Transözofageal atriyal pacing kullanılarak programlanmış elektriksel stimülasyon, farelerde elektrofizyolojik özellikleri ve atriyal fibrilasyona duyarlılığı belirleyebilir. Burada, tekrarlanabilirliği optimize edebilen protokol geliştirme için standartlaştırılmış bir prosedür açıkladık. Atriyal pacing için transözofageal yaklaşım tipik olarak bir hayatta kalma prosedürüdür, böylece aynı hayvanda seri test yapılmasını sağlar.
Protokol geliştirme için önemli bileşenler arasında, incelenen model için deneysel parametreleri optimize etmek için ilk palet çalışmaları ve pacing kaynaklı parasempatik stimülasyonun neden olduğu aritmilerin tanımlanması yer almaktadır. Genetik modeller için, fareleri AF duyarlılığının optimal periyodunu belirlemek için sekiz haftalıktan başlayarak iki haftada bir atriyal pacing'e maruz bırakır, her iki cinsiyeti de AF fenotipi geliştiremeyeceği için inceler. Edinilen modeller için, fareler fiziksel olgunluğa ulaştıktan sonra pacing yapın.
Olgunluk tipik olarak 12 haftada elde edilirken, deneysel modeller için yaşı gerektiği gibi ayarlayın. En uygun tempo modunu belirlemek için hem seri çekim hem de azaltma hızı gerçekleştirin. Her prosedürü en az 24 saat ayırın.
AF duyarlılığının birden fazla tanımını kullanarak verileri analiz edin. Ek fareler üzerinde sonraki çalışmalar için optimize edilmiş modele özgü parametreleri ve AF duyarlılığının tanımını kullanın. Pedal refleksinin kaybından sonra, anestezi uygulanan fareyi, vücut ısısını yaklaşık 37 santigrat derecede tutmak için tasarlanmış bir ısıtma yastığı üzerinde, arka bacakları ped yüzeyine bantlanmış olarak sırtüstü pozisyonda yerleştirin.
Biyolojik bir amplifikatöre bağlı 27 gauge EKG iğne elektrodunun ve veri toplama donanımının arka bacakta bir toprak elektrodu ile ön ayaklara deri altına yerleştirilmesiyle bir yüzey EKG kablosu elde edin. Yemek borusuna bir uyarıcıya ve uyaran izolatörü bağlı iki Fransız oktapolar elektrot kateteri yerleştirin. Boyun uzatılmış olarak ağızdan ksifoid kıkırdağın hemen üstüne kadar olan mesafeye yaklaşan bir derinliğe yerleştirin.
Analiz yazılımını kullanarak EKG kurşununun sürekli kaydedilmesiyle veri toplamaya başlayın. Yakalamayı sağlamak için kateteri yemek borusu içinde uygun şekilde konumlandırın. Bunu yapmak için, sinüs döngüsü uzunluğundan biraz daha kısa bir döngü uzunluğunda iki milisaniyelik bir darbe genişliğine sahip 1.5 miliamperlik bir uyaran uygulayın.
Tutarlı atriyal yakalama elde edilene kadar kateteri dikkatlice konumlandırın. Atriyal diyastolik yakalama eşiğini belirlemek için, atriyal yakalama için kullanılan döngü uzunluğunda iki milisaniyelik bir darbe genişliğine sahip 1,5 miliamperde pacing başlatın. Atriyal yakalama kaybına kadar uyaran genliğini 0,05 miliamperlik artışlarla azaltın ve ardından yakalamaya kadar artırın.
Yanlışlıkla pacing kaynaklı parasempatik stimülasyonu en aza indirmek için mümkün olan en düşük pacing eşiğini elde edin. Uyaran genliğini eşiğin iki katına ayarlayın. AF indüksiyonu için hızlı atriyal pacing öncesinde sinüs düğümü iyileşme süresi, Wenckebach siklus uzunluğu ve atriyoventriküler etkili refrakter dönem dahil olmak üzere elektrofizyolojik parametreleri ölçün.
Farklı döngü uzunluklarında patlama hızı veya ilk çalışmalardan belirlendiği gibi azaltılmış tempo kullanarak iki milisaniyelik darbe genişliğiyle eşiğin iki katı hızda tempo gerçekleştirin. Patlama hızı için, 15 saniye boyunca 50 milisaniyelik bir başlangıç döngüsü uzunluğunda tempo uygulayın, ardından 40, 30, 25, 20 ve 15 milisaniyelik döngü uzunluklarında trenler izleyin. Azalan tempo için, üç ila beş tren gerçekleştirin ve 20 milisaniyede sona erene kadar her iki saniyede iki milisaniye azaltılan 40 milisaniyelik bir döngü uzunluğunda tempo uygulayın.
Son tempo trenini takiben 30 saniyelik sinüs ritminden sonra veya 10 dakikalık bir AF atağından sonra, hangisi önce gelirse, prosedürü sonlandırın. Kateter ve EKG elektrotlarını nazikçe çıkarın. Seri test durumunda, pacing prosedürünü tekrarlamadan önce en az 24 saat bekleyin.
EKG Kaydı, P dalga süresi, PR aralığı, QRS süresi ve QT ve QTC aralıklarının ölçümlerini mümkün kıldı. Hızlı atriyal pacing sırasında EKG'nin sürekli kaydı, çalışma sırasında indüklenen her AF bölümünün kaydını sağladı. Bu verilerden, bölümlerin kümülatif ve ortalama süresi ve sürekli AF bölümlerinin sayısı kaydedildi.
Pacing sırasında aşırı atriyoventriküler blok atakları, pacing kaynaklı parasempatik stimülasyon dönemlerini gösterir ve ilişkili herhangi bir AF'nin, modelin kendisinin patofizyolojisinden ziyade bu fenomenin bir eseri olduğunu gösterir. Bu, arka sol atriyumda bulunan gangliyonik pleksi'nin yanlışlıkla uyarılmasından kaynaklandı ve parasempatik aktivasyonla sonuçlandı. Bu tip aritmi indüksiyonu, kontrol farelerinde AF insidansını arttırır ve bir deney grubunda daha fazla aritmi değişkenliğine neden olur.
Bu kirletici özellikler göz önüne alındığında, bu koşullar altında AF yaşayan hayvanlar analizin dışında tutulmalıdır. Bu deneysel stratejiyi kullanırken, ilk pilot çalışmalar ve yanlışlıkla AF indüksiyonuna neden olan parasempatik stimülasyonun tanınması, protokol optimizasyonu ve çalışma tekrarlanabilirliği için özellikle önemlidir.
