Diagnóstico de neoplasia de esôfago de Barrett usando-dye Vital Aprimorado imagens de fluorescência

Resumo

-Dye Vital reforçada imagens de fluorescência (VFI) é um romance em técnica vivo, que combina alta resolução epitelial de imagem com contraste fluorescente tópica exógena para destacar morfologia glandular e delinear neoplasia (displasia de alto grau e câncer) no esôfago distal.

Resumo

A capacidade de diferenciar metaplasia benigna no esôfago de Barrett (BE) de neoplasia in vivo permanece difícil como os dois tipos de tecido pode ser plana e indistinguível com luz branca só imagem. Como resultado, uma modalidade que destaca arquitectura glandular seria útil para discriminar neoplasia benigna do epitélio na parte distal. VFI é uma nova técnica que utiliza um agente de contraste fluorescente tópica exógena para delinear displasia de alto grau e câncer do epitélio benigno. Especificamente, as imagens fluorescentes fornecer resolução espacial de 50 a 100 ^ m e um campo de visão de 2,5 cm, o que permite visualizar endoscopists morfologia glandular. Após a excitação, metaplasia clássico de Barrett surge como contínuos, glândulas uniformemente espaçados e uma morfologia homogênea geral; em contraste, tecido neoplásico aparece cheia de obliteração completa da estrutura glandular. Aqui nós fornecemos uma visão geral doa instrumentação e enumerar o protocolo desta nova técnica. Enquanto VFI oferece um gastroenterologista com a arquitetura glandular de tecido suspeito, displasia celular não pode ser resolvida com esta modalidade. Como tal, não se pode distinguir morfologicamente metaplasia de Barrett do BE com baixo grau Displasia através desta modalidade de imagem. Por trocando uma diminuição na resolução com um maior campo de visão, este sistema de imagem pode ser usado pelo menos como um dispositivo de imagem de bandeira vermelha para alvejar e biópsia de lesões suspeitas; Ainda, se as medidas de precisão são promissores, VFI pode tornar-se a técnica de imagem padrão para o diagnóstico de neoplasia (definidas como displasia de alto grau ou cancro) na parte distal.

Introdução

Ao longo dos últimos quarenta anos, a incidência de adenocarcinoma esofágico (EAC) aumentou significativamente ^1,2; ainda devido ao diagnóstico tardio, a taxa de sobrevivência de cinco anos é inferior a 20% ^3. O padrão atual de vigilância endoscópica em BE, o precursor da EAC, é endoscopia luz branca com biópsias do segmento aleatórios 'fórceps quatro quandrant. Infelizmente, esta técnica muitas vezes perde neoplasia, que pode ser plana, sutil e difícil de se diferenciar em padrão de luz branca de imagem ^4. Embora tenha havido sucesso no uso de microscopia confocal a laser para destacar características celulares in vivo, lesões ainda pode ser perdida devido à diminuição do campo de visão ^5. Ter uma tecnologia de "ponte" que pode destacar as áreas para posterior imagem microendoscópica confocal seria marcadamente valioso.

Por conseguinte, uma modalidade de imagem de bandeira vermelha avançado que melhora a capacidade de TARGEt e biópsia neoplasia no início BE seria um instrumento para detectar a EAC, numa fase curável cedo e poderia levar a um tratamento mais eficaz e, posteriormente, melhorou as taxas de sobrevivência. VFI é uma nova técnica que combina imagens de alta resolução epitelial com exógena tópica fluorescente contraste, proflavina, para destacar a morfologia glandular e delinear neoplasia (displasia de alto grau e câncer) no esôfago distal na esperança de melhorar o diagnóstico in vivo ^6. Após a excitação do proflavina, que se concentra no núcleo das células, logo após a aplicação, as imagens fluorescentes fornecer resolução espacial de 50 a 100 ^ m e um campo de visão de 2,5 cm, o que permite visualizar endoscopists morfologia glandular. Como resultado, esta abordagem permite gastroenterologistas distinguir metaplasia clássico de Barrett, que tem contínuas, glândulas uniformemente espaçados e uma morfologia homogénea em geral, a partir de BE com neoplasia, o qual tem obliteração da arquitetura glandular. Aqui nós descrevemos o protocolo desta nova técnica com um endoscópio multiespectral, e fornecer resultados representativos para demonstrar a utilidade deste dispositivo em descrever a transformação morfológica de metaplasia benigna para displasia de alto grau e câncer.

Protocolo

NOTA: O consentimento informado foi obtido dos pacientes. Além disso, esta pesquisa foi realizada em conformidade com todas as diretrizes institucionais, nacionais e internacionais para o bem-estar humano.

1. Prepare Computador

1. Vire laptop e conecte USB da Placa de Captura DVI2USB.

2. Prepare o Monitor

1. Conecte o cabo DVI para monitorar e PinP para permitir que o endoscopista para ver vídeos a partir dessas telas ao invés do computador.
2. Certifique-se que o monitor está em pé e está previsto para DVI.
3. Conecte PinP a parte de trás do sistema Olympus, em seguida, pressione o botão de entrada no sistema Olympus para ver a imagem no monitor grande montada na parede.

3. Laser Diode Motorista Setting

1. Verifique se o driver de diodo laser é desligado. Ele só deve ser ligado a alguns minutos antes de imagem é realizado.

e_title "> 4. Power Strip

1. Ligue portátil, processador, controlador de diodo laser, DVI splitter, e placa de captura de Epiphan no filtro de linha.

