推拿对大鼠模型的镇痛作用，压迫背根神经节疼痛

摘要

本文介绍了一种使用推拿疗法治疗大鼠背根神经节慢性压迫的操作方法，以及一种基于疼痛行为和组织病理学结果评估其有效性的方法。

摘要

神经性疼痛是一种普遍存在的疾病，影响 6.9%-10% 的人口，由各种病因引起的神经损伤引起，例如腰椎间盘突出症、椎管狭窄和椎间孔狭窄。虽然推拿作为一种传统的中国手法疗法，在临床上显示出治疗神经性疼痛的镇痛作用，但其潜在的神经生物学机制尚不清楚。动物模型对于阐明推拿的基本原理至关重要。在这项研究中，我们提出了一种标准化的推拿方案，用于压迫背根神经节 （DRG） 的大鼠，其中包括通过将不锈钢棒插入椎间孔来诱导 DRG 压迫，在受控环境中以特定的位置、强度和频率参数进行推拿操作，并评估推拿治疗的行为和组织病理学结果。本文还讨论了该研究的潜在临床意义和局限性，并提出了未来推拿研究的方向。

引言

在临床环境中，由于各种原因，观察到神经根受压引起的神经系统病理性疼痛是很常见的。这种神经性疼痛最典型的形式是腰椎间盘突出症 （LDH），它通常是持续的、反复发作的且难以治愈。全球约有 9% 的人口受到乳酸脱氢酶的影响，导致严重的社会和经济负担¹.由于人类生产和生活方式的改变，这种类型的神经性疼痛的发病率逐年增加，患者有年轻化的趋势².尽管使用非甾体类止痛药，但患者的症状仍不能完全缓解。因此，用于治疗乳酸脱氢酶引起的疼痛的替代疗法（如推拿）越来越受到关注。

推拿疗法是乳酸脱氢酶的一种保守治疗形式，在世界范围内的各种临床实践指南中被广泛推荐用于预防和治疗腰痛 ^3,4。研究表明，推拿可显著降低乳酸脱氢酶患者的血清IL-6和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）等炎症因子，同时改善患者的疼痛和腰椎功能损害⁵。然而，推拿疗法缓解疼痛效果背后的具体机制尚不清楚。

动物模型是研究 LDH⁶ 引起的神经性疼痛的宝贵工具。它们允许进行行为测量以评估推拿疗法的有效性，并提供乳酸脱氢酶的病理生理学样本。例如，可以从大腿背根神经节采集样本来验证背根....

研究方案

这项工作是在复旦大学神经生物学研究所疼痛实验室进行的。这些实验已获得批准，并严格遵守国际疼痛研究协会（LASP）为所有外科手术和动物处理制定的实验动物保护指南。本研究使用清洁级 Sprague-Dawley （SD） 大鼠，由 32 只 40-50 日龄的雄性组成，平均体重为 220 ± 1.38 g。这些大鼠购自中国科学院上海生命科学研究院实验动物中心。动物得到适当的照顾，并被安置在一个有独立通风、调节温度（22±1°C）和湿度（40%-50%）的专用房间内。老鼠在笼子里可以获得足够的食物和水。实验动物室遵循12 h的明暗循环，以保持大鼠昼夜节律的规律性，并由指定人员定期更换衬垫。X光片在上海中医药大学附属岳阳中西医结合医院放射科进行。

1. 研究参与者和分组

1. 将32只大鼠分为四组：幼稚（对照），假手术（假手术），CCD（慢性背根神经节压迫）和CCD +推拿（8只大鼠/组）。老鼠可以在动物设施中自由获取食物和水。
   注：幼稚大鼠没有干预，而假大鼠组接受了与CCD组大鼠相同的外科手术，但没有在L4和L5椎间孔中留下“L”形不锈钢棒。CCD组大鼠行完全慢性背根神经节压迫模型手术。CCD+推拿组大鼠从CCD手术后第4天开始接受推拿治疗。

2. 建立动物模型

1. 施用异氟烷麻醉大鼠。一旦大鼠失去知觉（没有甩尾....

讨论

课题组对早期推拿操作的参数进行了相关研究。首先，设置推拿操作的力强度很重要。在临床推拿中，从业者根据自己的经验和患者的主观感受调整用力强度，通过沟通达到最佳的推拿效果。然而，这在动物实验中是不可行的。在动物实验中，“反应阈值”用于定义推拿操作的强度。这些根据动物的本能反应来判断施加的推拿力是否合适。Randall¹⁷ 使用这种方法来研究大鼠炎症模.......

材料

Name	Company	Catalog Number	Comments
"L" stainless steel rod (4 mm long and 0.4 mm in diameter)	hand-made	/	For CCD models making
ALMEMO admeasuring apparatus	ahlborn	2450-1	Mechanical Withdrawal Threshold test
Constant temperature slicer CM-1900	Leica	1491950C1US	For specimen production
Disinfectant (iodine) 100 mL/bottle	LIRCON/Shandong Lilkang	/	For disinfection
Disposable sterile syringe 5 mL	Shanghai Misha Wa Medical Industry	/	For injection
Electron microscope CX-31	Olympus, Japan	BJ002318	For specimen observation
Finger pressure recordings	Suzhou Changxian Optoelectronic Technology	CX1003w	For Tuina manipulation
Foam board (35 cm x 20 cm)	hand-made	/	It is our homemade apparatus for fixing rats
MERSILK W2512	Johnson & Johnson	/	For tissue suture
Neutral balsam	Sinopharm Chemical Reagent	10004160	For specimen production
paraformaldehyde	China National Chemical Reagent	/	For specimen production
Pentobarbital sodium	Sigma-Aldrich	P3761	For anesthesia of rat
Plantar Test Apparatus (Hargreaves Method) for Mice and Rats	IITC Life Science	/	Paw Withdrawal Latency
Precision electronic scale for experiment JY3002	Shanghai Precision Scientific Instrument	/	Weighing of rat
Rat hair clipper	Philips	HP6341/00	Shaving of rat fur
Restrainer for rats	Tongji University (self-made)	/	It is a homemade apparatus made by Tongji University, which can effectively immobilize the rats and fully expose their hind limbs.
Tissue-Tek O.C.T. Compound	SAKURA	4583	For specimen production
Uratan	China National Chemical Reagent	/	For anesthesia of rat
X-ray detector XR-600	Dongguan Kaso Electronic Technology	/	Examination of CCD models
xylene	Shanghai Sinopharm Group	100092	For specimen production