ويمكن أن يكون بروتوكولنا مفيدا في النظم والآلية. والمعلومات الصحيحة تبين تأثير الإجهاد البدني والتدليك. نظام إنجاز الدوري المحلي لدينا هو أكثر بساطة بكثير.
لا تتطلب الأساليب التقليدية الإدراج المحلي. تطبيق الشريط الجراحي على الأطراف الخلفية الثنائية في موقف supine مع مفاصل الركبة الموسعة والمفاصل الكاحل ينستعرض. ضع سلكًا من الألومنيوم على الجذع عند مستوى العمود الفقري L4-5 ، ولبّي السلك في تكوين حلزوني حول الأطراف الخلفية مع فجوات خمسة ملليمترات بين كل منعطف من الدوامة.
لتقليل إمكانية الهروب من الأسلاك ، وضبط تكوين الأسلاك يدويًا لشل مفاصل الورك في موقف 90 درجة من الاختطاف. ثم العودة إلى الماوس قفص المنزل انها مع رصد حتى الشفاء الكامل. لقياس ضغط العضلات المعدية العضلية وضع الماوس تخدير في موقف عرضة وحلق، depilate، وشبه تعقيم الجلد من العجل الخلفي.
استخدم مشرطًا لعمل شق مليمترين في الجلد المطهر. وأدخل إبرة 20 قياس indwelling في العضلات gastrocnemius في زاوية 150 إلى 170 درجة إلى سطح الجلد. بعد ذلك ، باستخدام الغماد البلاستيكي للإبرة كدليل ، ضع مستشعر قياس ضغط الدم في منتصف بطن عضلة المعدة.
أرفق الجلد بخياطة من النايلون 4-O. ثم، استخدم عدة أوزان وحدة أسطوانية مختلفة لتطبيق ضغط أسطواني محلي على عضلة ربلة الساق لمدة دقيقة واحدة. ومراقبة الضغط العضلي باستخدام البرنامج المناسب لتحليل الإشارة البيولوجية.
لعلاج ضغط الدورية المحلية فك الارتباط الماوس مخدر من الأسلاك الطرف الخلفي. ووضع الحيوان في موقف عرضة. ضبط الأطراف الخلفية بحيث يتم تمديد مفاصل الركبة ومفاصل الكاحل هي plantar مع العجول التي تواجه التصاعدي.
وتحريك عموديا وحدة الوزن أسطواني، مغطاة بلوحة خففت، على عضلة الساق في هرتز واحد لمدة 30 دقيقة في اليوم لمدة سبعة أيام. بعد كل نوبة من الضغط اليومي إعادة أسلاك أطراف الماوس الخلفية قبل العودة إلى الحيوان قفصها المنزل. في نهاية التجربة إزالة سطح العجل الخلفي وجعل شق الجلد للسماح بفصل عضلات المعدة من العظام النخاعية.
تجميد بسرعة الأنسجة العضلية المحصودة في حل مركب درجة حرارة القطع الأمثل. واستخدام التبريد للحصول على أقسام من عضلات gastrocnemius على الشرائح الزجاجية. للمناعة التحلل الكيميائية وضع العلامات وتجفيف المقاطع عن طريق تجفيف الهواء في درجة حرارة الغرفة قبل استخدام قلم مبيد للجهر لرسم حلقة حول أقسام الأنسجة على كل شريحة.
بعد ذلك، ضع الشرائح في غرفة الرطوبة. وإضافة 100 ميكرولتررس من العازلة سد إلى كل جانب. بعد 30 دقيقة في درجة حرارة الغرفة شطف الشرائح مع اثنين من غسل 5 دقائق في PBS-T، قبل وضع العلامات على الأقسام مع 100 ميكرولترات من الأجسام المضادة الأولية من الفائدة بين عشية وضحاها في درجة حرارة الغرفة.
في صباح اليوم التالي غسل الشرائح 3 مرات في PBS-T لمدة 5 دقائق لكل غسل. وتسمية العينات مع جسم مضاد الثانوية المناسبة لمدة 1 ساعة في درجة حرارة الغرفة، وحمايتها من الضوء. في نهاية الحضانة، وغسل الشرائح 3 مرات في برنامج تلفزيوني جديد-T كما هو موضح.
وصمة عار من النوى مع 100 ميكرولترات من DAPI لمدة ثلاث دقائق في درجة حرارة الغرفة في الظلام. ثم، غسل الشريحة ثلاث مرات أخرى. وجبل العينات مع وسيلة تركيب متوافقة وزلات الغطاء.
لتحليل قياس الهدسم، ضع الشرائح على خشبة المجهر المفلورة وعرض العينات تحت ذاتية 20-X في المرشحات المناسبة. ثم ، في برنامج تحليل الصور قياس منطقة المقطعية العرضية لكل myofiber ، وعدد من الخلايا التي تعبر عن علامات تجريبية من الفائدة. المنطقة المقطعية من gastrocnemius myofiber تناقصت بشكل ملحوظ عن طريق شل الأطراف الخلفية.
علاوة على ذلك، يكشف تحليل التلطيخ المناعي أن الخلايا التي تعبر عن MCP-1 و TNF-Alpha تزداد بشكل كبير في أنسجة العضلات المعدة للأمعاء من الأطراف الخلفية المُشلَّلة. معا، مع الزيادة في الخلايا الملطخة بشكل إيجابي مع F4/80، يبدو أن شل الأطراف الخلفية تحريض ضمور العضلات في ربلة الساق، التي تنطوي على الاستجابات الالتهابية المحلية، بما في ذلك تراكم الضامة. ومن بين مقادير الضغط الدوريات المحلية المختلفة العديدة التي تم اختبارها عن طريق تغيير وزن الوحدة الأسطوانية، يبدو أن الضغط المقابل لموجات الضغط العضلي بين العضلات 50 ملليلتراً للزئبق يخفف من حدة الانخفاض الناجم عن الجمود في منطقة المقطع المقطعية العرضية لميوفيبر وزيادة تراكم الضميم في عضلات المعدة.
ضغط 66 غرام المحلية الدورية, تطبيقها في 1 هرتز لمدة 30 دقيقة يوميا لمدة 7 أيام, يخفف بشكل كبير من انخفاض الشلل الملحوظ في منطقة المقطعية myofiber من عضلات الجهاز الهضمي. أكثر من ذلك، ضغط الدورية المحلية المزاج جزئيا شل تسبب انخفاض في القوة المتعاقدة من عضلات surae الثلاثية الرؤوس. بالإضافة إلى ذلك، ضغط الدورية المحلية يخفف من الزيادة في F4/80 إيجابية، TNF-ألفا إيجابية، وMCP-1 الخلايا الإيجابية واحدة في الأنسجة العضلية gastrocnemius من أطرافها الخلفية شل الحركة.
سوف يوفر نهجنا أساسًا علميًا لارتفاع العضلات في المريض واستراتيجيتنا المحتملة للإجراءات الوقائية. لقد وجد الجرذ أن الخمول الجسدي محدود باستخدام نظامنا، بدأنا في تقييم معظم المرضى الذين تفتقر العضلات إلى ميكانيكي في المريض.
طريقة صناعية محلية معتدلة للقيام بذلك يجعل من الكمال شل تسبب ضمور العضلات.
