바이오뱅크는 기초 중개 및 임상 연구에 필수적인 자원이지만 학술 연구와 제약-생명공학 산업을 연결하는 핵심 주체 역할도 합니다. 이 프로토콜은 생명 공학, 바이오 뱅킹 및 바이오 뱅크에 대한 일반 요구 사항에 대한 최신 표준을 준수하는 완전히 인증 된 바이오 뱅크 인 IAO에서 바이오 뱅크의 표준 운영 절차를 제시합니다. 암 환자의 고품질 생체 표본의 가용성은 차세대 진단 도구 개발에 매우 중요하며 치료사는 이를 개별 환자에게 맞춤화합니다.
암 환자의 생물학적 물질에 대한 바이오뱅킹에는 전문 인력과 수많은 인증이 필요합니다. 직원은 지속적으로 교육되고 업데이트되어야합니다. 따라서이 프로토콜은 바이오 뱅크를 설립하고자하는 사람들을위한 출발점이되어야합니다.
먼저 대기실에서 교육용 만화 비디오를 방송하여 RPA의 영향의 중요성을 환자에게 알립니다. 모든 환자에게 가젯 책갈피를 제공하십시오. LIMS 소프트웨어를 사용하여 모든 생물학적 샘플을 추적합니다.
코드를 사용하여 환자를 식별합니다. 의료 기록 번호와 일치하는 고유 코드를 각 개인에게 할당하십시오. 각 환자 프로필의 연구 프로젝트 필드를 올바르게 작성하여 환자가 임상 시험 또는 지정된 승인된 연구 프로젝트에 등록되었는지 확인합니다.
감염 위험을 알 수없는 경우 기술자에게 알리십시오. 긍정적 인 결과 또는 알려지지 않은 위험이있는 표본을 폐기하십시오. 새로운 샘플의 경우 바이오뱅크 소프트웨어에 혈액 샘플을 등록하십시오.
바이오뱅크 ID 코드로 바쿠테이너에 라벨을 붙이고 승인된 사용자에게 전달하십시오. 바이오뱅크에 보관된 냉동 샘플의 경우 각각 900마이크로리터의 혈액으로 구성된 2개의 cryobank 2D 코팅 튜브를 준비합니다. 바이오뱅크 소프트웨어에 분취량을 등록합니다.
지정된 바코드 플레이트에 놓고 일정한 온도를 보장하기 위해 섭씨 영하 80도에서 보관하십시오. EDTA 수집 튜브의 혈액을 빈 멸균 50 밀리리터 원추형 튜브에 붓고 멸균 1X PBS를 사용하여 희석합니다. PBS를 사용하여 혈액 튜브를 헹굽니다.
섭씨 20도에서 30분 동안 400RCF에서 튜브를 원심분리하고 생물학적 위험 후드 아래에서 튜브를 처리합니다. 파스퇴르 피펫을 사용하여 PBMC가 포함된 중간 흰색 층을 회수하고 새로운 멸균 50밀리리터 원추형 튜브에 넣습니다. PBMC를 세척하기 위해 최대 45ml의 PBS를 추가합니다.
섭씨 4도에서 10분 동안 400RCF에서 혼합 및 원심분리합니다. 펠릿을 회수하고 PBS에 다시 현탁하십시오. 그런 다음 일회용 Burker 챔버를 사용하여 세포를 세십시오.
텍스트 원고에 설명된 대로 PBMC에 대해 PBS 세척을 반복합니다. 냉동고 배지에서 PBMC를 희석하고 1밀리리터의 재현탁 세포를 각 냉동 튜브로 옮겨 크라이오뱅크 2D 코팅 튜브를 준비합니다. 샘플을 특정 냉동 상자에 넣고 가능한 한 빨리 섭씨 영하 80도에서 보관하십시오.
전혈 샘플을 담은 vacutainer를 섭씨 4도에서 10 분 동안 2, 000 G에서 원심 분리한다. 3 밀리리터 파스퇴르 피펫을 사용하여 혈장의 상층을 제거하고 멸균 된 15 밀리리터 원추형 튜브로 옮깁니다. 그런 다음 섭씨 4도에서 10 분 동안 16, 000 RCF에서 원심 분리하여 오염 된 혈액 세포를 제거합니다.
플라즈마를 1 밀리리터 냉동 은행 2D 코팅 튜브로 옮깁니다. 바이오뱅크 소프트웨어에 분취량을 등록합니다. 특정 바코드 플레이트에 놓고 일정한 온도를 보장하기 위해 영하 80도에서 보관하십시오.
진단 절차에 필요하지 않은 물질이 연구 목적에 충분한지 확인하기 위해 병리학자가 조직 샘플을 검사하도록 합니다. 가능할 때마다 병리학 적 조직의 비 병리학 적 대응 물조차도 수집하십시오. 샘플을 P 및 NP로 표지된 멸균 세포 배양 페트리 접시에 넣습니다. 얼음 위의 조직을 섭씨 4도에 유지하고 각각 세 부분으로 나눕니다.
A, B 및 C(사용 가능한 재료가 충분한 경우). A로 표시된 신선한 조직 샘플의 경우 P 및 NP 조직의 신선한 분취량을 각 특정 프로토콜에 정의된 적절한 배양 배지가 있는 튜브에 넣고 외부 연구 단위로 보냅니다. B로 표시된 OCT 조직 샘플의 경우 OCT 수지로 채우고 즉시 섭씨 영하 80도의 급속 동결 장치에 넣습니다.
C로 표지된 조직 샘플의 경우 나머지 조직 샘플을 급속 동결 장치의 cryobank 2D 코팅 튜브에 넣습니다. 접시를 섭씨 영하 80도에서 보관하십시오. 2012 년 4 월부터 2021 년 12 월까지 총 38, 446 개의 주석이 달린 생물학적 액체 생검과 10, 205 개의 조직 샘플이 수집되었습니다.
2020 년부터 2021 년까지 수집 된 샘플, 특히 조직의 수는 COVID-19 대유행 및 관련 종양 절차의 감소로 인해 감소했습니다. 비뇨기과, 산부인과, 초음파 및 두경부, 복부, 골반 및 흉부 수술의 구분에서 얻은 수집 된 샘플을 자세히 분석했습니다. 가장 많은 수의 조직 샘플이 유방 종양으로부터 수집되었다.
소변, 대변 및 협측 면봉과 같은 다른 생물학적 표본의 수집은 수년에 걸친 수요에 따라 크게 증가했습니다. 이 옵션은 생물학적 샘플 보관을 위한 기본 플랫폼을 제공하고 암 연구 프로그램의 재현성을 향상시킵니다. 이러한 샘플은 차세대 염기서열분석 또는 질량분석법과 같은 다양한 연구 응용 분야에 사용할 수 있습니다.
우리 플랫폼은 암 환자를 치료하는 방식을 바꿀 수있는 잠재력을 가진 새로운 인공 지능 알고리즘을 번역 연구에 구현할 수 있습니다.
