnelt. </li><li> Platzieren drei 10 ul Tropfen experimentellen Geschmacksträger am nächsten zu der Kante der Platte bei 3 Uhr und einandere 3 fällt um 9 Uhr. Sicherzustellen, dass der Abstand zwischen den Tropfen ähnelt. </li><li> Wiederholen Sie die Schritte 2.2.1 und 2.2.2 für so viele Wiederholungen wie gewünscht. </li></ol></li><li> Leer 1 Flasche ~ 100 verhungert Fliegen auf einen CO 2 Pad gerade lang genug , um alle Tiere zu betäuben (ca. 10 sec). Bürsten Sie die Tiere in die Mitte eines vorbereiteten Testkammer und Deckel mit dem Schalendeckel. Hinweis: Längere CO 2 Exposition sollte vermieden werden , um Erholungszeit und Begrenzung Interferenzen mit dem Fressverhalten zu verbessern. Die Exposition gegenüber Eis (~ 5 min) für anesthetizing verwendet werden , um CO 2 Verhaltenseffekte zu vermeiden , die von selbst eine begrenzte Exposition entstehen können. </li><li> Legen Sie die Testkammer in einem undurchsichtigen Karton. Achten Sie darauf, die außerhalb der Box mit der Bedingung und Genotyp getestet zu beschriften. </li><li> Platzieren Sie die gesamte Einrichtung (Testkammer enthalten innerhalb Karton aus Schritt 2.4) in einen 25 ° C-Inkubator mit mindestens 70% Feuchtigkeit für 2 Stunden. </li&gt; <li> Wiederholen Sie die Schritte 2.3 bis 2.5 für alle Wiederholungen. </li><li> Nach 2 Stunden, legen Sie die Testkammern, noch in Kartons enthalten sind, direkt in einem -20 ° C Gefrierschrank bis sie bereit zur Quantifizierung. </li></ol> 3. Geschmackspräferenz Assay Quantifizierung <ol><li> Lassen Sie einen einzigen Test Kammer auf Raumtemperatur erwärmen (ca. 5 min). </li><li> Unter einem Präpariermikroskop, einer Bürste oder einem Paar Pinzette, Gruppe Tiere auf der Grundlage der Farbe ihres Bauches: rot, blau, violett oder klar (Abbildung 1). </li><li> Notieren Sie die Anzahl der Tiere in jeder Gruppe. Betrachten wir klare Tiere wurden nicht in den Test teilgenommen und deshalb sind sie nicht in allen Berechnungen. </li><li> Berechne den Vorzugsindex nach einer der folgenden Gleichungen: <ol><li> Wenn die experimentelle Geschmacksträger von Interesse für den roten Farbstoff zugesetzt wird, dann verwenden (N rot + 0,5 N lila) / (N rot + blau N + N purple). </li><li> Wenn die experimentelle Geschmacksträger auf den blauen Farbstoff hinzugefügt wird, und stellen Sie dann die Gleichung (N blau + 0,5 N lila) / (N + N blau rot + N violett). </li></ol></li><li> Wiederholen Sie die Berechnungen für alle experimentellen Bedingungen und Replikate. </li></ol> 4. Optimierung der Geschmackspräferenz Assay <ol><li> Empirisch bestimmen verwendet werden, um die Konzentration von Lebensmittelfarbe Indikatoren so Lebensmittelfarbe nicht das Ergebnis des Geschmackstest wirkt sich wie folgt: <ol><li> Bereiten Sie 4 tastants die gleiche Basis - Verbindung (zB 5 mM Saccharose) , wie in Schritt angegeben 2.1, aber lassen Sie die Lebensmittelfarbe. </li><li> In 1,3% rote Lebensmittelfarbe auf eine der tastants. Nehmen Sie die restlichen 3 tastants mit blauen Lebensmittelfarbe von unterschiedlichen Konzentrationen in jedem Röhrchen (zB 0,6%, 1% und 1,3%). </li><li> Vollständige Protokollschritte 2.2 bis 3.4 für jedes Paar Geschmacksträger: 1,3% rot vs. 0,6% blau; 1,3% rot vs. 1% blau und1,3% rot vs. 1,3% blau. </li><li> Wiederholen Sie Schritt 4.1.1-4.1.3 mit unterschiedlichen Prozentsätzen der blauen Lebensmittelfarbe , bis die Präferenz - Index Mittelwerte ein Wert von 0 (Abbildung 2). Hinweis: Als Ausgangspunkt, um 1,3% rote Lebensmittelfarbe in Verbindung mit 1% blau Lebensmittelfarbe der Regel gute Ergebnisse liefert. Wenn keine befriedigende Konzentration an blauen Lebensmittelfarbe kann auf 1,3% Farbstoff angepaßt werden, wird im Schritt 4.1.1 bis 4.1.3 mit variierenden Konzentrationen von roten Färbung und eine konstante Konzentration an blauen Lebensmittelfarbe wiederholt werden. </li><li> Analyse alle Bedingungen mit den gleichen optimierten Lebensmittelfarbe Konzentrationen getestet werden. </li></ol></li></ol>

