Для исследования молекулярных и клеточных механизмов при аутоиммунных заболеваниях, таких как рассеянный склероз, создание воспроизводимых и сложных протоколов выделения клеток является неудовлетворенной потребностью. Большинство современных технологий выделения и анализа резидентных клеток ЦНС демонстрируют серьезные недостатки, такие как фокусировка только на одном типе клеток или только на постнатальных мышах. Существующий протокол одновременного выделения всех основных типов резидентных клеток ЦНС из одной репликации ЦНС дает возможность анализировать сложные нейронные сети и новые воспалительные пути ex vivo из одной клеточной суспензии, применимые к здоровым мышам и мышам с экспериментальным аутоиммунным энцефаломиелитом.
Наш протокол одновременного выделения всех четырех основных типов клеток ЦНС у здоровых мышей и мышей с ЭАЭ может быть использован в качестве полезного инструмента для исследовательских групп, изучающих новые воспалительные пути, что позволит гораздо точнее анализировать сложные биомолекулярные механизмы и клеточные сети ex vivo. Новые научные вопросы, на которые можно ответить с помощью нашего протокола, — это динамические исследования ЭАЭ на разных стадиях течения заболевания, таких как нейровоспаление, нейродегенерация и ремиссия. Кроме того, межклеточные взаимодействия и биохимические пути могут быть изучены на индивидуальном уровне.
Аналогичным образом, функциональные анализы могут быть выполнены с культивируемыми клетками. Мы намерены сосредоточиться на динамических исследованиях хода ЭАЭ для мультиомического анализа одного отдельного гомогената ЦНС в каждый момент времени ЭАЭ.