此方法可以帮助回答再生领域的关键问题,例如心肌损伤后心脏再生如何进展。该技术的主要优点是,它提供了高分辨率,非侵入性,和可重复评估的心脏功能在轴。此外,此方法也适用于其他两栖动物模型生物体,如纽特和异种动物。
从在唇形动物床上放置麻醉斧头开始。当介质被添加时,动物将漂浮,因此它必须用松动的橡皮筋固定。接下来,用含有麻醉剂的介质填充床,使胸部深三到五毫米。
如果仅使用 B 模式、彩色多普勒模式和脉冲波多普勒模式数据,则轴对此过程可以发出警报。在这种情况下,将动物容易放置在吊床上,让它从压力中恢复30至60分钟,然后继续。对于白色或白化病动物,请准备好一个冷光源来帮助放置传感器。
对于传感器,根据动物的质量使用 40 或 50 赫兹模型。然后,准备传感器超声波凝胶,然后继续收集数据。从将超声波传感器定位在胸腔区域动物的中线上,并平行于其长轴开始。
心室的一小部分,位于胸腔的右侧,应出现在心室隔膜的框架内。两者中的很大一部分也应该是可见的,鼻窦也应该是可见的。这些结构应在硅藻或西斯托视图中可识别。
接下来,将传感器向右侧翻译一至三毫米,以获得心室长轴视图。最终,当端囊心室的横截面面积达到最大值时,将实现正确的位置。正确的 2D 超声波测量高度依赖于传感器的正确定位。
仔细执行传感器放置,执行操作员间分析,以尽量减少主观性。现在,在 B 模式下,至少获得三个心脏循环,每秒至少 50 帧。在使用常规成像模式还是心脏病学模式之间进行选择。
接下来,沿动物的长轴翻译传感器,直到心室的中心位于屏幕中间。然后,顺时针旋转传感器 90 度,以获得中轴短轴视图。在此位置,通过沿心脏的长轴转换传感器来评估心室的圆形。
然后,将传感器返回长轴平面,并将其转换回中线,以获得心房长轴双腔视图。当端三角的横截面区域处于最大值时,将实现正确的位置,当向左倾斜约 45 度时,两个 atria 组合假定数字 8 的轮廓。然后,收集 B 模式图像。
要继续,请将传感器转换到右侧,直到流出道出现。当流出的直径最大时,当中注入时,在流出入口处可以看到两个半发光阀时,心室端轮视图是正确的。从这个角度看,可以使用多普勒成像进行速度和流量测量。
应用彩色多普勒模式,在心脏注射过程中绘制流出道中血流速度。接下来,应用彩色多普勒成像和功率多普勒成像,以可视化心室视图中的血流,并在心房视图中进行相同的测量。接下来,使用颜色多普勒模式,指向直接向传感器运行的流出道中最大血速的位置。
当流出不完全垂直于传感器时,应用光束角度和角度校正以校正图像高达 45 度。接下来,在脉冲波多普勒模式下收集速度时数据。在心脏循环的不相位期间,如果螺旋阀与流出视图重叠。
从至少三个心脏周期收集数据。然后,在不移动传感器的情况下,从至少三个心脏循环获取 B 模式下的数据。接下来,仅针对麻醉动物,将动物旋转 90 度,使动物的右侧朝上,将传感器移动到倾斜的副刺视图,只是平行和后部突出的刺。
此视图提供了流出区血流速度的替代测量。流出道应向下运行约 45 度,并在注射过程中出现在流出道下。最后,切换到脉冲波多普勒模式并定位传感器以查看流出的传感器的最大血速。
根据需要,使用高达 45 度的光束角度和角度校正,使流出垂直于传感器。然后,在脉冲波多普勒模式和B模式下从与以前相同的位置收集数据。3D 采集需要一段时间,因此必须麻醉斧头。
把它放在唇形动物床上。用橡皮筋固定它,并在含有麻醉剂的三到五毫米超声波介质中淹没胸面。3D 采集期间的移动不利于后续的重建。
如果动物在 3D 超声波采集过程中移动,则必须从头开始重复该过程。接下来,将传感器放在胸腔区域的中线上,并放置传感器与长轴平行进行 sagittal 3D 记录,或与长轴正交,用于横向 3D 记录。然后,转换传感器,以确保整个心脏区域在随后的 3D 捕获中覆盖。
在平面中尺寸和平面外维度中移动它。对于成像模式,如果动物的心率在每分钟 20 到 60 次之间,请选择常规成像模式。否则,请选择心脏病学模式。
关灯。现在,在原始 B 模式图像中,将 2D 增益调整到解剖结构几乎无法识别的级别。这将在最后重建中提高信噪比。
然后,确定 Z 步进或切片厚度的大小。现在,一次翻译一个Z步,在每个Z步进中录制包含1000帧,直到整个心脏区域被覆盖。使用所述技术对10克、10厘米轴的2D超声心动图分析。
长轴视图提供了一个良好的起点。中线平面显示鼻窦、鼻孔和心室的一部分。观察心室平面,显示心室是球形的,高度拉克拉。
在心房平面上,阿特拉出现更不规则,几乎没有颤动。流出道的中心靠近心室的中心。使用长轴和斜式副刺平面的脉冲波多普勒测量心脏周期有一些背景噪声。
在测量速度时间积分时,这种噪声是可克服的。彩色多普勒和功率多普勒成像显示流模式通过心脏室。从心室、腹水室和流出区可以查看。
还进行了三D超声心动图。这种心脏的多平面视图有许多用途,例如表面和体积重建,或分割和生成 3D 模型。看完此视频后,您应该对如何在轴托执行 2D 和 3D 超声心动图有一个很好的了解。
一旦掌握,2D超声波技术可以在不到五分钟,每个动物,如果它执行得当,而3D采集可能需要长达一个小时的每只动物。按照这个程序,其他方法,如心脏提取和组织学可以执行,以回答与心脏结构和解剖学有关的其他问题。