广泛使用的探针CFDA，或甲氧氟辛丁二甲酸酯的短，是非荧光的。两个H3组和3'6'位置在这个化合物上使其膜渗透。一旦进入细胞内部，内部细胞醋酸盐将去除醋酸盐组，并释放新的CFDA形式。
那是一种碳氧荧光素，或是荧光素的CF。由于这种新形式的膜渗透性较小，重量大，所有细胞都是通过细胞间孔隙或植物中的普拉斯莫德玛塔移动的，这使得这个细胞间在细胞间活动中研究的理想探针。在今天的视频中，我们将分别演示对阿拉伯植物根部和低皮质的CFD加载，我们将展示两种略有不同的程序将如何影响这个荧光探针的从下到上运动。
始终如一地获得染色效果，我们将收获的阿拉伯种子储存在4摄氏度，40%的水分柜中。在此条件下储存超过七天的新收获种子很容易用于播种。为了确保每一种植物都生长在培养皿中相对相似的空间中，我们使用种子区等级卡。
现在，润湿消毒的尖端，浸入灭菌的种子，并在指定位置一一播种。播种完成后，用胶卷和胶带密封培养皿，把它们放在培养皿上，让它垂直生长。下面是我们将在本实验中使用的工具。
请注意，我们最好尽快装上染料。通常，您可以在 10 到 15 分钟内完成整个过程。在执行 CFDA 加载实验之前，我们始终准备新的 CFDA 解决方案。
在这里，在立即使用之前，将一毫摩尔CFDA稀释为五微摩尔浓度。将副膜切成三分之三毫米大小的小块。因为Petri盘的盖子和底部有冷凝，我们需要用纸巾把它们清理干净，以避免染料四处流动。
一小块胶卷放在根下。提起植物，放在盖子上。切根约5至10毫米以下的低血。
把拍摄的小片拍回来。现在，小心地将一个微升 CFDA 涂抹在根的切割端。尽量避免污染所有的原生植物。
然后盖上盖子，然后把它们放在生长室两个小时。低氯二苯醚捏合法。如前所述，小副膜片被放在根-低基交界处。
我们使用前部轻轻捏紧靠近根组织，并小心地将0.1微升CFDA涂抹在捏边，离开植物两小时。照片从9天到12天后区域染色植物。它们都显示了在科蒂龙和真叶的血管染色模式。
只有在极少数情况下，科蒂顿叶才显示出半叶染色的图案。所以基本上，这两种方法在CF染色模式上没有区别，但是如果我们在越来越多的工厂中进行染料装载，我们发现这两种程序在效率上存在显著差异。采用根切法，约70%的植物在拍摄中显示荧光信号。
但使用低氯基捏法可将效率提高至91%。我们也尝试了根夹法，但这种方法导致效率更低，大约30%，因此，似乎加载染料的方法没有考虑到染色的差异。区别在于加载站点，这些站点可能由共塑屏障分隔。
我们展示了我们如何加载CFDA到阿拉伯根和低皮质。我们使用两个略有不同的程序，这两个略有不同的程序导致在这个底部到顶部探头运动显著差异。我们建议，这种方法可以帮助我们识别根源射射信号的潜在共塑屏障。
