وقد استخدمت على نطاق واسع الإدارة المزمنة من ايزوبروتينول عن طريق مضخة التناضح لتكميم التغيرات في فشل القلب المتقدم في الفئران. هذه الطريقة بسيطة وتتطلب خبرة جراحية أقل من النماذج الأخرى، مثل LAD وTAC. وسوف يكون إثبات الإجراء الدكتور فنسنت رين، وهو عالم أبحاث من مختبر الدكتور ييبين وانغ.
بعد وزن وتسجيل وزن الجسم لكل فأر، حساب الكمية المناسبة وتركيز ايزوبروترينول لكل حيوان، وحل الايزوبروترينول في 120 ميكرولترات من كلوريد الصوديوم 0.9٪ معقمة. مزيج دقيق لمدة دقيقة واحدة ل solubilize تماما isoproterenol، وتزن وتسجل وزن مضخة واحدة التناضح فارغة، جنبا إلى جنب مع وبدون تدفق مشرف لها، لكل فأرة. إرفاق 27 قياس، أنبوب ملء حادة الرؤوس المقدمة مع مضخات التناضح، وتحميل واحد، حقنة ملليلتر واحد مع 120 ميكرولترات من محلول ايزوبروترينول لكل فأرة.
عقد مضخة في وضع تستقيم، إدراج أنبوب التعبئة من خلال فتح المضخة في الجزء العلوي حتى غيض من أنبوب ملء يجلس بالقرب من الجزء السفلي من خزان مضخة، والاكتئاب ببطء المكبس حقنة حتى حل الايزوبروترينول يملأ لفتح مضخة. عندما تم تحميل المضخة، وإزالة أنبوب ملء بعناية، ومسح قبالة حل الزائدة. إدراج مرة أخرى مدير تدفق لإغلاق المضخة، ومسح أي حل الزائدة.
ثم reweigh المضخة للتأكد من أن أكثر من 90٪ من حجم الخزان قد تم ملؤها. ضع الفأر في موضعه الوبخ على وسادة ساخنة، وازيل الهواء من أسفل البطن. لزرع مضخة التناضح الجراحية، تأكد من عدم وجود استجابة لقرصة إصبع في الماوس المُقصّر، وتطبيق مرهم على عيون الحيوان.
تنظيف الجلد المكشوف مع مطهر مناسب، وجعل شق الجلد في منتصف السنتيمتر واحد. استخدام زوج من مقص حاد لتشريح بعناية الجلد من الجدران الصفاقية الكامنة، واستخدام ملقط لسحب الجدران البريتوني بعيدا عن الأمعاء الأساسية. استخدام مقص غرامة لقطع 0.8 سم حفرة في الجدار الصفاقي، وإدراج تدفق مضخة التناضح نهاية الأولى في تجويف البريتوني.
عندما المضخة في مكانها، واستخدام 5-0 خياطة قابلة للامتصاص بطريقة توقف لإغلاق ثقب في الجدار البريتوني، واستخدام 6-0 الغرز غير قابل للامتصاص لإغلاق الجلد. ثم ضع الفأر في حاضنة مخصصة مع المراقبة حتى إعادة شغل كامل قبل إعادة الحيوان إلى قفصه المنزلي. هنا، يتم تقديم ملخص للتغيرات الأسبوعية استناداً إلى معلمات صدى القلب المحددة والوقت المتوقع لتطوير النموذج.
على الرغم من أن الاختلافات لوحظت بين سلالات الماوس، في المتوسط، سمك الجدار الحاجز المتدخل في نهاية الانسياسول وتكسرية زيادة في الأسبوع الأول ولكن انخفاض من قبل نقاط وقت لاحق. القطر الداخلي البطيني الأيسر في نهاية الدياسول وكتلة البطين الأيسر زيادة على مدى فترة ثلاثة أسابيع. وعلاوة على ذلك، تظهر قلوب الماوس أبعاد غرفة البطين الأيسر أكبر بشكل واضح تحت isoproterenol، فضلا عن كميات أكبر من التليف نسبة إلى الضوابط المعالجة بالملوحة.
من المهم الحفاظ على بيئة جراحية معقمة خلال جراحة البقاء على قيد الحياة لتقليل العدوى والمراضة بعد الجراحة. يمكن تقييم نجاح إنشاء النموذج في الجسم الحي عن طريق تخطيط صدى القلب التسلسلي لضمور، تمدد، والخلل الوظيفي، وكذلك السابقين vivo عن طريق التقييم النسيجي والجزيئي للأنسجة المحصودة القلب. لقد طبقنا هذه الطريقة على أكثر من 100 سلالة من الفئران الأصيلة لتقييم سمات إعادة عرض القلب بسبب التحفيز المزمن بيتا الأدرينرجي.
يتم نشر النتائج وتتاح بسهولة.