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	<li>Herrero, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fruit+fly+behavior+in+response+to+chemosensory+signals.">Fruit fly behavior in response to chemosensory signals.</a> Peptides. 38 (2), 228-237 (2012).</li><li>Vosshall, L. B., Stocker, R. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Molecular+architecture+of+smell+and+taste+in+Drosophila.">Molecular architecture of smell and taste in Drosophila.</a> Annu Rev Neurosci. 30, 505-533 (2007).</li><li>Harris, D. T., Kallman, B. R., Mullaney, B. C., Scott, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Representations+of+Taste+Modality+in+the+Drosophila+Brain.">Representations of Taste Modality in the Drosophila Brain.</a> Neuron. 86 (6), 1449-1460 (2015).</li><li>Hong, E. J., Wilson, R. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Simultaneous+encoding+of+odors+by+channels+with+diverse+sensitivity+to+inhibition.">Simultaneous encoding of odors by channels with diverse sensitivity to inhibition.</a> Neuron. 85 (3), 573-589 (2015).</li><li>Kain, P., Dahanukar, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Secondary+taste+neurons+that+convey+sweet+taste+and+starvation+in+the+Drosophila+brain.">Secondary taste neurons that convey sweet taste and starvation in the Drosophila brain.</a> Neuron. 85 (4), 819-832 (2015).</li><li>Masek, P., Worden, K., Aso, Y., Rubin, G. M., Keene, A. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+dopamine-modulated+neural+circuit+regulating+aversive+taste+memory+in+Drosophila.">A dopamine-modulated neural circuit regulating aversive taste memory in Drosophila.</a> Curr Biol. 25 (11), 1535-1541 (2015).</li><li>Charlu, S., Wisotsky, Z., Medina, A., Dahanukar, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Acid+sensing+by+sweet+and+bitter+taste+neurons+in+Drosophila+melanogaster.">Acid sensing by sweet and bitter taste neurons in Drosophila melanogaster.</a> Nat Commun. 4, 2042 (2013).</li><li>Clyne, P. J., Warr, C. G., Carlson, J. 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H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Drosophila+TRPA1+channel+mediates+chemical+avoidance+in+gustatory+receptor+neurons.">Drosophila TRPA1 channel mediates chemical avoidance in gustatory receptor neurons.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 107 (18), 8440-8445 (2010).</li><li>Koh, T. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Drosophila+IR20a+clade+of+ionotropic+receptors+are+candidate+taste+and+pheromone+receptors.">The Drosophila IR20a clade of ionotropic receptors are candidate taste and pheromone receptors.</a> Neuron. 83 (4), 850-865 (2014).</li><li>Zhang, Y. V., Ni, J., Montell, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+molecular+basis+for+attractive+salt-taste+coding+in+Drosophila.">The molecular basis for attractive salt-taste coding in Drosophila.</a> Science. 340 (6138), 1334-1338 (2013).</li><li>Zhang, Y. V., Raghuwanshi, R. P., Shen, W. L., Montell, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Food+experience-induced+taste+desensitization+modulated+by+the+Drosophila+TRPL+channel.">Food experience-induced taste desensitization modulated by the Drosophila TRPL channel.</a> Nat Neurosci. 16 (10), 1468-1476 (2013).</li><li>Liman, E. R., Zhang, Y. V., Montell, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Peripheral+coding+of+taste.">Peripheral coding of taste.</a> Neuron. 81 (5), 984-1000 (2014).</li><li>Rodrigues, V., Cheah, P. Y., Ray, K., Chia, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=malvolio,+the+Drosophila+homologue+of+mouse+NRAMP-1+(Bcg),+is+expressed+in+macrophages+and+in+the+nervous+system+and+is+required+for+normal+taste+behaviour.">malvolio, the Drosophila homologue of mouse NRAMP-1 (Bcg), is expressed in macrophages and in the nervous system and is required for normal taste behaviour.</a> EMBO J. 14 (13), 3007-3020 (1995).</li><li>Tanimura, T., Isono, K., Yamamoto, M. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Taste+sensitivity+to+trehalose+and+its+alteration+by+gene+dosage+in+Drosophila+melanogaster.">Taste sensitivity to trehalose and its alteration by gene dosage in Drosophila melanogaster.</a> Genetics. 119 (2), 399-406 (1988).</li><li>Weiss, L. A., Dahanukar, A., Kwon, J. Y., Banerjee, D., Carlson, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+molecular+and+cellular+basis+of+bitter+taste+in+Drosophila.">The molecular and cellular basis of bitter taste in Drosophila.</a> Neuron. 69 (2), 258-272 (2011).</li><li>French, A. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dual+mechanism+for+bitter+avoidance+in+Drosophila.">Dual mechanism for bitter avoidance in Drosophila.</a> J Neurosci. 35 (9), 3990-4004 (2015).</li><li>Deshpande, S. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quantifying+Drosophila+food+intake:+comparative+analysis+of+current+methodology.">Quantifying Drosophila food intake: comparative analysis of current methodology.</a> Nat Methods. 11 (5), 535-540 (2014).</li></ol>

