小鼠骨髓胰岛移植的一种方法

该方法有助于回答小岛移植领域中的关键问题，如小岛移植到骨髓。这项技术的影响延伸到了 I 型糖尿病的治疗中，因为小膏作为胰岛移植的潜在价值站点重新出现。该技术的主要优点是，分离的小岛与水凝胶混合，混合物被放置在糖尿病小鼠的软糖袋中。

首先在手术区准备无菌场，使用无菌材料，如窗帘和一次性用品。将消毒手术器械放在无菌区。使用 200 微级移液器尖端在立体显微镜下选取供体小岛。

对于每只动物，收集450至500个小岛，并转移到无菌的1.5毫升捕捉顶部管与100微升CMRL 10 66介质。将管子放在冰上，直到准备移植。一旦小岛被收获，在冰上解冻地下室膜基质水凝胶。

称重并标记所有糖尿病接受小鼠。根据第一只经机构批准的协议麻醉第一只小鼠后，通过管理一个手趾捏来测试麻醉的深度。如果没有戒断反射，麻醉水平是正确的手术。

管理兽医软膏的眼睛，以防止干燥，而麻醉。用70%乙醇擦拭腹部。然后剃掉手术现场的头发。

用无菌的窗帘盖住动物，用碘磨砂消毒区域。使用眼科剪刀沿着腹部中线创建 4 到 5 厘米切口后，将肠子移动到左侧，用盐水浸泡纱布盖住，以防止手术过程中脱水。然后使用棉签完全暴露胃，并找到胃下面的奥皮。

此时，水凝胶应完全解冻。以200倍g旋转含有小岛管的30秒。旋转后，拆下上经。

然后吸气50微升水凝胶将其添加到含有小岛管的管中，轻轻混合，避免气泡的形成。接下来使用两对钳子拾起奥花的边缘，轻轻抬起它，在胃壁和肠道之间形成凹槽。此时，在手术中，需要第二个人用 200 微升移液器尖端吸气重新暂停的小岛水凝胶混合物，并送至凹槽中。

通过轻轻提升或降低油度边缘，确保混合物在凹槽中位置良好。在水凝胶凝固前三分钟内完成混合物的定位。水凝胶设置后，折叠软糖覆盖移植物。

当水凝胶凝固时，软糖将粘附在周围的胃壁上。当水凝胶完全凝固时，使用棉签重新定位腹腔中的肠道，注意不要接触移植地点。接下来，将200微升的适当抗生素放入腹腔，以防止感染。

然后用4O缝合关闭腹部。一般来说，新方法的个体会挣扎，因为小鼠的点位很小，评估很累。将鼠标放入加热的恢复笼中，直到它完全恢复外部的恢复能力。

第二天和之后的每一天一个星期，注射抗生素作为手术后预防。此外，在移植后每天使用血糖计从尾静脉血液样本中测量非禁食血糖水平。当移植到奥美花时，胰岛移植物可能有延迟功能，在两到三周内没有达到完全正常的血糖水平。

移植后14天从安乐死小鼠中取回移植组织。在这里，嫁接在DAPI染色后，作为一组核可见。移植组织的功能通过免疫荧光染色与抗胰岛素抗体揭示。

H&E 染色显示被奥花的脂肪细胞包围的移植组织。一旦掌握，这项技术可以在一小时内完成，如果它执行得当。在尝试此过程时，记住鼠标的花膏也是脆弱的， 这一点也很重要。

按照这个程序，其他方法，如用于不同的高中，MB性能在所有将回答特定的问题，如小岛在血管化的传播和性能。经过这一开发，这项技术为研究人员在它们的和移植领域探索治疗一型糖尿病铺平了道路。看完这个视频后，你应该对如何把小岛移植到鼠标的花膜上有一个很好的理解。