通过渗透泵长期给给异丙醇已被广泛用于综述小鼠晚期心力衰竭的变化。这种方法很简单,需要比其他模型,如LAD和TAC更少的手术专业知识。王一斌博士实验室的研究科学家任文森博士将证明这一程序。
在称量和记录每只小鼠的体重后,计算每种动物的适当量和异丙醇浓度,并在120微升无菌0.9%氯化钠中溶解异丙醇。彻底混合一分钟,完全溶解异丙醇,并称重并记录一个空渗透泵的重量,以及和没有其流量调节器,每只鼠标。连接一个 27 规格的钝尖灌装管,随渗透泵一起安装一个 1 毫升注射器,每只鼠标有 120 微升的异丙醇溶液。
将泵保持直立位置,将灌装管插入顶部的泵开口,直到灌装管的尖端靠近泵储液罐的底部,然后缓慢地按下注射器柱塞,直到异丙醇溶液填充到泵开口。装满泵后,小心地拆下灌装管,并擦去多余的溶液。插入回流量调节器以关闭泵,并擦去多余的溶液。
然后重新加压泵,确认超过 90% 的储液罐容量已加注。将鼠标放在加热垫上的上部位置,然后从下腹部去除空气。对于手术性渗透泵植入,确认麻醉小鼠对手趾捏缺乏反应,并在动物的眼睛上涂抹软膏。
用合适的消毒剂清洁裸露的皮肤,并制作一厘米的中线皮肤切口。使用一把钝端剪刀仔细解剖下皮面壁的皮肤,并使用钳子将内皮壁从底层肠中拉出。使用细剪刀在腹膜壁上切割一个0.8厘米的孔,然后首先将渗透泵流量调节器端插入腹腔。
当泵就位时,使用 5-0 可吸收的缝合线以中断的方式关闭内面壁上的孔,并使用 6-0 不可吸收的缝合线关闭皮肤。然后将鼠标放在一个专门的孵化器中,进行监控,直到完全保持,然后再将动物返回到其家庭笼子。此处,介绍了基于所选超声心动图参数的每周变化摘要以及建模的预期时间。
虽然观察到小鼠菌株之间的变化,平均而言,在结束硅藻和分数缩短增加在第一周,但减少以后的时间点。左心室内径在端膜和左心室质量增加在三个星期内。此外,小鼠心脏在异丙醇下显示明显较大的左心室尺寸,以及与盐水处理的对控剂相关的纤维化量更大。
在存活手术期间保持无菌手术环境至关重要,以尽量减少术后感染和发病率。成功的模型创建可以通过连续超声心动图评估体内的肥大、扩张和功能障碍,以及通过组织学和分子评估收获的心脏组织进行外活。我们已将这种方法应用于100多种近亲繁殖小鼠,以评估由于慢性β-肾上腺素刺激导致的心脏重塑特征。
结果公布并随时可用。