The authors declare that they have no competing financial interests.

Wir haben für die Bestimmung Geschmackspräferenz in Drosophila eine einfache aber effektive Protokoll beschrieben. Versionen dieses Tests werden routinemäßig in Experimenten verwendet, die Beiträge von Geschmacks- Rezeptoren (GRS) zur Wahrnehmung der verschiedenen Qualitäten (bitter, süß, sauer, salzig und umami) Geschmacksverbindungen zu bestimmen. Das Drosophila - Genom enthält etwa 60 Gene , die 8,9 68 identifiziert Geschmacks- Rezeptoren durch alternatives Spleißen kodieren. Al...

Tiere verwenden Chemosensorik vorteilhaften Bedingungen zu unterscheiden, abgesehen von ungünstigen Bedingungen. Diese Wahrnehmung kann für solche Dinge entscheidend sein , wie die beste Nahrungsquelle zu bestimmen, die Vermeidung toxischer Substanzen oder zur Bestimmung der besten Paarungspartner 1. Chemosensorik wird oft in zwei sensorische Komponenten aufgeteilt: Geruchssinn und Geschmacks-Sinne. Ein Hauptunterscheidungsmerkmal dieser Sinne ist, dass olfaction (Geruch) die umgebende gasförmige chemische Umgebung verwendet wird, zu probieren, während gustation (Geschmack) physischen Kontakt mit einem nichtflüchtigen Substrat erfordert. Beide sensorischen Modalitäten stimulieren neurologische Reaktionen , die verarbeitet werden und im Gehirn dekodiert die entsprechende anziehende oder abstoßende Verhalten 2 zu erzeugen. Diese Sinne sind daher von entscheidender Bedeutung für das Überleben der Tiere. Die Fruchtfliege Drosophila melanogaster ist ein Modellorganismus, der in der Popularität für den Einsatz weiter zu wachsen in verstehening, wie Insekten Geruch und Geschmack wahrnehmen. Fruchtfliegen bieten enorme Vorteile gegenüber anderen Modellsystemen aufgrund der Fülle von genetischen Werkzeuge zur Verfügung, für das Aufschneiden der molekularen, zellulären und Verhaltenswege. Arbeit in den letzten 15 Jahren hat sich besonders dazu beigetragen, die spezifische zelluläre Identitäten bei der Charakterisierung, neuronale Rezeptoren und Signal beide Mechanismen, die in Geruch und Geschmack. Nun ist die Macht der Drosophila Genetik verwendet wird , um weiter erläutern , wie diese Prozesse im einzelnen Neurons und einzelne Schaltungsebene codiert sind 3-6. Daher Assays, die Ablesungen von Veränderungen an sensorischen Bahnen vital dieser Felder auf die anhaltende Fortschritt sind leicht erzielt bieten. Während viel über bekannt ist, wie olfaktorische Signale werden im Gehirn kodiert und verarbeitet werden, viel weniger über ähnliche Mechanismen in der Geschmacks- Weg verstanden. Wir beschreiben hier ein Protokoll, das verwendet werden kann, Geschmack preferen zu ermittelnce in Drosophila. Drosophila, wie