تحليل كثافة الميتوكوندريا والتوزيع الطولي في ألياف العضلات والهيكل العظمي الحية للفئران بواسطة الفحص المجهري متحد البؤر

تحدث إعادة تشكيل شبكة الميتوكوندريا في الإجهاد الفسيولوجي والظروف المرضية. ومع ذلك ، فإن آثار إعادة تشكيل الميتوكوندريا في العضلات الهيكلية لا تزال غير مفهومة بشكل كامل. يتيح هذا البروتوكول القياس الكمي لتغيرات الميتوكوندريا في العضلات الهيكلية الحية مما يعزز فهمنا للتفاعل بين تغيرات الميتوكوندريا والوظيفة الخلوية.

يمثل العمل مع عضلات الهيكل العظمي الحية تحديات بسبب تقلص الألياف أثناء العزل والحساسية للصورة أثناء المسح البؤري. يصف هذا البروتوكول عملية العزل باستخدام محلول الاسترخاء ، مما يتيح تحليل ألياف العضلات القابلة للحياة لتقييم الميتوكوندريا عبر الفحص المجهري متحد البؤر. يعالج بروتوكولنا نقص سير العمل لتحليل شبكات الميتوكوندريا كميا في ألياف العضلات الهيكلية.

تسمح الخطوات الموضحة هنا للمستخدمين بالاستفادة بشكل أكبر من الصور التي تم الحصول عليها عن طريق الفحص المجهري متحد البؤر باستخدام معالجة الصور عن طريق العتبة وتحليل فورييه السريع لتحقيق القياس الكمي لكثافة الميتوكوندريا وتوزيعها. نحن مهتمون بدراسة تغير العضلات الهيكلية ، وخاصة ديناميكيات الميتوكوندريا وإعادة تشكيل بنية الميتوكوندريا أثناء الشدائد وكيف يمكن تعديلها من خلال التدخل مثل التمارين الرياضية والصيام المتوسط.