Диагностика Neoplasia в пищевода Барретта, используя Vital-красителя Enhanced флуоресцентных изображений

Резюме

Vital-краситель усиливается флуоресценции томография (VFI) является новым в технике естественных условиях, что сочетает в себе эпителиальных изображений в высоком разрешении с экзогенной местного флуоресцентного отличие выделить железистой морфологии и разграничить неоплазии (дисплазии и рака) в дистальной части пищевода.

Аннотация

Способность различать доброкачественные метаплазию в пищевода Барретта (BE) от новообразований в естественных условиях по-прежнему трудно, как оба типа ткани могут быть плоскими и неразличимы с белого света только визуализации. В результате модальность, который подчеркивает железистой архитектуру бы полезно различать неоплазии от доброкачественной эпителия в дистальной части пищевода. VFI роман техника, которая использует экзогенный актуальные флуоресцентный контрастное вещество, чтобы очертить дисплазии и рака от доброкачественной эпителия. В частности, флуоресцентные изображения обеспечивают пространственное разрешение 50 до 100 мкм и поле зрения до 2,5 см, что позволяет эндоскопистов визуализировать железистой морфологии. При возбуждении, метаплазия классический Барретта появляется как непрерывные, равномерно расположенных желез и общую однородную морфологию; в отличие, опухолевой ткани появляется переполнен полной облитерацией железистой рамках. Здесь мы предлагаем обзорприборы и перечислить протокол этой новой техники. В то время как VFI позволяет гастроэнтеролог с железистой архитектуры подозрительной ткани, клеточная дисплазия не могут быть решены с этой модальности. Таким образом, никто не может морфологически различать метаплазию Барретта от BE с низким дисплазии через этот изображения модальности. По компромисса уменьшение разрешения с большей поле зрения, эта система визуализации может быть использован, по крайней мере, как красно-флага изображений устройства к цели и биопсии подозрительных поражений; тем не менее, если меры точности являются перспективными, VFI может стать стандартом метод визуализации для диагностики новообразований (определяется как любой дисплазии или рака) в дистальной части пищевода.

Введение

За последние сорок лет, заболеваемость аденокарциномы пищевода (EAC) значительно увеличилось ^1,2; еще из-за поздней диагностики, выживаемость пятилетний меньше 20% ^3. Текущий стандарт эндоскопической наблюдения в ВЕ, предшественник EAC, является белый свет эндоскопия с биопсией случайных четыре quandrant щипцы »сегмента. К сожалению, эта методика часто пропускает неоплазии, которые могут быть плоскими, тонкими и трудно отличить от стандартного белого света изображений ^4. Хотя был достигнут успех в помощью конфокальной лазерной микроскопии, чтобы выделить клеточные функции в живом организме, поражения еще могут быть пропущены из-за уменьшения поля зрения ^5. Имея технологии "мост", который может выделить области для дальнейшего конфокальной микроскопии microendoscopic будет заметно ценным.

Следовательно, Enhanced Imaging модальность красный флаг, что улучшает способность щитт и биопсия рано неоплазии в ВЕ будет играть важную роль в обнаружении EAC на ранней, излечимой стадии и может привести к более эффективному лечению и впоследствии улучшению показателей выживаемости. VFI является новым методом, который сочетает в себе высокое разрешение эпителиальных изображений с экзогенной местного флуоресцентного контраста, профлавина, чтобы выделить железистой морфологии и разграничить неоплазии (дисплазии и рака) в дистальной части пищевода в надежде на улучшение диагноз в естественных условиях ^6. При возбуждении в профлавина, который концентрируется в ядрах клеток вскоре после применения, флуоресцентные изображения обеспечивают пространственное разрешение 50 до 100 мкм и поле зрения до 2,5 см, что позволяет эндоскопистов визуализировать железистой морфологии. В результате, этот подход позволяет гастроэнтерологов отличить метаплазию классический Барретта, который имеет непрерывные, равномерно расположенных желез и общую однородную морфологию, от BE с неоплазии, которая имеет obliteraния железистой архитектуры. Здесь мы опишем протокол этой новой техники с многоспектрального эндоскопа, и получения репрезентативных результатов, чтобы продемонстрировать полезность этого устройства в изображающая морфологический переход от доброкачественной метаплазии к дисплазии высокой степени и раком.

протокол

ПРИМЕЧАНИЕ: Информированное согласие было получено от пациентов. Кроме того, это исследование было проведено с соблюдением всех институциональных, национальных и международных руководящих принципов для благосостояния человека.

1. Подготовьте компьютер

1. Включите ноутбук и подключиться USB от DVI2USB Capture Card.

2. Подготовьте монитор

1. Подключите кабель DVI для мониторинга и PinP, чтобы позволить эндоскопист, чтобы посмотреть видео с этих экранов, а не компьютер.
2. Убедитесь, что положение монитор включен и установлен на DVI.
3. Подключите PinP на задней панели системы Olympus затем нажмите кнопку ввода в системе Olympus для просмотра изображения на большом мониторе, установленного на стене.

3. Лазерный диод с настройками драйвера

1. Убедитесь, водитель лазерный диод выключен. Следует оказалось только на пару минут, прежде чем изображения не производится.

e_title "> 4. удлинитель

1. Подключите ноутбук, процессор, водителя лазерного диода, сплиттер DVI и Epiphan карты захвата в сетевой фильтр.