Säugetiere, bevorzugen in der Regel süß schmeckende Verbindungen als zu bitter schmeckenden Verbindungen gegenüber . Jede Kombination dieser Nahrungsquellen können in diesem Versuchsdesign verwendet werden, um festzustellen, wie bekannte genetische Veränderungen Geschmack Wahl beeinflussen. Zusätzlich können pharmakologische Interventionsstrategien in ähnlicher Weise auf ihre Wirkungen auf Tiere Geschmackspräferenz bewertet werden. Die Leichtigkeit und Flexibilität dieses Assays ist es ein nützliches Paradigma für die Natur der gustatory Wahrnehmung in Drosophila zu verstehen.

<table><tbody><tr><td>Blue Food Coloring (Water, Propylene Glycol, FD&amp;amp;C Blue 1 and Red 40, Propylparaben)</td><td>McCormick</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>Cryo/Freezer Boxes w/o Dividers</td><td>Fisher</td><td>03-395-455</td><td></td></tr><tr><td>Dumont #5 Forceps</td><td>Fine Science Tools</td><td>11251-20</td><td></td></tr><tr><td>Glacial Acetic Acid</td><td>Fisher</td><td>BP2401-500</td><td></td></tr><tr><td>Leica S6 E Stereozoom 0.63X-4.0X microscope</td><td>W. Nuhsbaum, Inc.</td><td>10446294</td><td></td></tr><tr><td>Petri dish (100 mm x 15 mm)</td><td>BD Falcon</td><td>351029</td><td>Reuseable if thoroughly washed and dried</td></tr><tr><td>Quick-Snap Microtubes</td><td>Alkali Scientific Inc.</td><td>C3017</td><td></td></tr><tr><td>Red Food Coloring (Water, Propylene Glycol, FD&amp;amp;C Reds 40 and 3, Propylparaben)</td><td>McCormick</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>Sucrose</td><td>IBI Scientific</td><td>IB37160</td><td></td></tr></tbody></table>

taste preference assay for adult drosophila

Olfactory and gustatory perception of the environment is vital for animal survival. The most obvious application of these chemosenses is to be able to distinguish good food sources from potentially dangerous food sources. Gustation requires physical contact with a chemical compound which is able to signal through taste receptors that are expressed on the surface of neurons. In insects, these gustatory neurons can be located across the animal's body allowing taste to play an important role in many different behaviors. Insects typically prefer compounds containing sugars, while compounds that are considered bitter tasting are avoided. Given the basic biological importance of taste, there is intense interest in understanding the molecular mechanisms underlying this sensory modality. We describe an adult Drosophila taste assay which reflects the preference of the animals for a given tastant compound. This assay may be applied to animals of any genetic background to examine the taste preference for a desired soluble compound.

