Bu yöntem, miyokardiyal yaralanma sonrasında kardiyak rejenerasyonun nasıl ilerlediği gibi rejeneratif alandaki anahtar soruların yanıtlatımına yardımcı olabilir. Bu tekniğin en büyük avantajı axolotl kardiyak fonksiyon yüksek çözünürlük, noninvaziv ve tekrarlanabilir değerlendirme sağlar. Ayrıca, bu yöntem de newts ve kenopus gibi diğer amfibi model organizmalar, uygulanabilir.
Dudak şeklindeki bir hayvan yatağında anestezik axolotl supine konumlandırma ile başlayın. Orta eklendiğinde, hayvan yüzer, bu yüzden gevşek lastik bantlar ile güvenli olmalıdır. Daha sonra, toraks 3-5 milimetre derinliğinde olacak şekilde anestezi içeren orta ile yatak doldurun.
Sadece B-modu, renk-Doppler modu ve darbe dalgası Doppler modu verileri kullanıyorsanız, aksiyolbu yordam için uyarı olabilir. Bu durumda, bir hamakta eğilimli hayvan pozisyon ve devam etmeden önce 30 ila 60 dakika boyunca stresten kurtarmak sağlar. Beyaz veya albino hayvanlar için, transdüser yer yardımcı olmak için hazır bir soğuk ışık kaynağı var.
Bir dönüştürücü için, hayvanın kütlesine bağlı olarak 40 veya 50-hertz modeli kullanın. Sonra, transdüser ultrason jel hazırlamak ve veri toplama ile devam edin. Ultrason transdüserini torasik bölgede bulunan ve uzun eksenine paralel olarak hayvanın orta çizgisine konumlandırmaya başlayın.
Ventrikül küçük bir kısmı, torasik kavite sağa konumlandırılmış, ventriküler diastole de çerçeve içinde görünmelidir. Sinüs venöz gibi her iki atria büyük bir kısmı da görünür olmalıdır. Bu yapılar diastole veya systole görünümünde tanımlanabilir olmalıdır.
Sonra, ventriküler uzun eksenli görünümü elde etmek için transdüseri 1-3 milimetre sağa çevirin. Sonuç olarak, son systole ventrikül kesit alanı maksimum olduğunda doğru konuma ulaşılır. Doğru 2D ultrason ölçümleri transdüserin doğru konumlandırılmasına son derece bağlıdır.
Transdüser yerleşimini titizlikle uygulayın ve öznelliği en aza indirmek için operatörler arası analiz yapın. Şimdi, B modunda, saniyede en az 50 kare en az üç kardiyak döngüleri elde. Genel görüntüleme modunu veya kardiyoloji modunu kullanma arasında seçim yapın.
Daha sonra, ventrikül merkezi ekranın ortasında olana kadar hayvanın uzun ekseni boyunca dönüştürücü çevirin. Daha sonra, orta ventriküler kısa eksenli görünümü elde etmek için transdüser 90 derece saat yönünde döndürün. Bu konumdan, kalbin uzun ekseni boyunca transdüser çevirerek ventrikül dairesel şeklini değerlendirmek.
Daha sonra dönüştürücünün uzun eksen düzlemine döndürülmesi ve atriyal uzun eksenli iki bölmeli bir görünüm elde etmek için orta hatta geri çevirin. Doğru pozisyon, son systole atrianın kesit alanları maksatlarında olduğunda elde edilir ve iki atria birleşince sola doğru 45 derece eğildiğinde sekiz rakamının ana hatlarını üstlenir. Ardından, B modu görüntüleri toplayın.
Devam etmek için, çıkış yolu görünene kadar dönüştürücü sağa çevirin. Ventriküler uç systole görünümü, çıkış çapı en büyük olduğunda doğrudur ve orta enjeksiyon sırasında, yarı luminar vanalardan ikisi, çıkış girişinde görünür olduğunda. Bu görünümden, hız ve akış ölçümleri Doppler görüntüleme kullanılarak yapılabilir.
Kardiyak enjeksiyon sırasında çıkış yollarında kan akışı hızları haritalamak için renk-Doppler modunu uygulayın. Daha sonra, ventriküler görünümde kan akışını görselleştirmek için renk-Doppler görüntüleme ve güç-Doppler görüntüleme uygulayın ve atriyal görünümde aynı şeyi. Daha sonra, doğrudan transdüser doğru çalışan çıkış yolu maksimum kan hızı konumuna yönelik renk-Doppler modu kullanın.
Çıkış transdüser tamamen dik olmadığında, 45 dereceye kadar görüntü düzeltmek için bir ışın açısı ve açısal düzeltme uygulayın. Ardından, darbe dalgası Doppler modunda hız-zaman verilerini toplayın. Kardiyak döngünün hiçbir fazı sırasında spiral kapak çıkış görünümü örtüşmelidir.
