العلاج المناعي جنبا إلى جنب مع العلاج الكيميائي يمثل نهجا مبتكرا لتطوير العلاج الفعال في السرطان. وتتمثل الأهداف الرئيسية في تحقيق التآزر، والآثار العلاجية، والجرعة والحد من السمية، والتقليل من أو تأخير تحريض مقاومة الأدوية. ومع ذلك ، لأسباب عملية وأخلاقية ، فإنه ليس من الممكن تحديد التآزر في المرضى. وهكذا، قبل الجمع المباشر في التجارب السريرية، وينبغي إجراء الدراسات تركيبة برينيكابتور، في المختبر، و / أو في الحيوانات، من أجل الحصول على الأساس المنطقي للدراسات السريرية. وتستند طريقة بسيطة قوية للكمية التآزر بين المخدرات على الجمع بين معادلة مؤشر وضعتها شول شوان، كما هو موضح في هذا الفيديو. باستخدام هذه الطريقة، ومحاكاة المحوسبة، ونحن نبين هنا، التآزر بين الأجسام المضادة أحادية النسيلة 8B6، وهو محدد لO-أسيتيل-GD2 Antidlioside العصبية الأرومية والدواء العلاج الكيميائي توبوتيكان على خلايا الورم الأرومي العصبي. وباختصار، بعد تحديد الجرعة الفعالة 50 قيم لكل مركب في المنظمة البحرية الدولية البشرية، 5 خط الخلايا الأرومية العصبية، تم تنبيب هذه الخلايا بنسب عادلة من المركبين، وتم حساب قيم الفهرسة المركبة باستخدام المحاكاة الحاسوبية الآلية. وأكدنا بعد ذلك هذه النتائج في Vivo، في المنظمة البحرية الدولية، 5 ورم xenographed نموذج. لقد قمنا بـ نمو خلايا IMR-5 في قارورة T75 ، ولاحظناها تحت المجهر ، للتحقق من التقاء الخلايا. اسبيريت خلية المتوسطة من القارورة، وغسل مع 5 مل من برنامج تلفزيوني. إضافة 3 مل من 0.05٪ EDTA / برنامج تلفزيوني حل. إعادة القارورة إلى الحاضنة لمدة 3 دقائق. فحص خلية ثقافة تحت مجهر لخلية مفرزة. إضافة 10 مل من خلية كاملة المتوسطة إلى القارورة، ونقل تعليق الخلية إلى أنبوب مخروطي معقم، 15 مل. جهاز طرد مركزي لمدة خمس دقائق في 300 g.Count الخلايا باستخدام قياس الهيموسيت. إزالة وتجاهل ناظر. إعادة تعليق الخلايا في في متوسطة النمو الكامل.ضبط حجم متوسط للحصول على تركيز نهائي من 100، 000 الخلايا/mL.Seed 84 آبار، 96 لوحة ثقافة جيدا مع 10،000 خلية لكل منهما، وهو 100 ميكرولترات من تعليق الخلية. احتضان الخلايا لمدة 18 ساعة في خلية Incubator.Dilute الأجسام المضادة أحادية النسيلة في 500 ميكرولترات من كامل متوسط النمو للحصول على حل عمل الأجسام المضادة مع تركيز الأجسام المضادة أحادية النسيلة 240 ميكرو غرام لكل mL.perform 5 الأوهام التسلسلية ذات شقين كما هو مبين في البروتوكول. تمييع الدواء في 500 ميكرولترات من كامل متوسطة النمو للحصول على حل عمل المخدرات مع التركيز النهائي 120 نانومولار. تنفيذ 5، الأوهام التسلسلية ذات شقين كما هو مبين في البروتوكول. تمييع بنفس الطريقة الدواء بالإضافة إلى حلول الأجسام أحادية النسيلة. للوصول إلى التركيز النهائي، نقل 50 ميكرولترات من كل محلول دواء في الآبار المقابلة كما هو مبين في هذا التخطيط التجريبي. احتضان الخلايا لمدة 72 ساعة في الحاضنة. إضافة 10 ميكرولترات من محلول الكواشف MTT في كل بئر. احتضان في 37 درجة مئوية لمدة 4 ساعات. إضافة 100 ميكروليتر من محلول سيني في كل بئر باستخدام ماصة متعددة القنوات ومزيج دقيق عن طريق pipetting. احتضان في 37 درجة مئوية لمدة 4 ساعات في غرفة مرطبة. تخلص من الامتصاصات عند 570 و 620 نانومتر باستخدام مقياس طيفي. حساب صلاحية الخلية كما يلي. حساب القيم المتأثرة بالكسر باستخدام المعادلة التالية. تشغيل برنامج المحاكاة، انقر على زر التجربة الجديدة للحصول على النافذة الرئيسية. اكتب اسم التجربة. انقر فوق دواء واحد جديد. اكتب الاسم. اكتب الاختصار. اكتب وحدة تركيز المخدرات. أدخل البيانات 1 الجرعة وقيمة FA. اضغط Enter.Repeat هذه الخطوة حتى يتم إدخال كافة نقاط البيانات. انقر فوق Finished.