洛克菲勒大学生物科学中心比较为这个项目提供了支持。我们感谢詹妮尔Monnas的技术援助。

1。准备麻醉解决方案<ol><li>制备溶液150 mg / L的MS-222系统中的水，无论是从储备溶液或粉末形式。 </li><li>验证的pH值，用pH计。 </li><li>用碳酸氢钠缓冲液根据需要，直到pH值在7-7.5之间。 </li><li>准备从MS-222为鱼恢复英寸恢复时间通常小于1分钟的系统水的罐。 </li></ol> 2。准备灌胃装置<ol><li>切清晰的22-G植入管从口腔到肠道灯泡的鱼的长度大约多一点。最初，我们建议每个新组正在使用的估计所需的长度，以获得最佳的麻醉鱼。 </li><li>切清晰的植入到半英寸22-G针管推，直到它是安全的，没有风险分离。如果½22-C针，切针的应用程序长度roximately。 </li><li>当完成时，应该从针尖约1厘米，或较短如果鱼较小延伸导管植入管。 </li><li> 22-G针枢纽连接到1毫升luerlok的注射器。 </li></ol> 3。准备灌胃<ol><li>切槽成海绵，用手术刀刀片。 </li><li>在系统水浸泡的海绵从MS-222。 </li><li>放置在平坦表面上的湿的海绵。 </li><li>制订了相应的5微升溶液灌胃到22-G导管和1毫升注射器。 </li></ol> 4。麻醉和灌胃<ol><li>快餐鱼在手术前至少24小时。 </li><li>将鱼的MS-222溶液中，直到它失去其扶正反射，尾鳍捏不响应，但保持鳃盖运动。这通常需要2-3分钟左右。 </li><li>从麻醉中的解决方案，并将其放入取出鱼与头部略微突出的海绵的海绵中的凹槽，但鳃包括由海绵。 </li><li>将海绵成垂直位置。 </li><li>打开斑马鱼的嘴，使用22-G导管。 </li><li>轻轻插入管，直到提示是过去的鳃（约1厘米或油管的长度）。植入管不应该需要被迫。电阻建议管可能被击中的鳃弓或心脏。 </li><li>如果有阻力，轻轻退出，重新定位，然后再试一次。 </li><li>注入慢慢材料。 </li><li>注射时，请确保该解决方案通过鳃或嘴不退出。 </li><li>从海绵和地方打入回收槽取出鱼。 </li><li>恢复通常发生在不到1分钟，表示鱼直立游泳，保持平衡。 </li><li>通过可视化的积极驱逐米鱼监视鱼返流所示动脉插管从它的嘴，或者没有鳃盖运动。 </li><li>鱼可以返回到他们的正规坦克，一旦他们恢复。 </li></ol>

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作者宣称，他们有没有竞争经济利益。

意义这种技术是一种改进，并提供了几个优点，在先前所描述的技术用于gavaging成年斑马鱼。首先，利用海绵抑制鱼，一个人可以执行的程序，而不是先前所描述的技术，需要两个人。7二，比静脉导管，导管植入管更灵活，它可以帮助减少二次创伤所致穿孔同样使用钝头的注射器。7,8三，通过使用透明管，该解决方案可以轻松地进行可视化进入鱼。最后，灌胃?...

目前管理化合物口服斑马鱼的方法包括管理化合物涂在饲料，混合成明胶的饮食1，盐水虾2 bioencapsulated，混合脂质的封装饮食3，喷蜡珠4，并通过无麸质饮食。限制这些方法包括口服高浸出率和个别鱼不完整或不可预知的化合物消费。这些变量是有问题的，因为在传染性疾病研究，知道鱼的感染剂量可能是学习成功的关键。另外，以前的工作已表明，某些化合物给药水浴引起中毒性病变肠道的影响，可能是所研究的发生之前，斑马鱼鳃。 灌胃是一个标准的方法，用于其他实验室动物物种的精确管理的产品数量AKnown集中研究在生物医学和制药研究。直到最近，在文献中被描述为gavaging斑马鱼的方法。描述的技术之一是两个人的方法，使用24-G连接至2-20微升的移液管，以提供溶液5μl的导管鞘7中所描述的方法的死亡率是8.7％和39％，在第一和第二试验，分别大部分死亡率归因于妊娠女性。第二灌胃描述的技术使用钝头灌胃注射器辖5微升解决medakas的青鳉 。8对死亡率的信息并没有提供，进行灌胃，没有描述的确切过程。根据动物护理和实验室斑马鱼，鱼的身体重量的1％到加拿大会可以通过灌胃给药9,10，我们的目标是开发一个可重复的，安全，高效的方法提供精确的体积COM磅的成年斑马鱼的男女双方口头和再生产的各个阶段。此过程将是适用于任何研究中，需要准确的化合物口服给药。

