البنك الحيوي للطب الانتقالي: إجراءات التشغيل القياسية للإدارة المثلى للعينات

تعد البنوك الحيوية موارد أساسية للبحوث الأساسية الانتقالية والسريرية، ولكنها تعمل أيضا كلاعبين رئيسيين يربطون بين البحث الأكاديمي وصناعة التكنولوجيا الحيوية الدوائية. يقدم هذا البروتوكول إجراءات التشغيل القياسية للبنك الحيوي في IAO ، وهو بنك حيوي معتمد بالكامل يعمل وفقا لأحدث المعايير للتكنولوجيا الحيوية والبنوك الحيوية والمتطلبات العامة للبنوك الحيوية. يعد توفر العينات الحيوية عالية الجودة من مرضى السرطان أمرا بالغ الأهمية لتطوير أدوات التشخيص من الجيل التالي ويقوم المعالجون بتكييفها مع المرضى الفرديين.

يتطلب البنك الحيوي للمواد البيولوجية من مريض السرطان موظفين متخصصين والعديد من الشهادات. يجب تدريب الموظفين وتحديثهم باستمرار. لذلك يجب أن يكون هذا البروتوكول نقطة البداية لأولئك الذين يرغبون في إنشاء بنك حيوي.

للبدء ، قم ببث فيديو كرتوني تعليمي في غرف الانتظار لإعلام المرضى بأهمية تأثير RPA. توفير إشارات مرجعية للأداة لجميع المرضى. استخدم برنامج LIMS لتتبع جميع العينات البيولوجية.

تحديد المرضى باستخدام الرموز. قم بتعيين رمز فريد لكل فرد يطابق رقم السجل الطبي. تحقق مما إذا كان المريض مسجلا في تجربة سريرية أو مشروع بحث معتمد محدد من خلال إكمال حقل مشروع الدراسة بشكل صحيح في كل ملف تعريف للمريض.

أبلغ الفنيين إذا كان خطر العدوى غير معروف. تجاهل العينات ذات النتائج الإيجابية أو المخاطر غير المعروفة. للحصول على عينات جديدة ، قم بتسجيل عينات الدم في برنامج البنك الحيوي.

قم بتسمية vacutainers برمز معرف البنك الحيوي وتسليمها إلى المستخدمين المصرح لهم. بالنسبة للعينات المجمدة المخزنة في البنك الحيوي ، قم بإعداد أنبوبين مغلفين ب cryobank 2D يحتوي كل منهما على 900 ميكرولتر من الدم. تسجيل الحصص في برنامج البنك الحيوي.

ضعها على لوحة باركود محددة وقم بتخزينها في درجة حرارة 80 درجة مئوية تحت الصفر لضمان درجة حرارة ثابتة. صب الدم من أنابيب جمع EDTA في الأنبوب المخروطي المعقم الفارغ سعة 50 ملليلتر وقم بتخفيفه باستخدام 1X PBS المعقم. استخدم PBS لشطف أنبوب الدم.

أجهزة الطرد المركزي للأنابيب عند 400 RCF لمدة 30 دقيقة عند 20 درجة مئوية ومعالجة الأنابيب تحت غطاء بيولوجي. استرجع الطبقة البيضاء الوسطى التي تحتوي على PBMCs باستخدام ماصة باستور وضعها في أنبوب مخروطي معقم جديد سعة 50 ملليلتر. أضف ما يصل إلى 45 ملليلتر من PBS لغسل PBMCs.

امزج وجهاز طرد مركزي عند 400 RCF لمدة 10 دقائق عند أربع درجات مئوية. استعادة بيليه وإعادة تعليقها في برنامج تلفزيوني. ثم عد الخلايا باستخدام غرف Burker التي يمكن التخلص منها.

كرر غسل PBS ل PBMCs كما هو موضح في مخطوطة النص. تمييع PBMCs في وسط التجميد وإعداد أنابيب cryobank 2D المغلفة عن طريق نقل ملليلتر واحد من الخلايا المعاد تعليقها إلى كل أنبوب تبريد. ضع العينات في صندوق تبريد محدد وقم بتخزينها في درجة حرارة 80 درجة مئوية تحت الصفر في أسرع وقت ممكن.

جهاز طرد مركزي يحتوي على عينات الدم الكاملة عند 2،000 غرام لمدة 10 دقائق عند أربع درجات مئوية. قم بإزالة الطبقة العليا من البلازما باستخدام ماصة باستور سعة ثلاثة ملليلتر وانقلها إلى أنبوب مخروطي معقم سعة 15 ملليلتر. ثم أجهزة الطرد المركزي في 16،000 RCF لمدة 10 دقائق عند أربع درجات مئوية للقضاء على خلايا الدم الملوثة.

نقل البلازما إلى واحد ملليلتر cryobank 2D المغلفة الأنابيب. تسجيل الحصص في برنامج البنك الحيوي. ضعها على لوحة باركود محددة وقم بتخزينها في 80 درجة تحت الصفر لضمان درجة حرارة ثابتة.

قم بفحص عينات الأنسجة من قبل أخصائي علم الأمراض لتحديد ما إذا كانت المادة غير الضرورية لإجراءات التشخيص كافية لأغراض البحث. كلما كان ذلك ممكنا ، وجمع حتى النظير غير المرضي للأنسجة المرضية. ضع العينات في أطباق بتري المعقمة التي تحمل علامة P و NP. احتفظ بالأنسجة على الجليد عند أربع درجات مئوية وقسمها إلى ثلاثة أجزاء لكل منها.

A و B و C إذا توفرت مواد كافية. بالنسبة لعينات الأنسجة الطازجة المصنفة على أنها A ، ضع الحصص الطازجة لأنسجة P و NP في أنابيب مع وسيط الاستزراع المناسب المحدد في كل بروتوكول محدد وأرسلها إلى وحدات البحث الخارجية. بالنسبة لعينات أنسجة OCT المصنفة على أنها B ، املأها براتنج OCT وضعها على الفور في جهاز تجميد فلاش عند 80 درجة مئوية تحت الصفر.

بالنسبة لعينات الأنسجة المصنفة على أنها C ، ضع عينات الأنسجة المتبقية في أنابيب مغلفة ب cryobank 2D في جهاز التجميد السريع. تخزين لوحات في ناقص 80 درجة مئوية. تم جمع ما مجموعه 38،446 خزعة سائلة بيولوجية مشروحة و 10،205 عينة من الأنسجة من أبريل 2012 إلى ديسمبر 2021.

انخفض عدد العينات التي تم جمعها ، وخاصة الأنسجة من 2020 إلى 2021 ، بسبب جائحة COVID-19 والانخفاض المرتبط بها في إجراءات الأورام. تم تحليل العينات التي تم جمعها من أقسام المسالك البولية وأمراض النساء والموجات فوق الصوتية وأقسام جراحة الرأس والرقبة والبطن والحوض والصدر بالتفصيل. تم جمع أكبر عدد من عينات الأنسجة من أورام الثدي.

زادت مجموعة العينات البيولوجية الأخرى ، مثل البول والبراز ومسحات الشدق ، بشكل كبير بعد الطلب على مر السنين. يوفر هذا الخيار منصة أساسية لتخزين العينات البيولوجية وتحسين قابلية استنساخ برامج أبحاث السرطان. يمكن استخدام هذه العينات لتطبيقات بحثية مختلفة مثل تسلسل الجيل التالي أو قياس الطيف الكتلي.

منصتنا قادرة على تنفيذ خوارزميات ذكاء اصطناعي جديدة في الأبحاث الانتقالية مع إمكانية تغيير طريقة علاج مرضى السرطان.