5. Execute MDE Widefield no Desktop Laptop

1. Hit 'Current Folder'.
2. Digite o número e as iniciais do paciente e pressione 'Criar pasta Paciente'.

6. Prepare Cap e Filtro

1. Ao manusear filtro, sempre utilizar luvas e Kimwipes para minimizar a transferência de óleo e detritos para o filtro. Gaze ou álcool cotonetes pode deixar fibras que podem interferir com a imagem.
2. Coloque algumas Kimwipes sobre uma mesa para criar uma plataforma para estabelecer o filtro e tampa. Esta área desinfectada deve ser facilmente acessível para o gastroenterologista durante o procedimento.
3. Deite-se o filtro e tampa e manter Kimwipes por perto para uso durante o procedimento.

7. Preparação Paciente

1. Consentimento paciente em usode VFI e corante proflavina antes de chegar à suíte endo.
2. Posição do paciente para o procedimento de endoscopia digestiva alta.
3. Prossiga com a imagem de luz branca padrão, utilizando um microscópio digital multiespectral (MDM) ^7.

8. Insira e Spray proflavina

1. Depois de terminar com a imagem de luz branca, inserir e spray corante proflavina sobre o tecido de interesse. 1-5 mm deve ser suficiente, dependendo da área de tecido Barrett. Ao pulverizar o corante proflavina neste passo, tempo suficiente (pelo menos 1 minuto) é determinada por absorção de tecido suficiente antes VFI. Proflavina, que é coberto por uma aplicação nova droga investigacional da FDA (IND 102217), é um agente de contraste fluorescente que se concentra no núcleo das células, logo após a aplicação. Embora VFI não pode resolver morfologia celular individual, quando as panelas de diodo laser sobre o tecido, a luz refletida permite que o endoscopista a apreciar morpholo glandular geralgy.

9. Ligue Laser Diode

1. Ligue o diodo laser. Faça isso pelo menos 2 min antes do início da imagem.

10. Prepare endoscópio para VFI

1. Retire o endoscópio completamente.
2. Antes de lidar com o endoscópio, garantir que o assistente tem dois pares de luvas.
3. Já o endoscopista segurar o endoscópio na frente do assistente que fica ao lado da plataforma Kimwipe detalhado acima.
4. Com Kimwipes, ter o assistente limpa a ponta do endoscópio. Certifique-se de limpar a superfície frontal levemente e também limpar alguns centímetros ao longo do lado do endoscópio para facilitar o manuseio.
5. Após a limpeza, tem o descarte assistente do par exterior de luvas.
6. Já o assistente de colocar no filtro. Insira a protuberância cilíndrica curta no filtro em seu buraco complementar no endoscópio. Manter o endoscópio vertical para auxiliar o processo.
7. Segurando o filter no lugar, deslize a tampa sobre o filtro e empurrá-lo para baixo sobre a ponta do endoscópio. Certifique-se que a tampa é seguro e empurrou completamente com as bordas lave com o endoscópio. Certifique-se o lábio da tampa prolonga-se ligeiramente sobre a ponta do endoscópio. Por fim, verifique se o filtro ainda está em vigor e lave com a ponta do endoscópio.

11. Insira o endoscópio volta para o esôfago e Imagem

12. Remover endoscópio de Esôfago

1. Usando Kimwipes puxe cuidadosamente a tampa e filtrar fora do endoscópio. Jogue fora a tampa e limpe o filtro para o próximo caso.

13. Filtro limpo

1. Delicadamente, limpe o filtro com Kimwipes.
2. Encha um copo pequeno com CyDex e mergulhe o filtro para 12 min. A cada poucos minutos virar o filtro sobre.
3. Delicadamente, limpe o filtro com Kimwipes.
4. Submergir filtro, desta vez em água estéril. Depois de 5 minutos, use um esguicho bottle e pulverizar água estéril sobre o filtro.
5. Coloque filtro em algumas Kimwipes e deixe secar.
6. Depois de seco, coloque em recipiente de armazenamento entre Kimwipes.

Resultados

A Figura 1B mostra clássico Esôfago de Barrett sem displasia cercado nas fronteiras por epitélio escamoso normal. Começando com o tecido escamoso mais plana, que está localizado perifericamente e indicado pelas setas azuis, uma zona homogénea de fluorescência monótona está presente sem arquitectura glandular. As setas verdes indicam uma linha verde circular em torno do tecido escamoso. Este esboço é artefacto resultante a partir da tampa do endoscópio. Movendo-se para o tecido localizado cen...

Discussão

Com vigilância endoscópica normal, neoplasia em BE é muitas vezes perdida ⁸ porque metaplasia benigna pode ser indistinguível de displasia de alto grau e adenocarcinoma. Como uma ferramenta que seria melhor permitir gastroenterologistas para remediar esse erro atualmente inevitável, o corante vital reforçada imagens de fluorescência destaca morfologia glandular de um tecido proporcionando assim uma característica distinta para diferenciar os tipos de tecidos. Além disso, através de um campo de visã...

Materiais

Name	Company	Catalog Number	Comments
Filter*	Schott North America, Inc., Duryea, Pennsylvania	Not Applicable	495-nm long-pass filter
Halo Cap – Medium*	Barrx Medical	CP-002A
Processor*	Pentax	EPK-i
Multispectral Digital Microscope**	Not Applicable	Not Applicable
Kimwipes	Kimberly-Clark	KimTech Science	S-8115
Cidex	Advanced Sterilization Products	CIDEX OPA Solution
Proflavine hemisulfate (0.01% w/v)			FDA (IND 102,217)
Laser Diode*	Nichia Corporation	Not Applicable	455-nm
Image Capture*	Labview	Not Applicable
Spray Catheter	Olympus	Not Applicable
			*Equipment specifics within Reference 6. **Equipment specifics within Reference 7