يمكن للتحفيز الكهربائي المبرمج باستخدام تنظيم الأذين عبر المريء تحديد الخصائص الفيزيولوجية الكهربية والقابلية للرجفان الأذيني في الفئران. وصفنا هنا إجراء موحدا لتطوير البروتوكول يمكنه تحسين قابلية التكاثر. عادة ما يكون النهج عبر المريء للسرعة الأذينية إجراء للبقاء على قيد الحياة ، مما يتيح إجراء اختبار تسلسلي في نفس الحيوان.
تشمل المكونات المهمة لتطوير البروتوكول دراسات المنصات الأولية لتحسين المعلمات التجريبية للنموذج قيد الدراسة وتحديد عدم انتظام ضربات القلب الناجم عن التحفيز السمبتاوي الناجم عن السرعة. بالنسبة للنماذج الجينية ، قم بإخضاع الفئران للإيقاع الأذيني كل أسبوعين ، بدءا من ثمانية أسابيع من العمر لتحديد الفترة المثلى لقابلية الرجفان الأذيني ، ودراسة كلا الجنسين حيث قد لا يصاب المرء بنمط ظاهري للرجفان الأذيني. بالنسبة للنماذج المكتسبة ، قم بإجراء السرعة بعد أن حققت الفئران النضج البدني.
بينما يتم تحقيق النضج عادة في 12 أسبوعا ، اضبط العمر حسب الضرورة للنماذج التجريبية. قم بإجراء كل من السرعة المتتالية والمتناقصة لتحديد وضع السرعة الأمثل. افصل كل إجراء لمدة لا تقل عن 24 ساعة.
تحليل البيانات باستخدام تعريفات متعددة لحساسية التركيز البؤري التلقائي. استخدم المعلمات المحددة للنموذج المحسن وتعريف قابلية الرجفان الأذيني للدراسات اللاحقة على الفئران الإضافية. بعد فقدان منعكس الدواسة ، ضع الماوس المخدر في وضع ضعيف على وسادة تدفئة مصممة للحفاظ على درجة حرارة الجسم عند حوالي 37 درجة مئوية مع لصق الأطراف الخلفية على سطح الوسادة.
احصل على سلك ECG سطحي واحد عن طريق وضع 27 قطبا كهربائيا لإبرة ECG تحت الجلد متصلة بمكبر بيولوجي وأجهزة الحصول على البيانات في الأطراف الأمامية باستخدام قطب أرضي في الطرف الخلفي. أدخل قسطرة قطب كهربائي ثماني القطب فرنسيين متصلة بمحفز وعازل محفز في المريء. أدخل إلى عمق يقارب المسافة من الفم إلى أعلى الغضروف الخنجري مباشرة مع تمديد الرقبة.
ابدأ الحصول على البيانات بالتسجيل المستمر ل ECG lead one باستخدام برنامج التحليل. ضع القسطرة بشكل صحيح داخل المريء لتمكين التقاطها. للقيام بذلك ، قم بتطبيق حافز 1.5 مللي أمبير بعرض نبضة يبلغ 2 مللي ثانية بطول دورة أقصر قليلا من طول دورة الجيوب الأنفية.
ضع القسطرة بعناية حتى يتم الحصول على التقاط الأذين بشكل متسق. لتحديد عتبة الالتقاط الانبساطي الأذيني ، ابدأ السرعة عند 1.5 مللي أمبير مع عرض نبضة يبلغ 2 مللي ثانية بطول الدورة المستخدمة لالتقاط الأذينين. تقليل سعة التحفيز بمقدار 0.05 مللي أمبير حتى فقدان التقاط الأذين مع الزيادة اللاحقة حتى الالتقاط.
احصل على أقل حد سرعة ممكن لتقليل التحفيز السمبتاوي الناجم عن السرعة غير المقصودة. اضبط سعة التحفيز على ضعف العتبة. قياس المعلمات الفيزيولوجية الكهربية، بما في ذلك وقت استعادة العقدة الجيبية، وطول دورة Wenckebach، وفترة المقاومة للحرارة الفعالة الأذينية البطينية قبل الإيقاع الأذيني السريع لتحريض الرجفان الأذيني.
قم بإجراء سرعة عند ضعف العتبة مع عرض نبضة يبلغ ميلي ثانية باستخدام إما سرعة الاندفاع بأطوال دورات مختلفة أو سرعة متناقصة كما هو محدد من الدراسات الأولية. بالنسبة لسرعة الاندفاع ، قم بالسرعة بطول دورة أولية تبلغ 50 مللي ثانية لمدة 15 ثانية ، تليها قطارات بأطوال دورات 40 و 30 و 25 و 20 و 15 مللي ثانية. لتناقص السرعة ، قم بإجراء ثلاثة إلى خمسة قطارات وسرعة بطول دورة يبلغ 40 مللي ثانية يتم تقليلها بمقدار ميلي ثانية كل ثانيتين حتى تنتهي عند 20 مللي ثانية.
قم بإنهاء الإجراء بعد 30 ثانية من إيقاع الجيوب الأنفية بعد آخر قطار سرعة أو بعد حلقة مدتها 10 دقائق من التركيز البؤري التلقائي ، أيهما يأتي أولا. قم بإزالة أقطاب القسطرة وتخطيط القلب برفق. في حالة الاختبار التسلسلي ، انتظر لمدة لا تقل عن 24 ساعة قبل تكرار إجراء السرعة.
مكن تسجيل ECG قياسات مدة الموجة P ، وفاصل PR ، ومدة QRS ، وفترات QT و QTC. قدم التسجيل المستمر لتخطيط القلب أثناء سرعة الأذين السريع تسجيلا لكل حلقة من الأذهان الأذيني المستحث أثناء الدراسة. من هذه البيانات ، تم تسجيل المدة التراكمية والمتوسطة للحلقات وعدد حلقات AF المستمرة.
تشير نوبات الإحصار الأذيني البطيني المفرط أثناء الإيقاع إلى فترات من التحفيز السمبتاوي الناجم عن السرعة ، مما يدل على أن أي AF مرتبط كان قطعة أثرية لهذه الظاهرة بدلا من الفيزيولوجيا المرضية للنموذج نفسه. كان هذا بسبب التحفيز غير المقصود للضفيرة العقدية الموجودة على الأذين الأيسر الخلفي ، مما أدى إلى تنشيط السمبتاوي. يزيد هذا النوع من تحريض عدم انتظام ضربات القلب من حدوث الرجفان الأذيني في الفئران الضابطة ويسبب تقلبا أكبر في عدم انتظام ضربات القلب داخل مجموعة تجريبية.
بالنظر إلى هذه الميزات الملوثة ، يجب استبعاد الحيوانات التي تعاني من AF في ظل هذه الظروف من التحليل. عند استخدام هذه الاستراتيجية التجريبية ، فإن الدراسات التجريبية الأولية والتعرف على التحفيز السمبتاوي الذي يسبب تحريض AF غير المقصود لها أهمية خاصة لتحسين البروتوكول ودراسة قابلية الاستنساخ.