Einige typische Ergebnisse von Geschmackspräferenz Assays sind unten dargestellt. In den meisten Experimenten wird eine gewisse Variation in der Intensität der abdominalen Färbung zu sehen (Abbildung 1). Jede Färbung im Bauch, ob intensiv oder schwach ist, eine positive Aufnahme in Betracht gezogen. Es ist daher ratsam, für Forscher Tiere während blind für die experimentellen Bedingungen zu erzielen, um mögliche Verzerrungen zu begrenzen. <p class="jove_conte...

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Taste Preference Assay for Adult Drosophila

Taste is an important sensory process which facilitates attraction to beneficial substances and avoidance of toxic substances. This protocol describes a simple ingestion assay for determining Drosophila gustatory preference for a given chemical compound.

Geschmackspräferenz Assay für Erwachsene<em&gt; Drosophila</em

Olfactory and gustatory perception of the environment is vital for animal survival.  The most obvious application of these chemosenses is to be able to ...

taste-preference-assay-for-adult-drosophila

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Taste Preference Assay for Adult Drosophila

9.6K Aufrufe.  Indiana University School of Medicine-South Bend. Taste is an important sensory process which facilitates attraction to beneficial substances and avoidance of toxic substances. This protocol describes a simple ingestion assay for determining Drosophila gustatory preference for a given chemical compound.

Serie: Taste Preference Assay for Adult Drosophila

Appetitive Associative Olfactory Learning in Drosophila Larvae

In the following we describe the methodological details of appetitive associative olfactory learning in Drosophila larvae. The setup, in combination with genetic interference, provides a handle to analyze the neuronal and molecular fundamentals of specifically associative learning in a simple larval brain.
Organisms can use past experience to adjust present behavior. Such acquisition of behavioral potential can be defined as learning, and the physical bases of these potentials as memory traces1-4. Neuroscientists try to understand how these processes are organized in terms of molecular and neuronal changes in the brain by using a variety of methods in model organisms ranging from insects to vertebrates5,6. For such endeavors it is helpful to use model systems that are simple and experimentally accessible. The Drosophila larva has turned out to satisfy these demands based on the availability of robust behavioral assays, the existence of a variety of transgenic techniques and the elementary organization of the nervous system comprising only about 10,000 neurons (albeit with some concessions: cognitive limitations, few behavioral options, and richness of experience questionable)7-10.
Drosophila larvae can form associations between odors and appetitive gustatory reinforcement like sugar11-14. In a standard assay, established in the lab of B. Gerber, animals receive a two-odor reciprocal training: A first group of larvae is exposed to an odor A together with a gustatory reinforcer (sugar reward) and is subsequently exposed to an odor B without reinforcement 9. Meanwhile a second group of larvae receives reciprocal training while experiencing odor A without reinforcement and subsequently being exposed to odor B with reinforcement (sugar reward). In the following both groups are tested for their preference between the two odors. Relatively higher preferences for the rewarded odor reflect associative learning - presented as a performance index (PI). The conclusion regarding the associative nature of the performance index is compelling, because apart from the contingency between odors and tastants, other parameters, such as odor and reward exposure, passage of time and handling do not differ between the two groups9.

Appetitive Associative Olfactory Learning in Drosophila Larvae

Drosophila larvae are able to associate odor stimuli with gustatory reward. Here we describe a simple behavioral paradigm that allows the analysis of appetitive associative olfactory learning.

Appetitive Assoziative olfaktorischen Lernens in<em&gt; Drosophila</em&gt; Larven

In the following we describe the methodological  details of appetitive associative olfactory learning in Drosophila larvae. The setup, in combination with ...

