زرع الخلايا عالية الدقة في الزرد الجنيني واليرقات

يدرس مختبرنا كيفية تشكيل الاتصال الخلوي في الجهاز العصبي أثناء التطوير والتجديد. ندرس كيف تؤثر الإشارات البيئية على السلوك العصبي باستخدام زرع الخلايا لمعالجة كيفية تغير سلوكها عند وضعها في بيئات مكانية أو زمانية جينية مختلفة. في حين أن عملية الزرع شائعة في أجنة الزرد، إلا أنها تجرى بشكل عام خلال مرحلتي البلاستولا والمعدة عندما تكون الخلايا غير متمايزة إلى حد كبير.

هذا أمر مهم لتوليد الفسيفساء الجينية ، لكنه يحد من قدرة التقنية على استجواب كيفية تأثير ديناميكيات الإشارات الزمانية المكانية على التطور بعد هذه المراحل. هنا ، نقدم بروتوكولا يسمح بزرع الخلايا ، بما في ذلك الخلايا العصبية المتمايزة في الأجنة واليرقة حتى سبعة أيام على الأقل بعد الإخصاب. يمكننا زرع أقل من خلية واحدة بدقة مكانية وزمانية عالية واستخدام العلامات الفلورية الجينية لتتبع الخلايا المزروعة على المدى الطويل في المضيف.

يسمح لنا هذا البروتوكول بتغيير البيئة المكانية والزمانية الجينية للخلايا في العديد من مراحل النمو المختلفة ، مما يفتح فرصا جديدة لفحص مبادئ إشارات النمط أثناء التطوير والتجديد.