나는 뮌헨에 있는 LMU의 일반, 내장 및 이식 수술의 부의 연구 실험실에서 마틴 Ryll입니다. 오늘 우리는 수정 된 비 봉합소 커프 기술을 사용하여 뮤린 이성애 대동맥 이식 모델을 보여줄 것입니다. 첫째, 미다졸람, 메데토미딘 및 펜타닐의 복막 내 주사로 수령인 동물을 마취시킵니다.
작은 동물을 위한 전기 머리 클리퍼로 자궁 경부 측지의 모든 머리를 잘라내고 절차 도중 눈이 건조되는 것을 방지하기 위하여 면 봉면으로 안과 연고를 적용합니다. 현미경 아래 가열 패드에 척추 위치에 동물을 배치하고 부드럽게 피부 민감한 석고 스트립과 수술대에 다리를 테이프. 머리를 뒤로 기울여 술로 수술장을 여러 번 문질러 보세요.
작은 가위로 오른쪽 하악하악에 경정맥 절개에서 피부 절개를 합니다. 혈관 페디클의 양극성 소와 마이크로 가위를 가진 후속 절제를 통해 하안 선의 오른쪽 하부 엽을 제거합니다. 상부 및 하부의 양극성 소와 일반적인 경동맥에 접근하기 위해 마이크로 가위를 가진 후속 절제를 통해 오른쪽 sternocleidomastoid 근육을 제거합니다.
주변 결합 조직을 미세 한 집게로 분리하여 가능한 한 멀리 분해되고 근교로 일반적인 경동맥을 동원하십시오. 일반적인 경동맥 의 중간 주위에 서로 사이의 최소한의 거리로 두 7-0 실크 합자를 묶고 합자 사이의 미세 한 마이크로 가위와 일반적인 경동맥을 transect. 근위 결찰 끝을 커프스를 통과하고 작은 동맥 클램프로 고정합니다.
가능한 한 합자에 가까운 미세 마이크로 가위로 합자를 제거하고 혈관 벽을 손상시키지 않도록주의하면서 30 게이지 바늘로 헤파리네이드 식염수로 루멘을 플러시하십시오. 미세한 혈관 확장제를 사용하여 열린 루멘을 불구속 시키고 폴리아미드 튜브 위로 부드럽게 당겨 서 커프스 위에 경동맥 그루터기를 반전시십시오. 느슨하게 미리 묶인 7-0 실크 루프로 반전된 경동맥을 즉시 수정합니다.
다른 커프와 경동맥의 다른 쪽 끝에서 동일한 절차를 수행합니다. 소맷부리 끝을 커프스를 통과하고 작은 동맥 클램프로 고정합니다. 가능한 한 합자에 가까운 미세 마이크로 가위로 합자를 제거하고 혈관 벽을 손상시키지 않도록주의하면서 30 게이지 바늘로 헤파리네이드 식염수로 루멘을 플러시하십시오.
미세한 혈관 확장제를 사용하여 열린 루멘을 불구속 시키고 폴리아미드 튜브 위로 부드럽게 당겨 서 커프스 위에 경동맥 그루터기를 반전시십시오. 느슨하게 미리 묶인 7-0 실크 루프로 반전된 경동맥을 즉시 수정합니다. 수령인 동물을 따로 놓고 대동맥 세그먼트가 식염수로 상위 2/3을 수분을 공급합니다.
기증자 마우스를 받는 동물과 동일한 방식으로 마취합니다. 복부와 흉부 부위의 모든 모발을 작은 동물용 전기 모발 클리퍼로 잘라내고 면 봉면으로 안과 연고를 발라 시술 중에 눈이 건조되는 것을 방지합니다. 현미경 아래 가열 패드에 척추 위치에 동물을 배치하고 부드럽게 피부 민감한 석고 스트립과 수술대에 다리를 테이프.
술로 수술장을 여러 번 문질러보시다. 작은 가위로 중간라인 복부 복강경절제술을 수행하고 창자를 약간 위로 밀어 열등한 정맥 카바를 노출시하십시오. 30 게이지 바늘을 사용하여 헤파린화 식염수의 1 cc로 IVC를 주입하십시오.
