本视频的总体目标是解释将血液双直接注射到西斯特纳磁石中作为亚布拉奇内德出血模型的协议。亚布拉奇出血的生理学通常是由于动脉瘤破裂。我们首先将血液外在大脑和覆盖大脑的组织之间的隔间中。
这个隔间是亚气室空间。苏巴奇诺德出血占所有罢工病例的7%。在基于人群的研究中，死亡率在30%到50%之间，而亚布拉奇出血幸存者通常经历认知后遗症，如记忆缺陷、焦虑症或情绪障碍。
不良结果高流行率的主要原因是脑缺血。研究使大脑动脉血管收缩中缺血的发生之间有关，这种血症被命名为显微血管痉血症，在第一次腹胀事件后的第四天至第十五天之间，大多数患者都可以检测到这种血症。由于目前治疗方案效率低下，显然医学上需要更好地了解病理事件。
伴随的亚布拉奇出血和新的治疗靶点应进行测试，但这需要多样化和标准化的动物模型。颅间动脉瘤的破裂，主要是造成人类亚布拉奇内出血的原因，很可能很难做临床前和人类模型。在动物中，主要困难在于控制出血和血液分配的发生率，但最近的研究侧重于开发更红细胞出血模型的模型。
这里代表一个标准化的小鼠模型，连续两次注射自体动脉血的两天到西斯特纳磁石。该模型的主要优点是可重复掌握非侵入性外科手术，调整注射血液的质量和数量，在不急剧增加颅压的情况下加强出血事件。在手术开始前，你必须使用微管拉拔器再放大量的玻璃毛细管。
注射移液器内径为0.86毫米，外径为0.5毫米。如书面协议所示，为假情况准备人工脑脊髓液。你必须意识到这种用0.22微米过滤装置的含氧人工脑脊髓液。
我们亚巴脑出血模型的第一步是沿气管隔离胡萝卜动脉，以及从胡萝卜动脉穿刺中收集最大血液。通过异氟兰麻醉后，通过夹紧一两个后肢来检查反射不足，以便设置实验程序。使用 26 表针使用 Eprin 对一毫米注射器进行编码。
这将防止血液凝固在下一步。使用电子天平精确称重每只鼠标。在目前的研究中，小鼠的体重在手术前的20至25克范围内。
如前所述，手术小鼠的诱导麻醉，然后通过合适的电剪器剃掉颈部和每只耳朵之间的空间。检查鼠标正在睡觉，鼠标头被堵住了。在下背部用26针注射100微升丁丙诺啡，每公斤0.1毫克，以避免觉醒后疼痛。
使用保护性液体凝胶防止干眼，并使用自动调节电热毯保持 37 度的电管内温度。在用防腐剂溶液处理剃光区域之前，所有接触组织的仪器都经过消毒并无菌处理。第一天，在后颈上切一个一厘米长的切口，然后沿着中线分离肌肉，进入西斯特纳磁石。
用薄剪刀切开空玻璃移液器的尖端。然后适应连接到柔性硅连接器的注射器。然后，使用精密微移液吸入玻璃移液器，将60微升血液或人工脑脊髓液转移到0.5毫升管中，将60微升的血液用于亚布拉奇出血状况，或将60微升的人工脑脊髓液转移到假象中。
对于注射，使用（例如，我们的环或一个环）将移液器插入立体定向框架上，然后缓慢地接近移液器尖端，然后使用 cisterna 磁格器在接口端向膜。使用立体定向框架的微向器，通过亚特兰托-腹膜缓慢地将移液器尖端插入 cisterna 磁石中。将移液器连接到以前填充的注射器，准备进行压力感应。
以每分钟10微升左右的低利率按压力注射，以避免急性颅内高血压。注射期间，密切监测呼吸速率和直肠温度。在注射结束时，使用微操纵器小心地脱下移液器，并在取款过程中注意没有泄漏。
实现平衡，并执行两个缝合与编织不可吸收的缝合线。手术后，立即分离并定位小鼠在下降的十二分，并在恢复期间用活毯覆盖在打开的盒子里。24小时后，再次诱导麻醉，将鼠标作为前一天安装在立体定向框架上，并小心地用微剪刀取出缝合线。
在亚特兰托-腹膜无菌之前，通过用棉棒涂抹在剃光区域和无菌溶液上进行准备。如前一天一样，以较低的速率注射30微升的血液或人工脑脊髓液。如前所述，监测呼吸速率和直肠温度。
注射结束时，小心地脱下移液器，控制抽血过程中无血漏。实现平衡，用编织的可吸收缝合线进行两个缝合。从手术后的第一天到牺牲日，体重应每天评估为一般健康灵敏的指标。
与假动物相比，表明亚布拉奇内出血的体重显著减少，表明在亚布拉奇内出血后，有一个持久的活动恢复过程和长期的病理事件。为什么死亡率不是虚假的？在第七天，在亚布拉奇出血条件下，死亡率接近30%，大多数动物在手术后一天或第四天死亡。
在人道的终点中，显著减肥优于初始重量的15%。驼背"的姿势，缓慢的运动，伤口，异常的发声或严重的侵略也是动物正在遭受的迹象。如果出现这些迹象或迹象的组合，在动物出现后数小时内加强对动物的跟踪。
如果动物的病情在48小时内恶化或没有改善，将被视为达到无法忍受的痛苦水平，并进行杀戮。在手术第一天的这个例子中，可以从样本大脑观察到，血块沿着威利斯多边形的大动脉在亚布拉奇出血主体。在手术后的第五天和牺牲前，血管间印度墨水注射允许检测大脑血管痉素对应大小脑动脉的血管收缩，用赤氧林和 eosin 的脑片着色允许测量脑血管痉血。
在这里，如此照片显微图所示，您可以观察到罗勒动脉的血管膜。在这种将血液直接注入到脑血管的模型中，我们最近展示了大脑动脉的脑血管痉附体、脑血管纤维沉积和细胞凋亡，并伴有小鼠感觉、运动和认知功能的改变。因此，它使该模型验证和特征的短期和长期事件，后亚布拉奇内出血。
它应该非常适合前瞻性识别新靶点和研究针对亚布拉奇诺类出血相关并发症的高效治疗策略。