5. Запустите MDE Widefield на ноутбуке Desktop

1. Hit 'Текущая папка ".
2. Введите номер и инициалы пациента и нажмите "Создать папку пациента.

6. Подготовка Cap Фильтры

1. При обращении фильтр, всегда используйте перчатки и Kimwipes минимизировать передачу нефти и мусора к фильтру. Марлевые или алкоголь тампоны могут оставить волокна, которые могут препятствовать визуализации.
2. Поместите несколько Kimwipes на стол, чтобы создать платформу сложить фильтр и крышку. Это продезинфицировало зону должны быть легко доступны к гастроэнтерологу во время процедуры.
3. Лягте фильтр и крышку и держать Kimwipes рядом для использования во время процедуры.

7. Подготовка пациента

1. Согласие пациента на использованиеиз VFI и профлавина красителя до прибытия к эндо люкс.
2. Статус пациента для верхней процедуры эндоскопии.
3. Продолжайте стандартного белого света визуализации с использованием мультиспектральных цифровой микроскоп (MDM) ^7.

8. Вставьте и спрей профлавина

1. После окончания с изображениями белого света, вставлять и спрей профлавина краситель над интересующей ткани. 1-5 мм должно быть достаточно в зависимости от участка ткани в Барретта. По распыления профлавина краситель на этом этапе, достаточно времени (по крайней мере 1 мин) дается достаточное поглощения тканями до VFI. Профлавина, что рассматривается в рамках исследуемого нового применения снадобья от FDA (IND 102217), является люминесцентная контрастное вещество, которое концентрируется в ядрах клеток вскоре после применения. Хотя VFI не может разрешить индивидуальный клеточной морфологии, когда лазерный диод кастрюли над ткани, отраженный свет позволяет эндоскописту оценить общую железистой morpholoгы.

9. Включите лазерного диода

1. Включите лазерного диода. Делайте это по крайней мере 2 мин до начала визуализации.

10. Подготовка эндоскоп для VFI

1. Вывод эндоскоп полностью.
2. До установки эндоскоп, убедитесь, что помощник имеет две пары перчаток.
3. Были эндоскопист провести эндоскоп перед помощник, который находится рядом с платформой Kimwipe описано выше.
4. С Kimwipes, есть помощник очищает кончик эндоскопа. Убедитесь в том, чтобы очистить переднюю поверхность мягко, а также очистить несколько сантиметров вдоль стороны эндоскопа для облегчения обработки.
5. После очистки, есть помощник распоряжаться внешней пары перчаток.
6. Были помощник положил на фильтре. Вставьте короткий цилиндрический выступ на фильтре на дополнительный отверстие в эндоскопа. Держите эндоскоп вертикали, чтобы помочь процессу.
7. Держа FILTэр на месте, сдвинуть колпачок на фильтре и толкать его вниз над кончиком эндоскопа. Убедитесь, что крышка является безопасным и толкнул полностью на с краями на одном уровне с эндоскопа. Убедитесь, что кромка крышки слегка проходит над концом эндоскопа. Наконец, убедитесь, что фильтр по-прежнему на месте и на одном уровне с кончика эндоскопа.

11. Вставьте эндоскопа обратно в пищевод и изображение

12. Снимите эндоскоп из пищевода

1. Использование Kimwipes осторожно потяните крышку и отфильтровывают эндоскоп. Выбросьте колпачок и очистить фильтр для следующего случая.

13. Чистый фильтр

1. Аккуратно очистите фильтр Kimwipes.
2. Заполните маленькую чашку с CyDex и погрузите фильтр в течение 12 мин. Каждые несколько минут поверните фильтр по.
3. Аккуратно очистите фильтр Kimwipes.
4. Погрузите фильтр, на этот раз в стерильной воде. Через 5 мин использовать шприц бottle и слегка намочите стерильную воду на фильтре.
5. Поместите фильтр на несколько Kimwipes и дайте ему высохнуть.
6. После высыхания, поместить в контейнер для хранения в между Kimwipes.

Результаты

Рисунок 1B изображает классическую пищевода Барретта, не дисплазии окружении на границах нормальной плоского эпителия. Начиная с плоской плоскоклеточного ткани, которая по периферии расположены и указанном синими стрелками, однородная площадь тупой флуоресценции присутств?...

Обсуждение

Со стандартным эндоскопическое наблюдение, неоплазия в ВЕ часто упускается ^8, потому что доброкачественная метаплазия может быть неотличима от дисплазии высокой степени и аденокарциномы. В качестве инструмента, что бы лучше позволить гастроэнтерологов, чтобы исправить эту наст...

Материалы

Name	Company	Catalog Number	Comments
Filter*	Schott North America, Inc., Duryea, Pennsylvania	Not Applicable	495-nm long-pass filter
Halo Cap – Medium*	Barrx Medical	CP-002A
Processor*	Pentax	EPK-i
Multispectral Digital Microscope**	Not Applicable	Not Applicable
Kimwipes	Kimberly-Clark	KimTech Science	S-8115
Cidex	Advanced Sterilization Products	CIDEX OPA Solution
Proflavine hemisulfate (0.01% w/v)			FDA (IND 102,217)
Laser Diode*	Nichia Corporation	Not Applicable	455-nm
Image Capture*	Labview	Not Applicable
Spray Catheter	Olympus	Not Applicable
			*Equipment specifics within Reference 6. **Equipment specifics within Reference 7