用于筛查绝经后心血管功能障碍的外源雌激素治疗的活体雌激素缺乏小鼠模型

缺乏涉及雌激素缺乏小鼠的实验室模型，这些小鼠提供动脉硬化性气孔数据。这个过程对更年期后心血管功能障碍的外源性雌激素治疗特别有帮助。该技术的主要优点是，没有双多面切口的奥瓦里切除术是一种更容易，更不耗时的方法，避免严重的腹腔粘附和炎症。

演示这个程序的将是我实验室的研究生张音。要对APOE敲除小鼠进行双边曲张切除术，首先确认对踏板反射缺乏反应，然后将动物放在加热垫上的易发位置。将软膏涂抹在动物的眼睛上，用手术窗帘盖住动物。

做一厘米的切口侧向中线，一厘米的侧向到成本肋骨，并使用钳子钝解皮下组织。使用解剖护目镜，识别腹腔中的白色脂肪组织。使用微型剪刀和微型钳子，通过筋膜进行0.5至1厘米的切口，直到腹腔到达，并使用微钳轻轻缩回白色脂肪组织。

在腹腔内应观察用脂肪组织包裹的粉红色桑状卵巢。使用单丝缝合线将0.5至1厘米近角和子宫角缝合，并使用微型剪刀收获卵巢。将剩余的组织返回到腹腔，并使用单个单丝缝合线单独关闭肌肉和皮肤层。

然后像刚才演示的，在动物的对侧一侧收获卵巢，并允许鼠标在加热垫上恢复，并监测，直到完全恢复。每周一次，从手术前一周到手术后12周，测量每个假动物和实验动物的体重平衡。对于血浆总胆固醇和甘油三酯测量，在第12周，准备腹腔面积与70%乙醇，并插入25规格的针到右心室。

慢慢吸气，直到一毫升血液流入注射器，将样品放入含有10微升0.5摩尔EDTA的1.5毫升收集管中。将管完全反转几次，将EDTA混合到血液中，并立即将管子放在冰上。在采集的30分钟内，在400倍的G和4摄氏度下将样品离心20分钟。

小心收集血浆上一液，在零下80摄氏度储存。为了分离大母，在第12周，将一根25量针连接到一个装满PBS的50毫升注射器上，并将针头插入实验动物的左心室。切开右中庭，避免灌注的高压，以每分钟05至08毫升PBS的速度灌注心脏组织。

用实验室组织吸收灌注液，用剪刀和钳子去除肋骨和肺。打开腹腔切除内脏，以便更好地查看主动脉。用微钳抓住心脏，使大干从脊柱上分离，直到腹腔分裂。

然后用4%的半形式醛将心脏和大管固定48小时，然后在室温下或2至8摄氏度的盐水中储存组织样本数小时。经过12周的高胆固醇饮食后，奥瓦里切除小鼠表明血浆总胆固醇和甘油三酯浓度显著增加。Ovari切除小鼠，每用17-β雌性二醇（PPD通过粽子传播）进行口头管理，比假操作小鼠的血浆总胆固醇浓度显著降低。

血浆甘油三酯水平下降在奥瓦里切除小鼠，每口头管理与17-β二醇，但不是与PPD。虽然在奥瓦里切除小鼠中观察到体重增加的趋势，但与假操作的小鼠相比，在四组动物之间总体体重没有显著变化。与所有其他组相比，上升大动脉的最大斑块在奥瓦里切除小鼠中增加，同时在这些动物中观察到的心脏功能整体下降。

此外，与整个大动脉面积相比，大动脉病变区的平均百分比在奥瓦里切除小鼠中显著增加。正如预期的那样，这些病变的存在减少与17-β雌性二醇，或PPD治疗。切除手术的主要风险是尿管结扎，导致高死亡率。

还要记得在肾动脉分支附近切深，避免主动脉损伤。