Ce protocole décrit une méthode pour induire une cardiomyopathie diabétique en combinant une alimentation riche en graisses et des injections de streptozotocine. L’objectif est de fournir un cadre fiable pour la recherche scientifique sur la cardiomyopathie diabétique et d’explorer les applications potentielles des traitements cliniques. Nous avons développé une méthode rentable et pratique pour créer une cardiomyopathie diabétique chez des souris présentant des cardiomyocytes élargis et désorganisés, une rupture des fibres myocardiques, une dissonation, un dysfonctionnement myocardioal et une fonction cardio réduite.
Comparé à d’autres méthodes, notre protocole est rentable, efficace et plus facile à utiliser en combinant un régime riche en graisses et des injections de streptozotocine. La mise en place de ce modèle nous aidera à mieux comprendre les mécanismes sous-jacents au développement et à la progression de la cardiomyopathie diabétique. Pour commencer, à l’aide d’une seringue d’un millilitre, administrez des injections intrapéritonéales de 30 milligrammes par kilogramme de streptozotocine, ou STZ, par jour pendant sept jours aux souris du groupe riche en graisses, ou HFD/STZ.
Pour mesurer la glycémie, une semaine après l’injection finale, positionnez soigneusement la souris sur un dispositif de retenue, en vous assurant que sa queue est complètement déployée vers l’extérieur. Désinfectez soigneusement le site de prélèvement de sang sur la queue avec un tampon d’alcool à 70 %. Ensuite, insérez l’aiguille à pointe pointue dans la veine de la queue, en avançant de la pointe vers la base jusqu’à une profondeur de trois à quatre millimètres.
Une fois l’aiguille positionnée, pressez doucement le haut de la queue pour stimuler la circulation sanguine. Appliquez soigneusement le sang sur une bandelette de test, en lui permettant d’être complètement absorbé. Attendez que le glucomètre affiche la lecture de la glycémie.
Pour le test de tolérance au glucose oral, ou OGTT, faites jeûner chaque souris pendant la nuit pendant 14 heures tout en permettant un accès illimité à l’eau. Préparez environ 10 millilitres d’une solution de glucose à 20 %. Administrer une dose d’un gramme par kilogramme par voie orale à chaque souris pendant l’HGPO.
Surveillez la glycémie à zéro, 15, 30, 60 et 120 minutes après l’administration du glucose. Les souris du groupe HFD/STZ ont montré un pic de poids corporel à 12 semaines, significativement plus élevé que le groupe ND. Après l’administration de STZ, le poids corporel du groupe HFD/STZ a diminué, tandis que le groupe ND a affiché une augmentation constante sur 12 semaines.
Le groupe HFD/STZ a maintenu des taux de glycémie aléatoire significativement plus élevés que le groupe ND tout au long de la période d’alimentation. La courbe OGTT était significativement plus élevée pour le groupe HFD/STZ que pour le groupe ND, les deux groupes atteignant un pic à 15 minutes avant de décliner. Les taux sériques d’insuline dans le groupe ND étaient initialement plus élevés que dans le groupe HFD pendant les 12 premières semaines, mais se sont inversés après l’administration de STZ Pour effectuer des évaluations échocardiographie, placez la souris anesthésiée du groupe STZ / HFD ou ND sur un coussin chauffant.
Fixez les griffes de la souris à une électrode pour assurer une position couchée stable. Retirez la fourrure de la souris de la poitrine à l’aide d’une crème dépilatoire, puis appliquez un gel à ultrasons sur la zone exposée de la poitrine. Pour obtenir une vue optimale du grand axe du ventricule gauche, placez la sonde de 50 mégahertz sur le côté gauche de la poitrine de la souris.
Tournez la sonde dans le sens inverse des aiguilles d’une montre entre 15 degrés et 45 degrés par rapport à la ligne parasternale gauche, en alignant l’encoche vers l’épaule droite. Ajustez l’axe Z et l’axe Y pour obtenir une image claire en mode B. Ensuite, appuyez deux fois sur le mode M pour afficher la ligne de mesure.
Positionnez la ligne de mesure au niveau du muscle papillaire, puis mesurez au moins trois battements cardiaques consécutifs pour plus de précision et appuyez sur enregistrer le clip pour enregistrer le cinéloop dans la série. Identifiez la dimension end-systolique à la phase alignée avec l’onde ECGT et la dimension end-diastolique à la phase alignée avec l’onde ECGR. Ensuite, inclinez le pavé de commande, en abaissant le coin supérieur gauche et en relevant le coin inférieur droit.
Ajustez la sonde dans la direction de l’apex cardiaque, parallèlement à l’axe long du cœur, pour obtenir une vue transapicale à quatre chambres. Après avoir ajusté le volume et la direction de l’échantillonnage, enregistrez les informations hémodynamiques de la valve mitrale pour capturer les mesures des ondes E et A. Remettez la souris récupérée dans la cage de la maison, logée dans un environnement contrôlé avec un cycle lumière-obscurité de 12 heures à zéro semaine et 12 points de temps.
Les cœurs du groupe HFD/STZ présentaient une dysfonction systolique et diastolique, avec une amplitude réduite du septum interventriculaire et une pulsation de la paroi postérieure du ventricule gauche par rapport au groupe ND.