Forschung

Neurowissenschaften

A Single-fly Assay for Foraging Behavior in Drosophila

For many animals, hunger promotes changes in the olfactory system in a manner that facilitates the search for appropriate food sources. In this video article, we describe an automated assay to measure the effect of hunger or satiety on olfactory dependent food search behavior in the adult fruit fly Drosophila melanogaster. In a light-tight box illuminated by red light that is invisible to fruit flies, a camera linked to custom data acquisition software monitors the position of six flies simultaneously. Each fly is confined to walk in individual arenas containing a food odor at the center. The testing arenas rest on a porous floor that functions to prevent odor accumulation. Latency to locate the odor source, a metric that reflects olfactory sensitivity under different physiological states, is determined by software analysis. Here, we discuss the critical mechanics of running this behavioral paradigm and cover specific issues regarding fly loading, odor contamination, assay temperature, data quality, and statistical analysis.

A Single-fly Assay for Foraging Behavior in Drosophila

In this video article, we describe an automated assay to measure the effect of hunger or satiety on olfactory dependent food search behavior in the adult fruit fly Drosophila melanogaster.

Ein Single-fly-Assay für Sammelverhalten in<em&gt; Drosophila</em

For many animals, hunger promotes changes in the olfactory system in a manner that facilitates the search for appropriate food sources. In this video ...

Testing Drosophila Olfaction with a Y-maze Assay

Detecting signals from the environment is essential for animals to ensure their survival. To this aim, they use environmental cues such as vision, mechanoreception, hearing, and chemoperception through taste, via direct contact or through olfaction, which represents the response to a volatile molecule acting at longer range. Volatile chemical molecules are very important signals for most animals in the detection of danger, a source of food, or to communicate between individuals. Drosophila melanogaster is one of the most common biological models for scientists to explore the cellular and molecular basis of olfaction. In order to highlight olfactory abilities of this small insect, we describe a modified choice protocol based on the Y-maze test classically used with mice. Data obtained with Y-mazes give valuable information to better understand how animals deal with their perpetually changing environment. We introduce a step-by-step protocol to study the impact of odorants on fly exploratory response using this Y-maze assay.

Testing Drosophila Olfaction with a Y-maze Assay

We present a choice test to reveal the influence of odorants on Drosophila behavior using a Y-maze assay.

Testen<em&gt; Drosophila</em&gt; Riechen mit einem Y-Labyrinth-Test

Detecting signals from the environment is essential for animals to ensure their survival. To this aim, they use environmental cues such as vision, ...

High Throughput Assay to Examine Egg-Laying Preferences of Individual Drosophila melanogaster

Recently, egg-laying preference of Drosophila has emerged as a genetically tractable model to study the neural basis of simple decision-making processes. When selecting sites to deposit their eggs, female flies are capable of ranking the relative attractiveness of their options and choosing the &#34;greater of two goods.&#34; However, most egg-laying preference assays are not practical if one wants to take a systematic genetic screening approach to search for the circuit basis underlying this simple decision-making process, as they are population-based and laborious to set up. To increase the throughput of studying of egg-laying preferences of single females, we developed custom chambers that each can simultaneously assay egg-laying preferences of up to thirty individual flies as well as a protocol that ensures each female has a high egg-laying rate (so that their preference is readily discernable and more convincing). Our approach is simple to execute and produces very consistent results. Additionally, these chambers can be equipped with different attachments to allow video recording the egg-laying animals and to deliver light for optogenetics studies. This article provides the blueprints for fabricating these chambers and the procedure for preparing the flies to be assayed in these chambers.

High Throughput Assay to Examine Egg-Laying Preferences of Individual Drosophila melanogaster

This protocol describes a high throughput assay for testing egg-laying preferences of Drosophila melanogaster at single-animal resolution. This assay provides a simple, efficient, and scalable platform to identify genes and circuit components that control a simple decision-making process.

Assay mit hohem Durchsatz Eiablage Präferenzen der einzelnen zu untersuchen<em&gt; Drosophila melanogaster</em

Recently, egg-laying preference of Drosophila has emerged as a genetically tractable model to study the neural basis of simple decision-making processes. ...

