Transplantation cellulaire à haute résolution chez le poisson-zèbre embryonnaire et larvaire

Notre laboratoire étudie comment la connectivité cellulaire est structurée dans le système nerveux au cours du développement et de la régénération. Nous examinons comment les signaux environnementaux influencent le comportement neuronal en utilisant la transplantation cellulaire pour déterminer comment leur comportement change lorsqu’ils sont placés dans différents environnements génétiques, spatiaux ou temporels. Bien que la transplantation soit courante chez les embryons de poisson-zèbre, elle est généralement effectuée pendant les stades de blastula et de gastrula, lorsque les cellules sont largement indifférenciées.

Ceci est précieux pour générer des mosaïques génétiques, mais cela limite la capacité de la technique à interroger comment la dynamique de signalisation temporelle spatiale influence le développement au-delà de ces étapes. Ici, nous présentons un protocole qui permet la transplantation de cellules, y compris de neurones différenciés chez les embryons et les larves jusqu’à au moins sept jours après la fécondation. Nous pouvons transplanter aussi peu qu’une cellule avec une résolution spatiale et temporelle élevée et utiliser le marquage génétique fluorescent pour le suivi à long terme des cellules transplantées chez l’animal hôte.

Ce protocole nous permet de modifier l’environnement génétique, spatial et temporel des cellules à de nombreux stades de développement différents, ouvrant ainsi de nouvelles opportunités pour examiner les principes de signalisation du style au cours du développement et de la régénération.