En az üç kardiyak döngüden veri toplayın. Daha sonra, transdüseri hareket ettirmeden, en az üç kardiyak döngüden B modunda veri elde edin. Daha sonra, sadece anesteziye sahip hayvanlar için, hayvanı 90 derece döndürün, böylece hayvanın sağ kısmı yukarı bakacak ve transdüseri eğik para-gill görünümüne, sadece paralel ve çıkıntılı solungaçlara doğru hareket ettirin.
Bu görünüm, çıkış yollarında kan akışı hızıalternatif bir ölçüm sunuyor. Çıkış yolu yaklaşık 45 derece aşağı doğru çalışıyor olmalı, ve atria enjeksiyon sırasında çıkış yolu altında görünmelidir. Son olarak, darbe dalgası Doppler moduna geçin ve transdüseri, çıkış sistemindeki transdüserden kaçan maksimum kan hızını görmek için konumlandırın.
Gerektiğinde, transdüsere dik çıkış yapmak için 45 dereceye kadar ışın açısı ve açısal düzeltme kullanın. Daha sonra, darbe dalgası Doppler modunda ve B modunda daha önce olduğu gibi aynı konumdan veri toplamak. 3D edinimi biraz zaman alır, bu yüzden axolotl anestezi olmalıdır.
Dudak şeklindeki hayvan yatağına supine yerleştirin. Kauçuk bantlarla sabitle ve göğüs yüzeyini 3-5 milimetrelik ultrason ortamına batırın. 3D edinim sırasında ki hareketler sonraki yeniden yapılandırmaya zarar verir.
Hayvan 3D ultrason alımı sırasında hareket ederse, işlem baştan tekrarlanmalıdır. Daha sonra, transdüseri torasik bölgede orta çizgiüzerinde yerleştirin ve sagittal 3D kayıt için uzun eksene paralel olarak yerleştirin veya transversal 3D kayıt için uzun eksene ortogonal yerleştirin. Daha sonra, tüm kardiyak bölgenin sonraki 3D yakalama kaplı alır emin olmak için dönüştürücü çevirin.
Hem düzlem içi boyutta hem de düzlem dışı boyutta hareket ettirin. Görüntüleme modu için, eğer hayvanın kalp hızı dakikada 20 ile 60 arasındaysa, genel görüntüleme modunu seçin. Aksi takdirde, kardiyoloji modunu seçin.
Işığı kapat. Şimdi, ham B-modu görüntüde, 2B kazancı anatomik yapıların zar zor tanınabilir olduğu bir seviyeye ayarlayın. Bu son rekonstrüksiyonlarda sinyal-gürültü oranını artıracaktır.
Ardından, Z adımının veya dilim kalınlığının boyutuna karar verin. Şimdi, transdüserbir seferde bir Z-adım çevirin, tüm kardiyak bölge kapsanakadar her Z-adımda 1.000 kare içeren bir kayıt alarak. Açıklanan teknik kullanılarak 10 gram, 10 santimetre axolotl'un 2Boyutlu ekokardiyografik analizi yapıldı.
Uzun eksenli görünüm iyi bir başlangıç noktası sağladı. Orta hat düzleminde sinüs venöz, atria ve ventrikül parçaları saptandi. Ventrikül düzleminin görüntülenmesi ventrikülün küresel ve yüksek oranda trabeküle olduğunu gösterdi.
Atriyal düzlemde, atria daha düzensiz ve zar zor trabeculated ortaya çıktı. Çıkış yolu merkezi ventrikül merkezine yakındır. Uzun eksenden ve eğik para-solungaç düzleminden darbe dalgaDoppler kullanılarak kardiyak döngü ölçümleri bazı arka plan gürültüsü vardı.
Hız zaman integralinin ölçümlerini yaparken bu gürültü aşılabilirdi. Renk-Doppler ve güç-Doppler görüntüleme kalp odaları ile akış deseni gösterdi. Ventrikülden, atriyadan ve çıkış sisteminden manzaralar mümkün.
3D ekokardiyografi de yapıldı. Kalbin bu çok programlı görünümü, yüzey ve hacim rekonstrüksiyonları veya segmentasyon ve 3D modellerin üretimi gibi birçok kullanıma sahiptir. Bu videoyu izledikten sonra, axolotl 2D ve 3D ekokardiyografi gerçekleştirmek için nasıl iyi bir anlayışa sahip olmalıdır.
Bir kez hakim, 2D ultrason tekniği hayvan başına beş dakikadan az yapılabilir, düzgün yapılırsa, 3D edinimi hayvan başına bir saat kadar sürebilir ise. Bu işlemden sonra kalp yapısı ve anatomi ile ilgili ek soruları cevaplamak için kalp ekstraksiyonu ve histoloji gibi diğer yöntemler de uygulanmaktadır.
