Bu protokol, yüksek yağlı diyetle besleme ve streptozotosin enjeksiyonlarını birleştirerek diyabetik kardiyomiyopatiyi indüklemek için bir yöntemi tanımlar. Amaç, diyabetik kardiyomiyopati ile ilgili bilimsel araştırmalar için güvenilir bir çerçeve sağlamak ve potansiyel klinik tedavi uygulamalarını araştırmaktır. Genişlemiş, düzensiz kardiyomiyositler, miyokardiyal lif rüptürü, dissonasyon, miyokardiyoal disfonksiyon ve azalmış kardiyo fonksiyonu olan farelerde diyabetik kardiyomiyopati oluşturmak için uygun maliyetli ve uygun bir yöntem geliştirdik.
Diğer yöntemlerle karşılaştırıldığında, protokolümüz uygun maliyetli, verimli ve yüksek yağlı bir diyet ve streptozotosin enjeksiyonlarını birleştirerek kullanımı daha kolaydır. Bu modelin kurulması, diyabetik kardiyomiyopatinin gelişimi ve ilerlemesinin altında yatan mekanizmaları daha iyi anlamamıza yardımcı olacaktır. Başlamak için, bir mililitrelik bir şırınga kullanarak, yüksek yağlı diyetteki veya HFD / STZ grubundaki farelere yedi gün boyunca günde kilogram streptozotosin veya STZ başına 30 miligram intraperitoneal enjeksiyonlar uygulayın.
Kan şekeri seviyesini ölçmek için, son enjeksiyondan bir hafta sonra, fareyi dikkatlice bir kısıtlama cihazının üzerine yerleştirin ve kuyruğunun tamamen dışarı doğru uzatıldığından emin olun. Kuyruktaki kan alma bölgesini %70 alkollü bir bezle iyice sterilize edin. Daha sonra, keskin uçlu iğneyi kuyruk damarına sokun ve uçtan tabana doğru üç ila dört milimetre derinliğe kadar ilerleyin.
İğne yerleştirildikten sonra, kan akışını uyarmak için kuyruğun üst kısmını hafifçe sıkın. Kanı dikkatlice bir test şeridine uygulayın ve tamamen emilmesine izin verin. Glikoz ölçüm cihazının kan şekeri ölçümünü göstermesini bekleyin.
Oral glukoz tolerans testi veya OGTT için, suya sınırsız erişime izin verirken her fareyi gece boyunca 14 saat boyunca aç bırakın. Yaklaşık 10 mililitre% 20'lik bir glikoz çözeltisi hazırlayın. OGTT sırasında her fareye oral olarak kilogram başına bir gram doz uygulayın.
Glikoz uygulamasından sonra sıfır, 15, 30, 60 ve 120 dakika sonra kan şekeri seviyelerini izleyin. HFD / STZ grubundaki fareler, ND grubundan önemli ölçüde daha yüksek olan 12 haftada vücut ağırlığında bir zirve gösterdi. STZ uygulamasını takiben, HFD / STZ grubunun vücut ağırlığı azalırken, ND grubu 12 hafta boyunca sabit bir artış gösterdi.
HFD / STZ grubu, beslenme periyodu boyunca ND grubundan önemli ölçüde daha yüksek rastgele kan şekeri seviyelerini korudu. OGTT eğrisi, HFD / STZ grubu için ND grubuna göre anlamlı derecede yüksekti ve her iki grup da düşmeden 15 dakika önce zirve yaptı. ND grubundaki serum insülin seviyeleri başlangıçta ilk 12 hafta boyunca HFD grubundan daha yüksekti, ancak STZ uygulamasından sonra tersine döndü Ekokardiyografi değerlendirmeleri yapmak için, STZ / HFD veya ND grubundan anestezi uygulanmış fareyi bir ısıtma yastığına yerleştirin.
Sabit bir sırtüstü pozisyon sağlamak için farenin pençelerini bir elektroda sabitleyin. Tüy dökücü krem kullanarak farenin kürkünü göğsünden çıkarın, ardından açıkta kalan göğüs bölgesine ultrasonik jel uygulayın. En uygun sol ventrikül uzun eksen görünümünü elde etmek için, 50 megahertz probunu farenin göğsünün sol tarafına yerleştirin.
Probu sol parasternal çizgiye göre saat yönünün tersine 15 derece ile 45 derece arasında döndürün ve çentiği sağ omuza doğru hizalayın. Net bir B modu görüntüsü sağlamak için Z eksenini ve Y eksenini ayarlayın. Ardından, ölçüm çizgisini görüntülemek için M moduna iki kez basın.
Ölçüm çizgisini papiller kas seviyesine yerleştirin, ardından doğruluk için en az üç ardışık kalp atışını ölçün ve cineloop'u seriye kaydetmek için klibi kaydet'e dokunun. EKGT dalgası ile hizalanmış fazdaki son sistolik boyutu ve ECGR dalgası ile hizalanmış fazdaki diyastol sonu boyutu tanımlayın. Ardından, sol üst köşeyi indirerek ve sağ alt köşeyi kaldırarak çalıştırma pedini eğin.
Transapikal dört odacıklı bir görünüm elde etmek için probu, kalbin uzun eksenine paralel olarak kardiyak apeks yönü boyunca ayarlayın. Hacmi ve örnekleme yönünü ayarladıktan sonra, E ve A dalgası ölçümlerini yakalamak için mitral kapak hemodinamik bilgilerini kaydedin. Kurtarılan fareyi, sıfır hafta ve 12 haftalık zaman noktalarında 12 saatlik aydınlık-karanlık döngüsü ile kontrollü bir ortamda bulunan ev kafesine geri koyun.
HFD / STZ grubundaki kalpler, ND grubuna kıyasla interventriküler septumda ve sol ventrikül arka duvar nabzında azalmış amplitüd ile sistolik ve diyastolik disfonksiyon gösterdi.
