首先,将纯化的未稀释小鼠CNS细胞悬液分成两部分,以进一步分离小胶质细胞和少突胶质细胞。然后将针对不同中枢神经系统细胞类型的表面抗原特异性的磁性标记微珠添加到相应的细胞悬液中。将色谱柱置于磁场中,使色谱柱相等,然后将得到的细胞悬浮液添加到色谱柱上。
磁性标记的细胞将保留在色谱柱内,未标记的细胞将贯穿其中。从磁场中取出色谱柱后,将磁性标记的细胞从色谱柱中冲洗到试管中,作为阳性选择的细胞部分。将来自少突胶质细胞的负流分成两部分,以进一步分离神经元和星形胶质细胞。
使用细胞类型特异性标记物结合活细胞或死细胞鉴别的流式细胞术分析产生了小胶质细胞、少突胶质细胞、星形胶质细胞和神经元。不同细胞群的表型表征证明,所有主要的中枢神经系统驻留细胞类型均获得了纯度和活力约为 90% 的单细胞悬液。