يركز بحثنا على فهم كيف تمنع العين الالتهاب بشكل طبيعي. أظهر بحثنا أن مسار الميكورن ضروري لقمع الالتهاب في العين وتعزيز بقاء الخلايا في شبكية العين المجهدة. يشير هذا إلى أن تعطيل مسار الميكورن يمكن أن يكون مفيدا لعلاج الأمراض التوليدية للشبكية.
يعمل هذا البروتوكول على تطبيع ضغط العين قبل سحب الإبرة ، مما يقلل من الصدمة التي تصيب هياكل العين ويحد من إصابة مكون نقص التروية وإعادة التروية. يقلل هذا التحسين من التباين التجريبي الناجم عن التلاعب المادي ، مما يعزز دقة هذا النموذج. يعزز بحثنا المفهوم الفريد للعلاج بدلا من تحييد الجزيئات لتقليل الأعراض على أمل أن تتمكن الخلايا من البقاء على قيد الحياة والعودة إلى طبيعتها.
ركزنا على تغيير سلوك الخلايا المشاركة في المرض. هذا النهج لديه إمكانات قوية لتوفير فوائد طويلة الأجل ومقاومة لتكرار الأمراض المزمنة ، حيث يتم تحفيز النشاط الخلوي الطبيعي. قدم نموذجنا تقنية محسنة لدراسة إصابة نقص التروية وإعادة التروية في عين الفأر.
وقد يقدم هذا تمثيلا أكثر دقة لكيفية استجابة الهياكل داخل العين للإصابة الناجمة عن ضغط العين المطول أو من إصابة إعادة التروية. للبدء ، قم بإعداد محاقن من محلول ملحي معقم من كلوريد الصوديوم 0.9٪ متصل بخط تسريب ومحبس بإبرة قياس 30 متصلة بنهاية الخط ، واحدة لكل فأر ، وضعها على ارتفاع 120 سم فوق سطح المقعد. ثم اغسل جميع فقاعات الهواء من الخط.
بعد ذلك ، قم بإنشاء سرير لتثبيت الماوس عن طريق قطع منخفض يبلغ حوالي ستة × ثلاثة سنتيمترات في إسفنجة ووضعه بإحكام في بئر من الستايروفوم أو حاوية مسطحة أخرى. بعد تخدير الفأر ، قم بتوسيع القزحية بقطرة واحدة من 1٪ تروبيكاميد واترك خمس دقائق للتوسيع. ثم ضع الماوس بإحكام في السرير الإسفنجي تحت المجهر.
ضعي المحلول الملحي على العينين لشطف أي حطام أو فراء من سطح العين. باستخدام ملقط غير مسنن ، أمسك إحدى العينين برفق. ثم ، مع إغلاق خط التسريب ، قم بتقطيع الغرفة الأمامية بالإبرة على بعد ملليمترين تقريبا من الليمفاوية.
تأكد من أن الإبرة تخترق القرنية بشكل عمودي على سطح القرنية المنحني المحيطي ، ثم يتم تسويتها قليلا بالتوازي مع مستوى القزحية. أدر محبس لتشغيل خط التسريب وتحقق من عدم وجود تسرب عبر جرح القرنية. تأكد من انتفاخ القرنية التدريجي مع زيادة ضغط العين.
باستخدام مقياس توتر العين ، تأكد من ارتفاع ضغط العين إلى 90 إلى 100 ملم من الزئبق. قم بتأمين خط التسريب بشريط لاصق ، مع التأكد من عدم تغيير وضع الإبرة والبدء في التسرب. الآن ، ضع مرهما للعيون مثل الباسيتراسين على العين لمنع الجفاف.
ضع الماوس بعيدا عن المجهر تحت مصباح التدفئة للحفاظ على درجة حرارة الجسم الطبيعية لمدة 60 دقيقة. بعد 60 دقيقة ، أعد الماوس إلى المجهر. اخفض حقنة المحلول الملحي إلى مستوى الماوس لتطبيع ضغط العين.
قم بقياس ضغط العين باستخدام مقياس توتر العين للتحقق من أنه قريب من المعدل الطبيعي ، حوالي 20 ملم من الزئبق. بمجرد تطبيعها ، قم بإزالة الإبرة بعناية ، وتجنب تلف العدسة أو القزحية. قم بتغطية عيون الفأر بمرهم مضاد للبكتيريا للعيون ، مثل مرهم العيون البيطري للباسيتراسين.
راقب الماوس على سطح ساخن لمدة ساعة إلى ساعتين حتى يتعافى تماما من التخدير. بمجرد التعافي الكامل ، أعد الماوس إلى قفصه. أظهرت شبكية العين في اليوم السابع تلفا أكبر للخلايا وفقدانها مقارنة باليوم الثاني ، مما يشير إلى تنكس شبكية أكثر حدة بمرور الوقت بعد نقص التروية وإعادة التروية.
كانت الدرجات النسيجية المرضية الفردية أعلى في معظم طبقات شبكية العين في اليوم السابع مقارنة باليوم الثاني ، مما يدل على زيادة التغيرات المرضية بمرور الوقت. كان إجمالي الدرجات النسيجية أعلى بشكل ملحوظ في اليوم السابع من اليوم الثاني ، مما يشير إلى تقدم ملحوظ في تلف الشبكية.