<table border="1">
<tbody>
 <tr>
 <td></td>
 <td></td>
 <td></td>
 <td>Equipment</td>
 </tr>
 <tr>
 <td>A sponge</td>
 <td></td>
 <td></td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>1-cc luer lock syringe</td>
 <td>Becton Dickinson &amp; Co</td>
 <td></td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>22-G Micro-Renathane Implantation tubing (cut)</td>
 <td>Braintree Scientific, Inc.</td>
 <td></td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>1 22-G needle (cut, if needed)</td>
 <td>Becton Dickinson &amp; Co</td>
 <td></td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>pH meter</td>
 <td>Hanna probe</td>
 <td></td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>1 scalpel blade</td>
 <td></td>
 <td></td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td></td>
 <td></td>
 <td></td>
 <td>[header]</td>
 </tr>
 <tr>
 <td></td>
 <td></td>
 <td></td>
 <td>Reagent/Material</td>
 </tr>
 <tr>
 <td>MS-222 (Finquel)</td>
 <td>Argent Laboratories</td>
 <td></td>
 <td></td>
 </tr>
 </tbody>
</table>

gavaging adult zebrafish

斑马鱼已成为一个重要的在体内模型在生物医学研究。有效方法，必须开发和利用提供解决方案，为科研的化合物或试剂。目前管理化合物口服成年斑马鱼的方法是不准确由于变异自愿消费的鱼。一个灌胃的程序开发传染性病原体对斑马鱼的研究在生物医学研究提供精确的数量。超过6个月的年龄的成年斑马鱼麻醉与150 mg / L的缓冲MS-222和，灌胃5微升的解决方案，采用柔性导管植入管连接到一个切割22-G针尖。下降到斑马鱼的口腔直到管子的前端延伸过去鳃（约1厘米）的软管。然后将溶液缓慢注入到肠道内。此方法是有效的88％的时间里，鱼没有事故恢复。这程序也是有效的，作为一个人就可以在一小时内灌胃给药20-30鱼。此方法可以用于精确地管理代理传染病的研究，或成年斑马鱼中的其它化合物的研究。

这两种鱼类，包括妊娠女性两性成功灌胃（ 图1）。一个成功的过程不到一分钟，没有看到退出鳃或口的液体。油管进入容易，没有力量，没有看到血后拔除尿管。这个程序是快速的，需要约10分钟，灌胃给药3〜4的鱼，鱼每30-45秒的平均。 斑马鱼不应该被灌胃超过5μl的任何解决方案。管饲法用10微升的解决方案导致只有50％的成功率（ 图2）。灌胃10?...

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Gavaging Adult Zebrafish

越来越多地使用斑马鱼作为动物模型的发展需要有效的方法交付已知化合物和解决方案的数量。灌胃下述过程可用于口服给药的精确体积的溶液可靠，安全和有效的成年斑马鱼。

Gavaging成年斑马鱼

The zebrafish has become an important in vivo model in biomedical research. Effective methods must be developed and utilized to deliver compounds or ...

Research

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Biology

20.6K 次观看.  The Rockefeller University. 越来越多地使用斑马鱼作为动物模型的发展需要有效的方法交付已知化合物和解决方案的数量。灌胃下述过程可用于口服给药的精确体积的溶液可靠，安全和有效的成年斑马鱼。