ניתוח צפיפות המיטוכונדריה והתפלגות האורך בסיבי שריר שלד חי של חולדות באמצעות מיקרוסקופ קונפוקלי

שיפוץ הרשת המיטוכונדריאלית מתרחש בלחץ פיזיולוגי ובמצבים פתולוגיים. עם זאת, ההשפעות של עיצוב מחדש של המיטוכונדריה בשרירי השלד עדיין אינן מובנות לחלוטין. פרוטוקול זה מאפשר לכמת שינויים במיטוכונדריה בשרירי שלד חיים, ומשפר את הבנתנו את יחסי הגומלין בין שינויים במיטוכונדריה לבין תפקוד התאים.

עבודה עם שרירי שלד חיים מציבה אתגרים עקב כיווץ סיבים במהלך בידוד ורגישות לתמונה במהלך סריקה קונפוקלית. פרוטוקול זה מתאר תהליך בידוד באמצעות פתרון הרפיה, המאפשר ניתוח של סיבי שריר קיימא להערכה מיטוכונדריאלית באמצעות מיקרוסקופ קונפוקלי. הפרוטוקול שלנו מטפל במחסור בזרימות עבודה לניתוח כמותי של רשתות מיטוכונדריאליות בסיבי שרירי השלד.

השלבים המתוארים כאן מאפשרים למשתמשים לנצל יותר תמונות המתקבלות במיקרוסקופ קונפוקלי באמצעות עיבוד תמונה על ידי סף וניתוח פורייה מהיר כדי להשיג כימות של צפיפות ופיזור המיטוכונדריה. אנו מתעניינים בחקר שינויים בשרירי השלד, במיוחד דינמיקה מיטוכונדריאלית ועיצוב מחדש של מבנה המיטוכונדריה במהלך מצוקה, וכיצד ניתן לווסת אותם באמצעות התערבות כגון פעילות גופנית וצום ביניים.