Трансплантация клеток высокого разрешения у эмбрионов и личинок рыбок данио рерио

Наша лаборатория изучает, как клеточная связь формируется в нервной системе во время развития и регенерации. Мы изучаем, как сигналы окружающей среды влияют на поведение нейронов с помощью трансплантации клеток, чтобы понять, как их поведение меняется, когда они помещаются в различные генетические, пространственные или временные среды. В то время как трансплантация распространена у эмбрионов рыбок данио, обычно она проводится на стадиях бластулы и гаструлы, когда клетки в значительной степени недифференцированы.

Это ценно для создания генетической мозаики, но ограничивает возможности метода исследования того, как пространственно-временная сигнальная динамика влияет на развитие за пределами этих стадий. Здесь мы представляем протокол, который позволяет проводить трансплантацию клеток, включая дифференцированные нейроны у эмбрионов и личинок, по крайней мере, через семь дней после оплодотворения. Мы можем пересадить всего одну клетку с высоким пространственным и временным разрешением и использовать генетическое флуоресцентное мечение для долгосрочного отслеживания трансплантированных клеток у животного-хозяина.

Этот протокол позволяет нам изменять генетическое, пространственное и временное окружение клеток на самых разных стадиях развития, открывая новые возможности для изучения принципов передачи сигналов стиля во время развития и регенерации.