이 방법은 심근 손상 후 심장 재생이 어떻게 진행되는지와 같은 재생 분야의 주요 질문에 답하는 데 도움이 될 수 있습니다. 이 기술의 주요 장점은 축산에서 심장 기능의 고해상도, 비침습적 및 반복 가능한 평가를 제공한다는 것입니다. 또한,이 방법은 또한 뉴트 및 제노푸스와 같은 다른 양서류 모델 유기체에 적용 될 수있다.
먼저 마취액의 액솔로틀 수핀을 립 모양의 동물 침대에 배치합니다. 매체가 추가되면 동물이 떠다니므로 느슨한 고무 밴드로 고정해야합니다. 다음으로, 흉부가 3~5밀리미터 깊이가 되도록 마취제를 함유한 매체로 침대를 채웁니다.
B 모드, 컬러 도플러 모드 및 펄스 웨이브 도플러 모드 데이터만 사용하는 경우 axolotl은 이 절차에 대해 경고할 수 있습니다. 이 경우, 해먹에 걸리기 쉬운 동물을 배치하고 진행하기 전에 30~60분 동안 스트레스에서 회복하게 하십시오. 흰색 또는 알비노 동물의 경우 트랜스듀서를 배치하는 데 도움이 되는 차가운 광원이 준비되어 있습니다.
트랜스듀서의 경우 동물의 질량에 따라 40-또는 50 헤르츠 모델을 사용하십시오. 이어서, 트랜스듀서 초음파 젤을 준비하고, 데이터 수집을 진행한다. 흉부 부위의 동물의 중간선에 초음파 트랜스듀서를 배치하고 긴 축과 평행하게 배치합니다.
흉부 구멍의 오른쪽에 위치한 심실의 작은 부분은 심실 성 나막소에 프레임에 나타나야합니다. 부비동 독소와 마찬가지로 두 아리아의 상당 부분을 볼 수 있어야 합니다. 이러한 구조는 디아스톨 또는 슬로핀 뷰에서 식별할 수 있어야 합니다.
다음으로 트랜스듀서를 오른쪽으로 1~3밀리미터 변환하여 심실 긴 축 뷰를 얻습니다. 궁극적으로, 최종 시스톨 심실의 단면 영역이 최대일 때 올바른 위치를 달성하게 됩니다. 올바른 2D 초음파 측정은 트랜스듀서의 올바른 위치 지정에 매우 의존합니다.
트랜스듀서 배치를 꼼꼼하게 연습하고 작업자 간 분석을 수행하여 주관성을 최소화합니다. 이제 B 모드에서는 초당 최소 50프레임의 최소 3개의 심장 주기를 획득합니다. 일반 이미징 모드 또는 심장 학 모드를 사용 하 여 중선택.
다음으로, 심실의 중심이 화면 중앙에 도달할 때까지 동물의 긴 축을 따라 트랜스듀서를 변환합니다. 그런 다음 중간 원반 단축 뷰를 얻기 위해 트랜스듀서를 시계 방향으로 90도 회전합니다. 이 위치에서 심실의 원형 모양을 심장의 긴 축을 따라 변환기를 변환하여 평가합니다.
그런 다음 트랜스듀서를 긴 축 평면으로 돌려보내 서심 장축 2챔버 뷰를 얻기 위해 중간선쪽으로 다시 변환합니다. 올바른 위치는 엔드 시스톨 아리아의 단면 영역이 최대전에 있을 때 달성되며, 두 개의 아드리아는 왼쪽으로 약 45도 기울어질 때 8번의 윤곽을 가정합니다. 그런 다음 B 모드 이미지를 수집합니다.
계속하려면 유출로가 나타날 때까지 트랜스듀서를 오른쪽으로 변환합니다. 심실 단부 뷰는 유출의 직경이 가장 크고 중간 주입 중에 유출 입구에 있는 두 개의 반루미나 밸브가 보일 때 정확합니다. 이 보기에서 도플러 이미징을 사용하여 속도 및 유량 측정을 수행할 수 있습니다.
컬러 도플러 모드를 적용하여 심장 주사 중 유출로의 혈류 속도를 매핑합니다. 다음으로, 색 도플러 이미징 및 파워 도플러 이미징을 적용하여 심실 시야의 혈류를 시각화하고 심방 시야에서도 동일한 작업을 수행합니다. 다음으로, 트랜스듀서를 향해 직접 달리는 유출로에서 최대 혈액 속도의 위치를 향한 컬러 도플러 모드를 사용합니다.
유출이 트랜스듀서에 완전히 수직이 아닌 경우 빔 각도와 각도 보정을 적용하여 이미지를 최대 45도까지 수정합니다. 다음으로 펄스 웨이브 도플러 모드에서 속도 시간 데이터를 수집합니다. 심장 사이클의 어떤 단계에서나선형 판막이 유출의 시야를 겹쳐야 합니다.
