首先,在载玻片上涂上矩形轮廓的透明指甲油。准备几张这样的移植玻片。为了安装麻醉动物,使用巴斯德移液器和泵将其从 RPT 转移到低熔点琼脂糖或 LMA。
然后,将一小滴 LMA 中的动物转移到指甲油轮廓内的载玻片上。在 LMA 凝固之前,使用胚胎推杆将动物垂直定向,将预期的进针部位向右。让琼脂糖完全凝固约 5 分钟。
使用手术刀,在上样动物右侧的琼脂糖滴中切出一条直的垂直切片。擦去载玻片上松散的琼脂糖。使用手术刀,从琼脂糖中切出楔形以暴露针插入部位。
将 RPT 应用于载玻片,直到琼脂糖滴完全浸没。并将准备好的载玻片安装在移植显微镜上。降低 40 倍物镜,直到它打破培养基表面,然后升高它以使供体动物聚焦。
然后,聚焦感兴趣的荧光标记的供体细胞。将载物台向左移动,准备找到移植针。