A Simple Way to Measure Alterations in Reward-seeking Behavior Using Drosophila melanogaster

We describe a protocol for measuring ethanol self-administration in fruit flies (Drosophila melanogaster) as a proxy for changes in reward states. We demonstrate a simple way to tap into the fly reward system, modify experiences related to natural reward, and use voluntary ethanol consumption as a measure for changes in reward states. The approach serves as a relevant tool to study the neurons and genes that play a role in experience-mediated changes of internal state. The protocol is composed of two discrete parts: exposing the flies to rewarding and nonrewarding experiences, and assaying voluntary ethanol consumption as a measure of the motivation to obtain a drug reward. The two parts can be used independently to induce the modulation of experience as an initial step for further downstream assays or as an independent two-choice feeding assay, respectively. The protocol does not require a complicated setup and can therefore be applied in any laboratory with basic fly culture tools.

A Simple Way to Measure Alterations in Reward-seeking Behavior Using Drosophila melanogaster

We describe a protocol for inducing rewarding and nonrewarding experiences in fruit flies (Drosophila melanogaster) using voluntary ethanol consumption as a measure for changes in reward states.

Ein einfacher Weg zu messen Veränderungen in Reward-seeking Verhalten verwenden<em&gt; Drosophila melanogaster</em

We describe a protocol for measuring ethanol self-administration in fruit flies (Drosophila melanogaster) as a proxy for changes in reward states. We ...

The CApillary FEeder Assay Measures Food Intake in Drosophila melanogaster

For most animals, feeding is an essential behavior for securing survival, and it influences development, locomotion, health and reproduction. Ingestion of the right type and quantity of food therefore has a major influence on quality of life. Research on feeding behavior focuses on the underlying processes that ensure actual feeding and unravels the role of factors regulating internal energy homeostasis and the neuronal bases of decision-making. The model organism Drosophila melanogaster, with its great variety of genetically traceable tools for labeling and manipulating single neurons, allows mapping of neuronal networks and identification of molecular signaling cascades involved in the regulation of food intake. This report demonstrates the CApillary FEeder assay (CAFE) and shows how to measure food intake in a group of flies for time spans ranging from hours to days. This easy-to-use assay consists of glass capillaries filled with liquid food that flies can freely access and feed on. Food consumption in the assay is accurately determined using simple measurement tools. Herein we describe step-by-step the method from setup to successful execution of the CAFE assay, and provide practical examples to analyze the food intake of a group of flies under controlled conditions. The reader is guided through possible limitations of the assay, and advantages and disadvantages of the method compared to other feeding assays in D. melanogaster are evaluated.

The CApillary FEeder Assay Measures Food Intake in Drosophila melanogaster

The CApillary FEeder (CAFE) assay is a simple, budget-friendly, highly reliable method for investigating mechanisms underlying food intake. Used with the highly versatile genetic model organism Drosophila melanogaster, it provides a powerful means of gaining new insights into regulatory mechanisms of food intake.

Die kapillare feeder Assay misst die Nahrungsaufnahme in<em&gt; Drosophila melanogaster</em

For most animals, feeding is an essential behavior for securing survival, and it influences development, locomotion, health and reproduction. Ingestion of ...

A Rapid Food-Preference Assay in Drosophila

To select food with nutritional value while avoiding the consumption of harmful agents, animals need a sophisticated and robust taste system to evaluate their food environment. The fruit fly, Drosophila melanogaster, is a genetically tractable model organism that is widely used to decipher the molecular, cellular, and neural underpinnings of food preference. To analyze fly food preference, a robust feeding method is needed. Described here is a two-choice feeding assay, which is rigorous, cost-saving, and fast. The assay is Petri-dish-based and involves the addition of two different foods supplemented with blue or red dye to the two halves of the dish. Then, ~70 prestarved, 2-4-day-old flies are placed in the dish and&#160;allowed to choose between blue and red foods in the dark for about 90 min. Examination of the abdomen of each fly is followed by the calculation of the preference index. In contrast to multiwell plates, each Petri dish takes only ~20 s to fill and saves time and effort. This feeding assay can be employed to quickly determine whether flies like or dislike a particular food.

