我是慕尼黑LMU综合、内脏和移植手术部研究实验室的马丁·瑞尔。今天,我们将向您展示使用改良的非缝合袖口技术进行耳质异位大音移植模型。首先,用中佐兰、美用胺和芬太尼的内皮内注射麻醉接受动物。
用电动剪子剪带小动物的子宫颈横向区域的所有毛发,用棉签涂抹眼科软膏,防止眼睛在手术过程中干涸。将动物放在显微镜下的加热垫上,用皮肤敏感的石膏条轻轻地将动物的腿贴在手术台上。向后倾斜头部,用酒精擦洗操作场几次。
用小剪刀从壶切口到右下部,做一个皮肤切口。通过血管双极灼热,然后用微剪刀切除亚肌膜腺的右下叶。。通过上部和下部的双极性烧灼,以及随后用微剪刀切除右胸肌肌肉,获得常见的胡萝卜动脉。
通过用细钳将周围的结缔组织拉开,尽可能远地和近近地调动常见的胡萝卜动脉。将两个 7-0 丝线连结,在普通胡萝卜状动脉中间之间以最小距离连接,并在连字之间用细微剪刀将常见的胡萝卜状动脉横穿。通过袖口将近端连结端穿过,然后用小动脉夹固定。
用细小剪刀尽可能靠近连体字去除连字,用 30 量针用肝素盐水冲洗流明,同时注意不要损坏容器壁。使用精细的血管稀释器将打开的流明分压,并轻轻将卡皮德树桩拉过聚酰胺管,将卡罗蒂德树桩倒置在袖口上。立即修复倒置的卡罗蒂德与松散预绑 7 - 0 丝绸循环。
用另一个袖口在胡萝卜动脉的另一端执行相同的程序。通过袖口将端端穿过,用小动脉夹固定。用细小剪刀尽可能靠近连体字去除连字,用 30 量针用肝素盐水冲洗流明,同时注意不要损坏容器壁。
使用精细的血管稀释器将打开的流明分压,并轻轻将卡皮德树桩拉过聚酰胺管,将卡罗蒂德树桩倒置在袖口上。立即修复倒置的卡罗蒂德与松散预绑 7 - 0 丝绸循环。将受援动物放在一边,用盐水滋润上部三分之二,直到大音段被除植。
以与接受动物相同的方式麻醉捐赠小鼠。用电动剪子夹住腹部和胸腔区域的所有毛发,用棉签涂抹眼科软膏,防止眼睛在手术过程中干涸。将动物放在显微镜下的加热垫上,用皮肤敏感的石膏条轻轻地将动物的腿贴在手术台上。
用酒精擦洗操作场几次。用小剪刀进行中线腹腔切除术,将肠子稍微向上推,以暴露劣质的维纳卡瓦。使用 30 量针将 IVC 与一个 cc 的肝素盐水注射。
用小剪刀切开肾动脉下方的腹部主动脉和 IVC,以刺激捐赠动物。松散地将压缩放入腹部以吸收血液。用剪刀对肋骨进行双边分流,用手术夹将前胸壁颅倾斜,以暴露介质。
用微型剪刀将 IVC 和食道直接切在隔膜上方。通过用钳子将切口 IVC 和食道向上滴入心脏和肺部,然后用微型剪刀从底座上切除心脏和肺,以便进入胸大项和后心。通过用细钳将周围的结缔组织和脂肪拉开,将胸主动脉从周围组织中调动起来,同时小心不要损坏任何间动脉。
用双极性烧灼索将胸大音的所有分支烧灼,并使用微型剪刀切除隔膜和大音之间的大音段。用30量表针冲洗切除的动脉部分,同时注意不要损坏血管壁,以去除任何剩余的血液或血块,将移植物转移到接受动物体内。将供主动脉段的近端拉过倒置胡萝卜动脉顶部的近端,用细钳子立即用松散预绑的 7-0 丝环将其固定。
用微型剪刀修剪大音移植物的远端自由端,使移植长度适合两个袖口之间的距离。将供主动脉段的端部拉上倒置胡萝卜动脉顶部的端部袖口,用细钳子立即用松散预绑的 7-0 丝环将其固定。先拆下端夹,以允许逆行灌注。
达到血栓后,取出近端夹以完成结膜病。最后,用6-0连续缝合关闭伤口。28天后,动物被牺牲,移植物保存为组织学染色。
如这些Van-Gieson的大干部分染色所示,完全MHC不匹配的母体从Balb/c捐赠者到黑色六个接受者发展一个重要的新刺激增生,导致发光收窄。另一方面,从黑人6个捐赠者到黑人6个接受者的合成大血管移植只发展出很少的新刺激性增生。对SM22的免疫荧光染色,血管平滑肌肉细胞的标记,如绿色荧光图所示,表明新荧光主要由血管平滑肌肉细胞组成。
骨髓大血管移植是慢性移植血管病的模型,是晚期移植失败的最常见原因。与正畸腹部模型相比,我们改进的袖口技术较少,显微外科要求不高,导致成功率高。此外,由于袖口的恒定直径,在其他显微外科移植模型中可以看到的血管性肿瘤的变化可以忽略。
此外,温暖的缺血时间在整个实验组保持不变,因为接受动物在母体部分外植之前首先做好准备。我们修改后的模型应该有助于其他实验室建立骨髓大音移植。