גירוי חשמלי מתוכנת באמצעות קצב פרוזדורים טרנס-ווסגיאלי יכול לקבוע תכונות אלקטרופיזיולוגיות ורגישות לפרפור פרוזדורים בעכברים. כאן תיארנו הליך סטנדרטי לפיתוח פרוטוקולים שיכול לייעל את יכולת השחזור. הגישה הטרנס-ווסגיאלית לקצב פרוזדורים היא בדרך כלל הליך הישרדותי, ובכך מאפשרת ניסויים סדרתיים באותה חיה.
מרכיבים חשובים לפיתוח פרוטוקולים כוללים מחקרי משטחים ראשוניים לאופטימיזציה של פרמטרים ניסיוניים עבור המודל הנחקר וזיהוי הפרעות קצב הנגרמות על ידי גירוי פאראסימפתטי הנגרם על ידי קצב. עבור מודלים גנטיים, הכפיפו עכברים לקצב פרוזדורים דו-שבועי, החל מגיל שמונה שבועות כדי לקבוע את התקופה האופטימלית של רגישות ל-AF, חקרו את שני המינים, שכן ייתכן שלא יפתחו פנוטיפ של AF. עבור מודלים שנרכשו, ביצוע קצב אחרי עכברים השיג בגרות פיזית.
בעוד שבשלות מושגת בדרך כלל לאחר 12 שבועות, התאימו את הגיל לפי הצורך למודלים ניסיוניים. בצע הן רצף והן קצב מופחת כדי לקבוע את מצב הקצב האופטימלי. הפרד כל הליך במינימום של 24 שעות.
נתח את הנתונים באמצעות הגדרות מרובות של רגישות למיקוד אוטומטי. השתמש בפרמטרים הספציפיים למודל הממוטב ובהגדרה של רגישות למיקוד אוטומטי למחקרים הבאים על עכברים נוספים. לאחר אובדן רפלקס הדוושה, הניחו את העכבר המרדים במצב שכיבה על כרית חימום שנועדה לשמור על טמפרטורת הגוף בכ-37 מעלות צלזיוס כאשר האחוריים מודבקים למשטח הפד.
השג מוליך אק"ג משטח אחד על ידי מיקום תת עורי של 27 אלקטרודות מחט א.ק.ג. המחוברות למגבר ביולוגי וחומרת איסוף נתונים לתוך הפורלימבים עם אלקטרודת הארקה בחלק האחורי. הכנס צנתר אלקטרודה מתומן דו-קוטבי המחובר לממריץ ומבודד גירוי לתוך הוושט. הכנס לעומק המתקרב את המרחק מהפה עד ממש מעל הסחוס הקסיפואידי כשהצוואר מורחב.
התחל באיסוף נתונים עם הקלטה רציפה של עופרת א.ק.ג. באמצעות תוכנת הניתוח. מקמו נכון את הקטטר בתוך הוושט כדי לאפשר לכידה. לשם כך, יש למרוח גירוי של 1.5 מיליאמפר ברוחב פולס של שתי אלפיות השנייה באורך מחזור מעט קצר יותר מאורך מחזור הסינוסים.
מקמו בזהירות את הצנתר עד לקבלת לכידה עקבית של פרוזדורים. כדי לקבוע את סף הלכידה הדיאסטולי של פרוזדורים, התחל קצב של 1.5 מיליאמפר עם רוחב פולס של שתי אלפיות השנייה באורך המחזור המשמש ללכידת פרוזדורים. הפחת את משרעת הגירוי במרווחים של 0.05 מיליאמפר עד לאובדן לכידת פרוזדורים עם עלייה לאחר מכן עד ללכידה.
השג את סף הקצב הנמוך ביותר האפשרי כדי למזער גירוי פאראסימפתטי הנגרם בשוגג על-ידי קצב. התאם את משרעת הגירוי לסף כפול. מדוד פרמטרים אלקטרופיזיולוגיים, כולל זמן ההתאוששות של צומת הסינוס, אורך מחזור Wenckebach ותקופת עקשן יעילה של אטריובנטריקולרי לפני קצב פרוזדורים מהיר עבור אינדוקציה של AF.
בצע קצב בסף כפול עם רוחב פולס של שתי אלפיות השנייה באמצעות קצב פרץ באורכי מחזור שונים או קצב מופחת כפי שנקבע ממחקרים ראשוניים. עבור קצב פרץ, קצב באורך מחזור התחלתי של 50 אלפיות השנייה למשך 15 שניות, ואחריו רכבות באורכי מחזור של 40, 30, 25, 20 ו-15 אלפיות השנייה. עבור קצב מופחת, בצע שלוש עד חמש רכבות וקצב באורך מחזור של 40 אלפיות השנייה המופחת בשתי אלפיות השנייה כל שתי שניות עד לסיום ב -20 אלפיות השנייה.
סיים את ההליך לאחר 30 שניות של קצב סינוס לאחר רכבת הקצב האחרונה או לאחר פרק של 10 דקות של AF, המוקדם מביניהם. יש להסיר בעדינות קטטר ואלקטרודות אק"ג. במקרה של בדיקה סדרתית, המתן לפחות 24 שעות לפני שתחזור על הליך הקצב.
הקלטת א.ק.ג. אפשרה מדידות של משך גל P, מרווח יחסי ציבור, משך QRS ומרווחי QT ו- QTC. הקלטה רציפה של האק"ג במהלך קצב פרוזדורים מהיר סיפקה הקלטה של כל פרק של AF שהושרה במהלך המחקר. מנתונים אלה נרשמו משך הזמן המצטבר והממוצע של הפרקים ומספר פרקי המיקוד האוטומטי המתמשכים.
אפיזודות של חסימה אטריובנטריקולרית מוגזמת במהלך הקצב מצביעות על תקופות של גירוי פאראסימפתטי הנגרם על ידי קצב, מה שמעיד על כך שכל AF הקשור היה תוצר של תופעה זו ולא הפתופיזיולוגיה של המודל עצמו. זה נגרם על ידי גירוי בשוגג של plexi גנגליון הממוקם על אטריום שמאל האחורי, וכתוצאה מכך הפעלה parasympathetic. סוג זה של אינדוקציה של הפרעות קצב מעלה את שכיחות ה-AF בעכברי בקרה וגורם לשונות גדולה יותר של הפרעות קצב בקבוצת ניסוי.
בהתחשב בתכונות מזהמות אלה, בעלי חיים שחווים AF בתנאים אלה צריכים להיות מחוץ לניתוח. בעת שימוש באסטרטגיה ניסיונית זו, מחקרי פיילוט ראשוניים והכרה בגירוי פאראסימפתטי הגורם להשראת AF בשוגג חשובים במיוחד לאופטימיזציה של פרוטוקולים ולשחזור המחקר.
