用生命染增强荧光成像瘤在Barrett食管诊断

摘要

重要的染料增强荧光成像（VFI）是生物体内的技术了一种新的，结合高分辨率成像上皮外源外用荧光对比，从而突出腺体形态及食管远端划定瘤（高档异型增生和癌症）。

摘要

从肿瘤在体内分化良性上皮化生Barrett食管（BE）的能力仍然是困难的，因为这两种组织类型可以是平的，并没有什么区别与单纯的白色光成像。其结果是，一个模式，突出腺架构将是有益的在食管远端良性上皮肿瘤鉴别。 VFI是一个使用外源性外用荧光造影剂来界定高档异型增生和癌症良性上皮细胞新技术。具体地，荧光图像提供50至100微米的空间分辨率和视高达2.5厘米的字段，允许内镜形象化腺形态。一旦激发，经典巴雷特化生表现为连续，均匀间隔的腺体和整体均匀的形态;与此相反，肿瘤组织出现拥挤腺体框架完全闭塞。在这里，我们提供的概述仪器仪表和枚举这种新技术的协议。虽然VFI提供了一次胃肠病与可疑组织的腺体架构，细胞不典型增生不能用这种方式解决。因此，人们不能形态学通过该成像方式区分巴雷特化生从与低度不典型增生。通过权衡在与视图更大字段分辨率的降低，该成像系统可用于在至少一个红色标记成像器件对目标和活检可疑病灶;然而，如果精度的措施是令人鼓舞的，VFI可能成为肿瘤的诊断（定义为高档异型增生或癌症）在食管远端的标准成像技术。

引言

在过去的四十年，食管腺癌（EAC）的发病率显著增加^1,2;但由于后期诊断，五年生存率小于^20％3。在BE内镜检查的现行标准，前体选管会，是白光内镜与段的随机四quandrant镊子'活组织切片检查。不幸的是，这种技术常常射门瘤形成，它可以是平的，细微且难以区分的标准白光成像^4。虽然已经在使用激光共聚焦显微镜突出体内细胞功能的成功，病变仍可由于视图的⁵场减少错过。有一个“桥梁”技术，它可以突出区域进行进一步的共聚焦显微成像将是显着的价值。

因此，增强红旗成像方式，提高到精华素的能力T和活检早期肿瘤在BE将有助于检测选管会在早期，可医治的阶段，并可能导致更有效的治疗，并随后提高生存率。 VFI是一种新型的技术，它结合了高解析度成像上皮外源外用荧光造影，原黄素，突出腺体形态并划定肿瘤（高度异型增生和癌症）在食管远端在改善体内诊断⁶的希望。经原黄素，该申请后不久，浓缩细胞核内的激发下，荧光图像提供50至100微米的空间分辨率和视高达2.5厘米的字段，允许内镜形象化腺形态。作为一个结果，这个方法使肠胃病学区分经典巴雷特化生，其中有连续的，均匀间隔的腺体和整体均匀的形态，从可以与瘤形成，其具有obliteration的腺体结构。在这里，我们描述了这种新技术的协议与多光谱内窥镜，并提供有代表性的结果证明该设备的描述中良性上皮化生的形态转变为高度异型增生和癌症的效用。

研究方案

注：签署了知情同意的患者。此外，这项研究已在符合人类福祉的所有机构，国家和国际准则进行的。

1，准备电脑

1. 打开笔记本电脑，并连接USB从DVI2USB采集卡。

2，准备监视器

1. 连接DVI缆线，以监测和画中画，以允许内窥镜医生从这些画面观看视频，而不是计算机。
2. 确保站在显示器上，并设置为DVI。
3. 连接画中画奥林巴斯系统背面，然后按奥林巴斯系统上的输入按钮来查看图像的大型显示器安装在墙壁上。

3，激光二极管驱动器设置

1. 检查以确保激光二极管驱动器为OFF。它应该只被打开了几分钟进行成像之前。

e_title“> 4。电源板

1. 插上笔记本电脑，处理器，激光二极管驱动器，DVI分配器，并epiphan采集卡插入电源板。

（5）运行MDE广角上的笔记本电脑桌面

1. 命中“当前文件夹”。
2. 输入病人的数量和缩写，然后按“创建病人文件夹”。

6，准备盖和过滤器

1. 当处理过滤器，请始终使用手套和的Kimwipes，尽量减少油污和杂物的过滤器转移。纱布或酒精棉签可能留下纤维，可以与成像干涉。
2. 放置几天的Kimwipes到一个表创建一个平台，放下过滤器和瓶盖。这种消毒面积应在手术过程中容易接触到的肠胃病。
3. 放下过滤器和瓶盖，并保持关闭的Kimwipes由使用的过程中。

