تقوم هذه الطريقة بنمذجة العديد من جوانب هشاشة العظام البشرية بعد الصدمة ، مما يتيح لنا طريقة للتحقيق في المرض وتأثير العلاجات الممكنة في إطار زمني أقصر. الميزة الرئيسية لهذه التقنية هي أنه على المدى القصير ، بعد أسبوعين فقط من التدخل ، أظهرت الفئران تكوينا متسقا وقابلا للقياس ، بالإضافة إلى تغييرات في الحمل في الساق المصابة تشير إلى الألم. نوصي باستخدام هذا النموذج لدراسة تكوين العظم وتعظم الغضروف ، وكذلك الألم الناجم عن الإصابة.
يمكن أن يكون تحديد وقطع الرباط الغضروفي الإنسي أمرا صعبا ، لذلك ننصح بممارسة ذلك على الجثث حتى تكون واثقة. ستساعد في إظهار الإجراء لينيت دانينغ ، مساعدة باحثة في مركز علوم العضلات والعظام. للبدء ، خصص غرفة معقمة لإجراء الجراحة ، مع التأكد من أن جميع الأسطح معقمة.
ترتيب ووضع الأدوات المعقمة على الستائر المعقمة. ثم تزن الماوس. قص فرو الفأر المخدر على الركبة والجانبين الأمامي والجانبي من منتصف الذقن إلى منتصف الفخذ ، مع قص الشعر الصغيرة.
تطهير الجلد عن طريق وضع منظف البشرة المضاد للبكتيريا على الجلد المحلوق والمكشوف. للتسكين، يتم تطبيق 0.05 ملليغرام لكل كيلوغرام من البوبرينورفين تحت الجلد. ضع الماوس على الجانب الظهري ، واترك الركبة التي سيتم تشغيلها لأعلى ، وضع أنف الماوس في الفوهة المتصلة بجهاز التخدير.
قم بتغطية الماوس بستارة معقمة بفتحة صغيرة لثقب المفتاح. ضع الساق المراد إجراء العملية عليها مع تثبيت الركبة بزاوية أقل من 90 درجة ، بحيث يكون الرباط الرضفي متجها لأعلى والقدم مثبتة بشريط جراحي. اضبط المجهر للتركيز على الرباط الرضفي.
قرصة جلد الركبة على الجانب الجانبي مع ملقط مسنن. قم بعمل قطع صغير مواز للوتر الرضفي البعيد باستخدام مقص جراحي. أدخل المقص وقم بتوسيع القطع إلى حوالي 10 ملم.
حرك الجلد إلى الجانب الإنسي ، مع كشف الرباط الرضفي والهضبة الظنبوبية القريبة. باستخدام شفرة رقم 11 ، قم بعمل شق من أعلى إلى أسفل على طول الجانب الإنسي من الرباط الرضفي. عند الوصول إلى أسفل الرباط الرضفي ، أدر الشفرة 90 درجة وقم بتمديد الشق بعيدا عن الرباط الرضفي باتجاه الجانب الإنسي ، للوصول إلى كبسولة المفصل.
اضغط على الرباط الرضفي بملقط ذو طرف حاد وقم بتدوير المعصم لتحريك الرباط الرضفي إلى الجانب الجانبي ، وهو ما يكفي لكشف IFP. بينما لا تزال تمسك الرباط الرضفي برفق ، اضغط على IFP بملاقط دقيقة لرفعه وتحريكه لأعلى قليلا. إذا كان هناك نزيف ، اضغط مع برعم القطن.
تحديد MMTL من الغضروف المفصلي الإنسي ، الذي يثبت القرن القحفي للهلالة الإنسية إلى الهضبة الظنبوبية الأمامية. اقطع MMTL بعناية باستخدام مقص زنبركي صغير بطول 2 ملم ، تاركا الغضروف المفصلي الإنسي والأربطة الأخرى سليمة. باستخدام سكين جراحي مجهري بثلاثة ملليمترات ، ضع علامة على ثلاثة مسافات بادئة متباعدة بالتساوي على الغضروف المفصلي الظنبوبي في اتجاه من الجزء الخلفي إلى الجزء الأمامي.
أغلق الجلد باثنين أو ثلاثة مشابك معدنية صغيرة تغلق الجرح بطول سبعة ملليمترات. قم بإزالة المشابك المعدنية بين خمسة إلى سبعة أيام بعد الجراحة. ثم ، قم بتقييم الألم أو المشية في أي وقت أثناء الدراسة.
تحديد الأنسجة المتكلسة عن طريق تحليل الأشعة المقطعية الدقيقة لمفاصل الركبة. لتحليل تصلب العظام تحت الغضروف ، حدد VOI في وسط حمل الهضبة الظنبوبية الإنسية. بعد ذلك ، حدد كثافة العظام تحت الغضروف والبنية الدقيقة عن طريق تحديد منطقة ذات أهمية تحدد البنية التربيقية باستخدام المشاش الظنبوبي ، أو الصفيحة تحت الغضروفية ، أو العظم تحت الغضروفي الكلي في المنظر الإكليلي ثنائي الأبعاد للمكدس ، باستخدام برنامج محلل التصوير المقطعي المحوسب.
تحديد الخلايا العظمية في مكدسات الصور ثلاثية الأبعاد المعاد بناؤها باستخدام برنامج CTVol. تقييم تلف الغضروف والتهاب الغشاء المفصلي وفقا لدرجة تلف الغضروف OARSI 19 ودرجة التهاب الغشاء المفصلي 20 ، على أقسام مضمن بالبارافين ، خمسة ميكرومتر. لم تكن هناك تغييرات كبيرة في حمل الساق الخلفية في نموذج DMM في غضون ثمانية أسابيع بعد الحث ، بينما فضلت فئران DCS الساق المقابلة ، أو الساق الضابطة ، بشكل كبير ، بعد أسبوعين من التدخل.
تشير النسبة بين الساق المقابلة والساق المماثلة إلى أن كلا النموذجين قد زاديا من كثافة العظام في منطقة تحميل العظام تحت الغضروف للطرف المصاب ، بعد أربعة أسابيع من التحريض. كان ظهور الخلايا العظمية أكثر بروزا في فئران DCS ، مع زيادة كبيرة في العدد والحجم مقارنة بنموذج DMM بعد أسبوعين من التدخل. يعرض DCS تلفا مرتفعا في الغضروف في مقصورات الظنبوب والفخذ الإنسي ، والتهاب الغشاء المفصلي بعد أربعة أسابيع من التحريض.
يجب أن يقتصر الضرر على الهياكل التي نريد التأثير عليها عمدا ، لذلك هناك حاجة إلى عناية خاصة للحفاظ على جميع الهياكل الأخرى سليمة وتقليل تعرض الغضروف. يسمح لنا التعديل ليشمل خدوش الغضروف المتعمدة بالتحقيق في هشاشة العظام مع التركيز على تكوين العظم ، أو هشاشة العظام المبكرة ، أو آلام الإصابة ، وتأثير تلف الغضروف على المفصل بأكمله.
