يصف هذا البروتوكول طريقة لتحفيز اعتلال عضلة القلب السكري من خلال الجمع بين التغذية الغذائية عالية الدهون وحقن الستربتوتوسين. الهدف هو توفير إطار عمل موثوق به للبحث العلمي في اعتلال عضلة القلب السكري واستكشاف تطبيقات العلاج السريري المحتملة. لقد طورنا طريقة فعالة من حيث التكلفة ومريحة لإنشاء اعتلال عضلة القلب السكري في الفئران المصابة بخلايا عضلة القلب المتضخمة وغير المنظمة وتمزق ألياف عضلة القلب والتنافر والخلل الوظيفي في عضلة القلب وانخفاض وظيفة القلب.
بالمقارنة مع الطرق الأخرى ، فإن بروتوكولنا فعال من حيث التكلفة وفعال وأسهل في التشغيل من خلال الجمع بين نظام غذائي غني بالدهون وحقن الستربتوتوسين. سيساعدنا إنشاء هذا النموذج بشكل أفضل على فهم الآليات الكامنة وراء تطور وتطور اعتلال عضلة القلب السكري. للبدء ، باستخدام حقنة سعة مليلتر واحد ، قم بإعطاء حقن داخل الصفاق بمقدار 30 ملليغرام لكل كيلوغرام من الستربتوتوتوسين ، أو STZ ، يوميا لمدة سبعة أيام للفئران في النظام الغذائي الغني بالدهون ، أو مجموعة HFD / STZ.
لقياس مستوى الجلوكوز في الدم ، بعد أسبوع واحد من الحقن النهائي ، ضع الماوس بعناية على جهاز تقييد ، مع التأكد من تمديد ذيله بالكامل إلى الخارج. قم بتعقيم موقع جمع الدم على الذيل جيدا باستخدام مسحة كحولية بنسبة 70٪. بعد ذلك ، أدخل الإبرة ذات الرأس الحاد في وريد الذيل ، وتقدم من الحافة باتجاه القاعدة إلى عمق يتراوح من ثلاثة إلى أربعة ملليمترات.
بمجرد وضع الإبرة ، اضغط برفق على الجزء العلوي من الذيل لتحفيز تدفق الدم. ضع الدم بحذر على شريط اختبار ، مما يسمح له بالامتصاص بالكامل. انتظر حتى يعرض مقياس الجلوكوز قراءة الجلوكوز في الدم.
بالنسبة لاختبار تحمل الجلوكوز عن طريق الفم ، أو OGTT ، صيام كل فأر طوال الليل لمدة 14 ساعة مع السماح بالوصول غير المقيد إلى الماء. تحضير ما يقرب من 10 مل من محلول الجلوكوز بنسبة 20٪. إعطاء جرعة غرام واحد لكل كيلوغرام عن طريق الفم لكل فأر خلال OGTT.
مراقبة مستويات الجلوكوز في الدم عند صفر و 15 و 30 و 60 و 120 دقيقة بعد إعطاء الجلوكوز. أظهرت الفئران في مجموعة HFD / STZ ذروة في وزن الجسم في 12 أسبوعا ، وهي أعلى بكثير من مجموعة ND. بعد إعطاء STZ ، انخفض وزن جسم مجموعة HFD / STZ ، بينما أظهرت مجموعة ND زيادة مطردة على مدى 12 أسبوعا.
حافظت مجموعة HFD / STZ على مستويات جلوكوز عشوائية في الدم أعلى بكثير من مجموعة ND طوال فترة التغذية. كان منحنى OGTT أعلى بشكل ملحوظ لمجموعة HFD / STZ من مجموعة ND ، حيث بلغت كلتا المجموعتين ذروتها عند 15 دقيقة قبل الانخفاض. كانت مستويات الأنسولين في الدم في مجموعة ND أعلى في البداية مما كانت عليه في مجموعة HFD خلال الأسابيع ال 12 الأولى ، ولكن تم عكسها بعد إعطاء STZ لإجراء تقييمات تخطيط صدى القلب ، وضع الفأر المخدر من مجموعة STZ / HFD أو ND على وسادة تسخين.
قم بتثبيت مخالب الماوس في قطب كهربائي لضمان وضع ضعيف مستقر. قم بإزالة فرو الفأر من الصدر باستخدام كريم إزالة الشعر ، ثم ضع الجل بالموجات فوق الصوتية على منطقة الصدر المكشوفة. للحصول على رؤية مثالية للمحور الطويل للبطين الأيسر ، ضع مسبار 50 ميغاهرتز على الجانب الأيسر من صدر الفأر.
قم بتدوير المسبار عكس اتجاه عقارب الساعة بين 15 درجة و 45 درجة بالنسبة للخط العظمي الأيسر ، مع محاذاة الشق باتجاه الكتف الأيمن. اضبط المحور Z والمحور Y لضمان صورة واضحة في الوضع B. بعد ذلك ، اضغط على الوضع M مرتين لعرض خط القياس.
ضع خط القياس على مستوى العضلة الحليمية ، ثم قم بقياس ثلاث ضربات قلب متتالية على الأقل للدقة وانقر فوق حفظ المقطع لحفظ الحلقة السينمائية في السلسلة. تحديد البعد الانقباضي النهائي في المرحلة المحاذاة لموجة ECGT والبعد الانبساطي النهائي في المرحلة المتوافقة مع موجة ECGR. بعد ذلك ، قم بإمالة وسادة التشغيل ، وخفض الزاوية اليسرى العليا ورفع الزاوية اليمنى السفلية.
اضبط المسبار على طول اتجاه قمة القلب ، بالتوازي مع المحور الطويل للقلب ، للحصول على عرض عبر القمي من أربع غرف. بعد ضبط الحجم واتجاه أخذ العينات ، قم بتسجيل معلومات ديناميكية الدم للصمام التاجي لالتقاط قياسات الموجة E و A. أعد الفأر المسترد إلى قفص المنزل ، الموجود في بيئة خاضعة للرقابة مع دورة ضوء وظلام مدتها 12 ساعة عند أسبوع الصفر و 12 أسبوعا من النقطة.
أظهرت القلوب في مجموعة HFD / STZ خللا وظيفيا انقباضيا وانبساطيا ، مع انخفاض السعة في الحاجز بين البطينين ونبض الجدار الخلفي للبطين الأيسر مقارنة بمجموعة ND.