7，病人的准备

1. 对使用病人的同意的VFI和原黄素染料抵达到内套件之前。
2. 位置为病人上消化道内镜检查程序。
3. 继续利用多光谱数字显微镜^（MDM）7标准的白色光成像。

8，插入和喷雾原黄素

1. 用白色光成像完成后，插入和喷雾原黄素染料在感兴趣的组织。 1-5毫米，应足以取决于Barrett的组织的面积。通过在这一步喷涂原黄素染料，有足够的时间（至少1分钟），给出了VFI前有足够的组织吸收。原黄素，这是根据从美国食品药品管理局（IND 102,217）的研究性新药申请涵盖的是，申请后不久，集中细胞核内的荧光造影剂。虽然VFI无法解析个体细胞形态学，当激光二极管平底锅以上的组织时，反射光使内镜欣赏整体腺morpholoGY。

9，打开激光二极管

1. 接通激光二极管。这样做至少有2分钟的成像开始之前。

10，准备内窥镜的VFI

1. 完全退出内窥镜。
2. 前处理内窥镜，确保助手有两对手套上。
3. 已内镜保持内窥镜的辅助下一个是谁给的Kimwipe平台上面详细的面前。
4. 用的Kimwipes，有助理清洗内窥镜的尖端。一定要轻轻擦拭表面，并沿着清洁内窥镜的侧几厘米更容易处理。
5. 清洁后，有助理处置外一双手套的。
6. 有助理提上了过滤器。插入过滤器上的短圆筒状突出部插入在内窥镜的其互补孔。保持内窥镜垂直，以帮助处理。
7. 抱着FILT呃到位，滑动盖在过滤器并将它推下来在内窥镜的尖端。确保盖子是安全的，完全推在与内窥镜冲洗的边缘。确保盖的唇稍微延伸超过内窥镜的前端。最后，确保过滤器仍然存在，并与内窥镜的尖端冲洗。

11，将内窥镜回食道和图像

12，从食道取出内窥镜

1. 使用的Kimwipes小心地将盖和滤除内窥镜。扔掉帽，并清洁过滤器的下一个案例。

13，清洗过滤器

1. 轻轻地清洁过滤器的Kimwipes。
2. 填补小杯的CyDex和淹没过滤器12分钟。每隔几分钟把过滤过。
3. 轻轻地清洁过滤器的Kimwipes。
4. 淹没滤波器，此时在无​​菌水中。 5分钟后，用水枪bOTTLE和轻轻一喷无菌水在过滤器。
5. 在过滤器上几的Kimwipes，让它干燥。
6. 一旦干燥，地点在之间的Kimwipes储存容器。

结果

图1B描绘了经典的Barrett食管，没有发育不良正常鳞状上皮所包围的边框。与较平坦的鳞状组织，其圆周分布，并用蓝色箭头表示开始，无光泽荧光的均匀区域的存在与无腺体结构。绿色箭头表示周围的鳞状上皮组织的圆形绿线。本大纲是神器从内窥镜的上限所致。移动到位于中心位置的Barrett的组织，腺体结构可以被定义为周围较暗的管腔绿色荧光。虽然一些腺被拉长，有相邻的腺体...

讨论

与标准的内镜检查，在BE肿瘤常常被漏诊^8，因为良性上皮化生可以从高度异型增生和腺癌难以区别。作为一种工具，将更好地使胃肠病来解决这个问题目前无法避免的错误，重要的染料增强荧光成像突出了组织的腺体形态从而提供了一个独特的功能来区分组织类型。此外，通过提供的视图长达2.5厘米的领域，VFI使内镜医师能够有效地和有系统地平移，在整个食管远端，使可疑病变更为突?...

材料

Name	Company	Catalog Number	Comments
Filter*	Schott North America, Inc., Duryea, Pennsylvania	Not Applicable	495-nm long-pass filter
Halo Cap – Medium*	Barrx Medical	CP-002A
Processor*	Pentax	EPK-i
Multispectral Digital Microscope**	Not Applicable	Not Applicable
Kimwipes	Kimberly-Clark	KimTech Science	S-8115
Cidex	Advanced Sterilization Products	CIDEX OPA Solution
Proflavine hemisulfate (0.01% w/v)			FDA (IND 102,217)
Laser Diode*	Nichia Corporation	Not Applicable	455-nm
Image Capture*	Labview	Not Applicable
Spray Catheter	Olympus	Not Applicable
*Equipment specifics within Reference 6. **Equipment specifics within Reference 7