اتبع نفس الخطوات لإدخال نقاط بيانات الأجسام المضادة أحادية النسيلة. انقر فوق دواء جديد Combo.Select المخدرات والأجسام المضادة أحادية النسيلة. حدد نسبة ثابتة.انقر فوق موافق. اكتب الاسم. اكتب الاختصار. اكتب نسبة الأجسام المضادة أحادية النسيلة المخدرات. أدخل البيانات 1 الجرعة. اضغط Enter.The البرنامج سوف تلقائيا حساب جرعات من الأجسام المضادة أحادية النسيلة 8B6 والتحرير والسرد. أدخل قيمة FA للبيانات 1.اضغط Enter.Repeat هذه الخطوة حتى يتم إدخال كافة نقاط البيانات. انقر فوق Finished.Then، انقر فوق إنشاء Report.Select المخدرات والأجسام المضادة أحادية النسيلة ثم انقر فوق موافق. حدد التحرير والسرد، ثم انقر فوق موافق. حدد الرأس وجدول CI وجدول الملخص، ثم انقر فوق موافق. اكتب اسم الملف والتحليل وانقر فوق حفظ لإنشاء التقرير. يتم فتح التقرير تلقائيًا في مستعرض الويب الافتراضي. ويتضمن التقرير قسماً لجدول موجز يتضمن العنوان والتاريخ والاسم النهائي وملاحظة الوصف والمعلمات m وMM وr والجرعة الفعالة 50 لأي عامل يستخدم كالمعالجة الأحادية أو في تركيبة، وجدول الفهرس المختلط لكل تركيبة عند الجرعة الفعالة 50 و75 و90 و95.A قيمة مؤشر تركيبة أقل من 1 يشير إلى التآزر. تشير القيمة التي تساوي إلى القيمة المضافة. تشير القيمة الأكبر من 1 إلى العداء. ذوبان غشاء مصفوفة الطابق السفلي بين عشية وضحاها عن طريق غمر القارورة في الجليد في 4 درجات C الثلاجة قبل الاستخدام. يجب أن تكون جميع ملابس الثقافة ، أو وسائل الإعلام القادمة على اتصال مع مقياس غشاء الطابق السفلي prechilled. حصاد IMR5 الثقافة. نقل الخلايا إلى أنبوب مخروطي 15 مل والطرد المركزي في 300 غرام لمدة 5 دقائق. تجاهل المُندفع. غسل الخلايا مع 15 مل الجليد البارد PBS مرتين. إعداد تعليق الخلية ل5 ملايين خلية لكل مل في الجليد البارد PBS. نقل تعليق الخلية إلى 1.5 مل microtube. قطب غشاء مصفوفة مصفوفة الطابق السفلي. إضافة 1 حجم من مضمشف مصفوفة الغشاء الطابق السفلي، مختلطة من الأنابيب للحصول على تعليق الخلية من 2.5 مليون خلية في mL.Keep تعليق الخلية على الجليد. حلق الجناح من حيث سيتم حقن. مزيج الخلايا ورسم بعناية تعليق الخلية في حقنة 1 مل شنت مع إبرة 21 ز. تحقق للتأكد من عدم وجود فقاعات الهواء في الحقنة. تطهير منطقة التطعيم من الفئران مع محلول مطهر. اضغط بلطف على جلد الماوس على الجناح بين الأصابع في موقع الحقن. أدخل الإبرة في الجلد بالضبط. لا تضع الإبرة في عمق الأنسجة لضمان الحقن تحت الجلد. حقن 100 ميكرولترات من تعليق الخلية IMR5 تحت الجلد. تدوير حقنة لمنع انتشار السائل وسحب الإبرة. مراقبة الفئران لوزن الجسم ونمو الورم. قياس طول وعرض الورم مع العيار. حساب حجم الورم باستخدام هذه الصيغة. بدء العلاج عندما تصل الأورام إلى حجم متوسط من 50 إلى 60 ملم
