炎症敏感晚期缺氧缺血性脑损伤的Ferret模型

该协议是重要的，因为它提供了第一个模型的炎症敏感过早脑损伤的雪铁龙，导致严重和持续的伤害。这种技术涉及长期侮辱，其中纳入许多触发因素和生化机制，被认为有助于在早产儿看到的脑损伤类型。展示大脑测量程序的将是凯莉·科里，一个研究科学家在我们的实验室和奥利维亚·怀特，一个本科生。

手术开始前30分钟，施用每公斤LPS IP3毫克，以在损伤组中安装成试剂盒，并施用相当于每克三微升的无菌盐水，以控制动物。在开始手术之前，使用小动物剪子去除长方形图案雪铁龙腹颈区域的所有毛发，注意避免剥皮或产生热疹。对剃光区域进行局部麻醉，用三个交替的拭子对皮肤进行碘和七十分之七十乙醇的消毒。

在通过头趾捏确认适当的水平的电合后，用暴露颈部区域的无菌一次性切口窗帘盖住动物。对于双边胡萝卜动脉结扎，使用单用数十手术刀刀片在颈部中心做一个1.5厘米的中线切口，并使用精细的半边形和弯曲的钳子钝解到左胡萝卜动脉。将暴露的动脉从相关的神经血管束中解剖。

并使用一对弯曲的细钳子在动脉下通过一个循环十厘米长的无菌 5/0 丝缝合线。将缝合线切成两半，并牢固地将两个缝合线长度绑在一起，以连接动脉，在结之间留下至少两毫米。在缝合线之间穿开左角动脉，注意保持神经完好无损，并在右侧重复解剖。

用单无菌 1/8 英寸脐带将右侧胡萝卜动脉逆转。用手术性皮肤夹关闭伤口。然后，让动物在温度控制的水浴中恢复至少30分钟，在缺氧前进行监测。

对于连续缺氧、高氧和缺氧治疗，将动物放在水浴内气密室中。持续监测室内的氧气浓度，以及至少一个哨兵动物的直肠温度。用加湿的 9% 氧气和 91% 的氮气冲洗腔室，并保持每分钟 3 到 5 升的流速，具体取决于腔室大小。

一旦腔室中的氧气浓度达到百分之九，继续输送三十分钟。在缺氧治疗结束时，将供气切换到 80% 的加湿氧气和 20% 的氮气。经过三十分钟的超氧，打开腔室，让其更快速地到达诺莫夏，与室内空气平衡，然后密封室并再次用9%的加湿氧气冲洗。

在第二轮缺氧期间持续监测所有动物，注意任何显示过节性呼吸的动物。一旦腔室中的氧气浓度达到百分之九，继续治疗缺氧三十分钟。在治疗结束时，使用弯曲钳子从右肌动脉识别和解开脐带。

用手术性皮肤夹重闭伤口。然后将所有试剂盒返回 60 分钟的 jills 进行护理和恢复。在恢复期结束时，将受伤的动物返回37至40摄氏度的水浴场，持续6小时，根据需要调整水温，保持36至37摄氏度的直肠温度。

然后，再次返回套件到他们的 jills。在适当的实验终点处进行大脑采集和固定后，将电子卡钳的尖端放在每个大脑的后腹和腹面上，以测量每个受伤和非受伤大脑的高度。将卡钳的尖端放在时间叶的最横向部分，以测量每个大脑的宽度并称量每个大脑。

使用卡钳测量纵向裂缝，所有从相应硫化物最明显部分的开始和结束的硫化物，以及从每个相应陀螺的最宽面的所有陀螺。然后，将卡钳的一个尖端放在纵向裂痕的最后点，将卡钳的另一个尖端放在小脑最后部，以测量暴露小脑的数量。在这项研究中，6只动物中的34只受到侮辱，其中5只动物中度受伤，4只动物严重受伤。

随着伤害的增加，观察到时间和/或腹叶的陀螺变变窄，在最严重受伤的动物中，纵向裂变和更大的囊组织损失区域会缩短和扩大。在反射测试期间，受伤的动物在负地理轴任务中显示旋转时间较慢。在"悬崖厌恶"任务中，从边缘旋转的较慢的时间，以及向右旋转的较慢的时间。

在走道中，受伤的动物表现出与控制装置相似的平均速度，但在每次跑步过程中表现出显著的速度变化。在受伤的动物中，爪子和后爪之间的重量调整距离明显较大，通过四爪的单位爪子区域施加的压力较小。在开阔的田野里，受伤的动物覆盖的总距离更少，停止频率更低，在场地中心停留的时间明显更多，在角落停留的时间更少。

在这里，可以观察到有代表性的控制和受伤动物的热图。注意从伴随的神经中解剖动脉，并留出最大的可能缺氧时间。这些步骤将确保大多数动物存活下来，同时也遭受伤害。

按照这个程序，任何生化，病理或行为结果可以评估，包括评估通常仅限于啮齿动物模型的脑损伤。