A Rapid Food-Preference Assay in Drosophila

We present a protocol for a two-choice feeding assay for flies. This feeding assay is fast and easy to run and is suitable not only for small-scale laboratory research, but also for high-throughput behavioral screens in flies.

Ein schneller Food-Preference-Test in Drosophila

To select food with nutritional value while avoiding the consumption of harmful agents, animals need a sophisticated and robust taste system to evaluate ...

Feeding Test: Assessment of Feeding Preferences in Drosophila melanogaster

Source: Bovier, T. F., et al. <a href="https://www.jove.com/video/59535/" target="_blank">Methods to Test Endocrine Disruption in Drosophila melanogaster</a>. J. Vis. Exp. (2019).
This video describes a feeding assay for fruit flies in which colored food is used to monitor feeding and the effect added compounds may have on feeding activity. The example protocol tests the effects of several endocrine disrupting chemicals (EDC).

Fütterungstest: Erfassung der Fresspräferenzen bei Drosophila melanogaster

Source: Bovier, T. F., et al. Methods to Test Endocrine Disruption in Drosophila melanogaster. J. Vis. Exp. (2019).
This video describes a feeding assay ...

JoVE Encyclopedia of Experiments

Biologie

Drosophila melanogaster (Fruchtfliege)

Adultes Tier

Temperature Gradient Assay: A Method to Test Temperature Preference in Drosophila Larvae

Source: Liu, J., et al. <a href="https://www.jove.com/video/57963/" target="_blank">A Temperature Gradient Assay to Determine Thermal Preferences of Drosophila Larvae</a>. J. Vis. Exp. (2018).
Drosophila fruit flies can distinguish small changes in temperature and therefore select environments with favorable thermal conditions. This video describes a behavioral assay that tests the temperature preference of Drosophila larvae on a linear thermal gradient.

Temperaturgradienten-Assay: Eine Methode zum Testen der Temperaturpräferenz bei Drosophila-Larven

Source: Liu, J., et al. A Temperature Gradient Assay to Determine Thermal Preferences of Drosophila Larvae. J. Vis. Exp. (2018).
Drosophila fruit flies ...

Larve

Taste Preference Assay: A Method for Measuring Feeding Behavior in Drosophila

Source: Bantel, A. P. and Tessier, C. R. <a href="https://www.jove.com/video/54403/" target="_blank">Taste Preference Assay for Adult Drosophila</a>. J. Vis. Exp. (2016).
This video describes the taste preference assay, a behavioral method used to measure attraction or avoidance towards colored solutions that taste differently by assessing the fly&#39;s abdominal coloration after ingestion of the preferred substance. The featured protocol demonstrates the procedure used to measure flies&#39; preference towards solutions of varying sucrose concentrations.

Geschmackspräferenz-Assay: Eine Methode zur Messung des Fressverhaltens bei Drosophila

Source: Bantel, A. P. and Tessier, C. R. Taste Preference Assay for Adult Drosophila. J. Vis. Exp. (2016).
This video describes the taste preference ...

Geschmackspräferenz Assay für Erwachsene

Zusammenfassung

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Kapitel in diesem Video

Appetitive Assoziative olfaktorischen Lernens in

Ein Single-fly-Assay für Sammelverhalten in

Testen

Assay mit hohem Durchsatz Eiablage Präferenzen der einzelnen zu untersuchen

Ein einfacher Weg zu messen Veränderungen in Reward-seeking Verhalten verwenden

Die kapillare feeder Assay misst die Nahrungsaufnahme in

Ein schneller Food-Preference-Test in Drosophila

Fütterungstest: Erfassung der Fresspräferenzen bei Drosophila melanogaster

Temperaturgradienten-Assay: Eine Methode zum Testen der Temperaturpräferenz bei Drosophila-Larven

Geschmackspräferenz-Assay: Eine Methode zur Messung des Fressverhaltens bei Drosophila