기증자 동물을 exsanguinatesorsors로 신장 동맥 아래 복부 대동맥과 IVC를 잘라. 느슨하게 혈액을 흡수하기 위해 복부에 압축을 배치합니다. 가위로 갈비뼈의 양자 전환을 통해 흉부 절제술을 수행하고 외과 용 클램프로 전방 가슴 벽을 벼랑이 기울여 내시경을 노출시하십시오.
IVC와 식도를 마이크로 가위로 다이어프램 바로 위에 자른다. 절단 된 IVC와 식도를 들고 집게로 위쪽으로 그들을 적시고 흉부 대오르막과 등쪽 거산에 액세스 할 수 있도록 기지에서 마이크로 가위로 그들을 흥분시켜 심장과 폐를 제거합니다. 주변 결합 조직과 지방을 미세 한 포셉으로 떼어 내어 주변 조직에서 흉부 대동맥을 동원하여 늑간 동맥을 손상시키지 않도록주의하십시오.
양극성 소작 집게로 흉부 대동맥의 모든 가지를 소작하고 마이크로 가위를 사용하여 다이어프램과 대동맥 아치 사이의 대동맥 세그먼트를 소비합니다. 남은 혈전이나 혈전을 제거하고 이식편을 받는 동물에게 이식편을 옮기는 혈관 벽을 손상시키지 않도록 주의하면서 30 게이지 바늘로 분리된 대동맥 세그먼트를 세척한다. 기증자 대동맥 세그먼트의 근접 세그먼트를 미세 한 집게로 거꾸로 된 경동맥 위에 밀어 내고 느슨하게 미리 묶인 7-0 실크 루프로 즉시 고정하십시오.
접목 길이가 두 커프사이의 거리에 맞게 되도록 대동맥 이식편의 말단 프리 엔드를 마이크로 가위로 다듬습니다. 기증자 대동맥 세그먼트의 단층 을 미세 한 집게로 거꾸로 된 경동맥 위에 말단 커프 위에 당기고 느슨하게 미리 묶인 7-0 실크 루프로 즉시 고정하십시오. 역행 관류를 허용하기 위해 먼저 탈단 클램프를 제거합니다.
hemostasis를 달성한 후에는 근위 클램프를 제거하여 해부학을 완료합니다. 마지막으로, 6-0 연속 봉합사로 상처를 닫습니다. 28 일 후, 동물을 희생하고 이식편은 조직학적 얼룩을 위해 보존됩니다.
대동맥 섹션의 이 Van-Gieson의 얼룩에서 와 같이, 완전히 MHC는 발브/c 기증자에서 흑인 6명의 수신자에 완전히 접목된 대동맥을 불일치시키는 것은 빛나는 협착의 결과로 중요한 신자극 증식을 개발했습니다. 한편, 흑인 6명의 기증자에서 흑인 6명의 수혜자에 이르는 시너지 성 대동맥 이식은 작은 신자극성 증식만을 개발했다. 녹색 형광에 도시된 바와 같이, 혈관 평활근 세포에 대한 염동성 염색은 주로 혈관 의 매끄러운 근육 세포로 구성되어 있음을 보여줍니다.
뮤린 대동맥 이식은 늦은 이식 실패의 일반적인 원인인 만성 이식 혈관병증을 위한 모형 역할을 합니다. 치열 교정 복부 모델에 비해, 우리의 수정 된 커프 기술은 높은 성공률로 이어지는 덜 미세 수술 요구입니다. 또한, 커프의 일정한 직경으로 인해 다른 미세 수술 이식 모델에서 볼 수 있듯이 혈관 해부학의 변이를 무시할 수 있습니다.
더욱이, 따뜻한 허혈시간은 대동맥 세그먼트가 심어지기 전에 먼저 수용자 동물이 준비됨에 따라 실험군 전체에 걸쳐 일정하게 유지됩니다. 우리의 수정 된 모델은 다른 실험실이 뮤린 대동맥 이식을 확립하는 데 도움이될 것입니다.
