يمكن أن تساعد هذه الطريقة في الإجابة على الأسئلة الرئيسية في مجال التجديد، مثل كيفية تقدم تجديد القلب بعد إصابة عضلة القلب. الميزة الرئيسية لهذه التقنية هو أنه يوفر عالية الدقة، غير الباضع، وتقييم تكرار وظيفة القلب في axolotl. بالإضافة إلى ذلك، يمكن تطبيق هذه الطريقة أيضا على الكائنات الأخرى نموذج البرمائيات، مثل نوتس وxenopus.
تبدأ مع وضع أكسولوتيل تخدير supine في سرير على شكل شفة. عندما يتم إضافة الوسيط ، سوف يطفو الحيوان ، لذلك يجب تأمينه مع أشرطة مطاطية فضفاضة. بعد ذلك ، املأ السرير بمخدرات متوسطة تحتوي على حجم كبير بحيث يكون الصدر من ثلاثة إلى خمسة ملليمترات.
إذا كان فقط باستخدام وضع B، وضع دوبلر اللون، والبيانات دوبلر نبض الموجة، ثم axolotl يمكن أن يكون في حالة تأهب لهذا الإجراء. في هذه الحالة، ضع الحيوان عرضة في أرجوحة، واتركه يتعافى من الإجهاد لمدة 30 إلى 60 دقيقة قبل المتابعة. للحيوانات البيضاء أو المهق، يكون مصدر الضوء البارد على استعداد للمساعدة في وضع محول.
بالنسبة لمحول، استخدم إما نموذج 40 أو 50 هرتز اعتمادًا على كتلة الحيوان. ثم، إعداد هلام الموجات فوق الصوتية محول، والمضي قدما في جمع البيانات. تبدأ مع تحديد المواقع محول الموجات فوق الصوتية على خط الوسط من الحيوان في المنطقة الصدرية، وبالتوازي مع محورها الطويل.
يجب أن يظهر جزء صغير من البطين ، متمركز إلى اليمين في تجويف الصدر ، في الإطار في الغشاء البطيني. وينبغي أيضا أن يكون جزء كبير من الأذينين مرئية، كما ينبغي فينوس الجيوب الأنفية. يجب أن تكون هذه الهياكل قابلة للتحديد في طريقة العرض diastole أو systole.
بعد ذلك، ترجمة محول واحد إلى ثلاثة ملليمترات إلى اليمين، للحصول على عرض محور طويل البطين. في نهاية المطاف، يتم الوصول إلى الموضع الصحيح عندما تكون المنطقة المقطعية العرضية من البطين النهائي في أقصى حد لها. إن قياسات الموجات فوق الصوتية 2D الصحيحة تعتمد بشكل كبير على تحديد الموضع الصحيح للمحول.
ممارسة وضع محول بدقة وإجراء تحليل بين المشغلين لتقليل الذاتية. الآن، في وضع B، الحصول على ما لا يقل عن ثلاث دورات القلب في الحد الأدنى من 50 لقطة في الثانية الواحدة. اختر بين استخدام وضع التصوير العام أو وضع أمراض القلب.
بعد ذلك ، قم بترجمة محول على طول المحور الطويل للحيوان حتى يكون وسط البطين في منتصف الشاشة. ثم قم بتدوير محول 90 درجة باتجاه عقارب الساعة للحصول على عرض المحور القصير منتصف البطينية. من هذا الموقف ، تقييم الشكل الدائري للبطين عن طريق ترجمة محول على طول محور طويل من القلب.
ثم، قم بإرجاع محول إلى مستوى المحور الطويل، وترجمته مرة أخرى نحو خط الوسط للحصول على عرض الأذيني طويل المحور بغرفتين. ويتحقق الموقف الصحيح عندما المناطق المقطعية العرضية من atria نهاية systole في أقصى درجاتها، واثنين من الأذينين معا تفترض الخطوط العريضة لعدد ثمانية عندما يميل حوالي 45 درجة إلى اليسار. ثم، جمع الصور وضع B.
للمتابعة، قم بترجمة محول إلى اليمين حتى يظهر مسار التدفق. إن عرض نهاية البطين يكون صحيحاً عندما يكون قطر التدفق في أكبر حجم له ، وعندما يكون اثنان من صمامات نصف الأعمدة ، عند مدخل التدفق ، مرئيين أثناء الحقن المتوسط. من هذا الرأي، يمكن إجراء قياسات السرعة والتدفق باستخدام التصوير دوبلر.
تطبيق وضع دوبلر اللون لتحديد سرعات تدفق الدم في الخارج خلال حقن القلب. بعد ذلك، قم بتطبيق التصوير بالألوان دوبلر والتصوير دوبلر الطاقة لتصور تدفق الدم في عرض البطين، ونفعل الشيء نفسه في عرض الأذيني. بعد ذلك ، استخدم وضع دوبلر اللون الموجهة إلى موقع السرعة القصوى للدم في المسالك الخارجة التي تعمل مباشرة نحو محول الطاقة.
عندما لا يكون التدفق متعامدًا تمامًا على محول المحول ، قم بتطبيق زاوية شعاع وتصحيح زاوي لتصحيح الصورة بنسبة تصل إلى 45 درجة. بعد ذلك، جمع بيانات وقت السرعة في وضع دوبلر موجة النبض. خلال أي مرحلة من دورة القلب ينبغي أن صمام دوامة تتداخل وجهة نظر التدفق.