적어도 세 번의 심장 주기에서 데이터를 수집합니다. 그런 다음 트랜스듀서를 이동하지 않고 적어도 세 번의 심장 주기에서 B 모드에서 데이터를 수집합니다. 다음으로, 마취동물의 경우 동물의 오른쪽 부분이 위쪽으로 향하도록 동물을 90도 회전시키고, 트랜스듀서를 경사 파라 아가미 뷰로 이동하여 평행하고 뒤쪽으로 돌출된 아가미로 이동합니다.
이 보기는 유출로의 혈류 속도의 대체 측정을 제공합니다. 유출 지역은 약 45도에서 아래쪽으로 실행되어야하며, 주사 하는 동안 유출 지역 아래에 atria 표시 되어야 한다. 마지막으로, 펄스 웨이브 도플러 모드로 전환하고 트랜스듀서를 배치하여 유출로 인한 트랜스듀서에서 도망가는 최대 혈액 속도를 볼 수 있습니다.
필요에 따라 최대 45도의 빔 각도와 각 교정을 사용하여 트랜스듀서에 수직으로 유출할 수 있습니다. 그런 다음 펄스 웨이브 도플러 모드와 B 모드에서 이전과 동일한 위치에서 데이터를 수집합니다. 3D 획득에는 시간이 걸리므로 액졸로틀은 마취되어야 합니다.
입술 모양의 동물 침대에 침을 구하십시오. 고무 밴드로 고정하고 마취제를 함유한 초음파 배지의 3~5밀리미터에 흉부 표면을 침수합니다. 3D 인수 시 의 움직임은 후속 재건에 해롭습니다.
동물이 3D 초음파 획득 중에 이동하는 경우, 절차는 처음부터 반복해야합니다. 다음으로, 흉부 부위의 미드라인 위에 트랜스듀서를 배치하고, 경사진 3D 레코딩을 위해 긴 축과 평행하게 배치하거나, 직교를 트랜스베르사 3D 레코딩을 위한 긴 축으로 배치한다. 그런 다음 트랜스듀서를 번역하여 전체 심장 영역이 후속 3D 캡처에서 덮여 있는지 확인합니다.
평면 내 치수와 평면 치수 모두에서 이동합니다. 이미징 모드의 경우 동물의 심박수가 분당 20~60회 사이인 경우 일반 이미징 모드를 선택합니다. 그렇지 않으면 심장 모드를 선택하십시오.
빛을 끕니다. 이제 원시 B 모드 이미지에서 2D 게인을 해부학 적 구조가 거의 인식 할 수없는 수준으로 조정합니다. 이렇게 하면 최종 재구성에서 신호 대 잡음 비율이 증가합니다.
그런 다음 Z 단계 또는 슬라이스 두께의 크기를 결정합니다. 이제 트랜스듀서를 한 번에 하나의 Z 단계를 변환하여 각 Z 단계에서 1, 000 프레임을 포함하는 레코딩을 통해 전체 심장 영역이 커버될 때까지 합니다. 10그램, 10센티미터 축소로텔의 2D 심초음파 분석은 기술된 기술을 사용하여 수행하였다.
긴 축 뷰는 좋은 시작점을 제공했습니다. 중간선 비행기는 부비동 독서, 아리아, 그리고 심실의 일부를 보여 주었다. 심실 평면을 보는 것은 구형및 높게 궤양되는 심실을 보여주었습니다.
심방 비행기에서, 아리아는 더 불규칙하고 간신히 트래커드 나타났다. 유출로의 중심은 심실의 중심에 가깝습니다. 긴 축과 경사 파라 길 평면에서 펄스 파 도플러를 사용하여 심장 주기의 측정은 몇 가지 배경 소음이 있었다.
이 소음은 속도 시간을 일체화할 때 극복할 수 있었습니다. 컬러 도플러와 파워 도플러 이미징은 심장 챔버를 통해 흐름 패턴을 보였다. 심실, 아리아, 유출장에서 의 전경을 조망할 수 있었습니다.
3D 에코카르디그래피도 수행되었다. 심장의 이 다중 평면 뷰는 표면 및 볼륨 재구성, 세분화 및 3D 모델 생성과 같은 많은 용도를 가지고 있습니다. 이 비디오를 시청한 후에는 축소로틀에서 2D 및 3D 에코카르디그래피를 수행하는 방법에 대해 잘 이해해야 합니다.
일단 마스터되면, 2D 초음파 기술은 동물이 제대로 수행되는 반면, 동물 당 5 분 이내에 수행 할 수 있지만 3D 획득은 동물 당 최대 1 시간이 걸릴 수 있습니다. 이 절차에 따라 심장 추출 및 심술학과 같은 다른 방법은 심장 구조 및 해부학과 관련된 추가 질문에 대답하기 위해 수행 될 수 있습니다.