جمع البيانات من ثلاث دورات قلبية على الأقل. ثم، دون تحريك محول، الحصول على البيانات في وضع B من ثلاث دورات القلب على الأقل. بعد ذلك ، للحيوانات المهذبة فقط ، قم بتدوير الحيوان 90 درجة بحيث يواجه الجزء الأيمن من الحيوان صعودًا ، ونقل المحول إلى منظر شبه جيلوميل مائل ، فقط متوازي ومؤخرًا للخياشيم البارزة.
يقدم هذا الرأي قياسًا بديلًا لسرعة تدفق الدم في المسالك الخارجة. وينبغي أن يكون مسار تدفق تشغيلها إلى أسفل في حوالي 45 درجة، وينبغي أن تظهر الأذين تحت المسالك الخارج أثناء الحقن. وأخيرا، التحول إلى وضع دوبلر نبض الموجة ووضع محول لعرض سرعة الدم القصوى الركض بعيدا عن محول في المسالك الخارجة.
حسب الحاجة، استخدم ما يصل إلى 45 درجة من زاوية الحزمة والتصحيح الزاوي لجعل التدفق عمودي على محول. ثم، جمع البيانات في وضع دوبلر نبض الموجة وفي وضع B من نفس الوضع كما كان من قبل. يستغرق اكتساب ثلاثي الأبعاد بعض الوقت ، لذلك يجب تخدير axolotl.
ضعه في سرير على شكل شفاه. تأمينه مع العصابات المطاطية، وغمر سطحه الصدري في ثلاثة إلى خمسة ملليمترات من الموجات فوق الصوتية المتوسطة التي تحتوي على مخدر. وتضر التحركات أثناء عملية الاستحواذ ثلاثية الأبعاد بإعادة الإعمار اللاحقة.
إذا تحرك الحيوان أثناء اكتساب الموجات فوق الصوتية ثلاثية الأبعاد، يجب تكرار الإجراء من البداية. بعد ذلك، ضع المحول فوق خط الوسط في المنطقة الصدرية، وضعه بالتوازي مع المحور الطويل للتسجيل ثلاثي الأبعاد القوسي، أو متعامد إلى المحور الطويل للتسجيل ثلاثي الأبعاد. ثم، ترجمة محول لضمان أن يحصل تغطية المنطقة القلب بأكملها في التقاط 3D اللاحقة.
تحريكه في كل من البعد داخل الطائرة وفي البعد خارج المستوى. بالنسبة إلى وضع التصوير، إذا كان معدل ضربات قلب الحيوان يتراوح بين 20 و60 نبضة في الدقيقة، حدد وضع التصوير العام. وإلا، اختر وضع أمراض القلب.
أطفئ الضوء الآن ، في صورة B-وضع الخام، وضبط مكاسب 2D إلى مستوى حيث الهياكل التشريحية بالكاد يمكن التعرف عليها. وهذا سيزيد من نسبة الإشارة إلى الضوضاء في عمليات إعادة البناء النهائية.
ثم، حدد حجم سُمك الخطوة Z أو شريحة. الآن، ترجمة محول واحد Z خطوة في وقت واحد، مع تسجيل يحتوي على 1،000 الإطارات في كل خطوة Z حتى تم تغطية منطقة القلب بأكملها. تم إجراء تحليل صدى القلب 2D من axolotl 10 غرام، 10 سم باستخدام تقنية وصفها.
وقدمت طريقة العرض ذات المحور الطويل نقطة بداية جيدة. وأظهرت الطائرة خط الوسط فينوس الجيوب الأنفية، الأذينية، وأجزاء من البطين. عرض الطائرة البطين أظهرت البطين أن تكون كروية و trabeculated للغاية.
في الطائرة الأذينية، بدا الأذين أكثر عدم انتظام وبالكاد trabeculated. مركز المسالك الخارجة قريب من مركز البطين. قياسات دورة القلب باستخدام نبض موجة دوبلر من محور طويل ومن الطائرة شبه جيل منحرف كان بعض الضوضاء الخلفية.
وكان يمكن التغلب على هذا الضجيج عند إجراء قياسات للسرعة الوقت المتكامل. أظهر تصوير Color-Doppler وPower-Doppler نمط التدفق من خلال غرف القلب. وكانت الآراء ممكنة من البطين، من الأذين، ومن المسالك الخارجة.
كما تم إجراء تخطيط صدى 3D. هذه الرؤية متعددة الكواكب للقلب لها العديد من الاستخدامات، مثل إعادة البناء السطحية والحجمية، أو تجزئة وتوليد نماذج ثلاثية الأبعاد. بعد مشاهدة هذا الفيديو، يجب أن يكون لديك فهم جيد لكيفية تنفيذ 2D و 3D صدى القلب في axolotl.
مرة واحدة يتقن، يمكن أن يتم تقنية الموجات فوق الصوتية 2D في أقل من خمس دقائق لكل حيوان، إذا تم تنفيذها بشكل صحيح، في حين أن اكتساب 3D يمكن أن يستغرق ما يصل إلى ساعة لكل. بعد هذا الإجراء، يمكن تنفيذ طرق أخرى مثل استخراج القلب وعلم الأنسجة من أجل الإجابة على أسئلة إضافية تتعلق بنية القلب والتشريح.
