视交叉前，单次注射自体血以诱导大鼠模型中实验性蛛网膜下腔出血

这种蛛网膜下腔出血模型有助于我们更好地了解病理生理机制及其后果。这将有望产生治疗方法，减轻患病患者的疾病负担。该技术的主要优点是其高度可重复性，因为注射了固定量的血液。

此外，它在关键参数上类似于人类蛛网膜下腔出血。要制作ICP探头，请燃烧20毫米聚乙烯管的一端，制作圆形板并保持腔开放。然后将 1 毫米硅胶管环滑过聚乙烯管，然后将 10 毫米硅胶管连接到聚乙烯管的末端。

接下来，麻醉、插管和导管插入 Sprague Dawley 大鼠，然后将其置于立体定位框架中。进行局部麻醉后，从中线的针刺开始在尾部做一个8毫米的皮肤切口。在解剖显微镜下，钝化地分层解剖所有肌肉以识别寰枕膜。

然后使用手臂牵开器来约束颈部肌肉组织，如果需要，将牵开器放在尾部。检查无菌ICP探头是否连接到ICP探头后，用生理盐水冲洗ICP探头，确保探头中没有气泡。使用 23 号针切开寰枕膜，打一个孔以轻轻地哄骗 ICP 探头穿过膜。

轻轻拉动探头，确保其显示0至5毫米汞柱之间的脉动曲线。如果没有，请取下探头，重新检查与探头的连接，并确认流经管腔的流动。在寰枕膜包裹探针的区域，涂上两滴组织胶。

然后将一毫米的硅胶管向前移向膜，然后再涂上额外的胶水，以尽量减少ICP探头移位的风险。粘合 ICP 探头后，取下牵开器。然后，使用不可吸收的单丝4-0缝合线，在切口的尾端放置一条水平床垫缝合线，在头端放置一条简单的中断缝合线。

要放置激光多普勒探头，请在中线尾部做一个 15 毫米的切口，从眼睛前方开始。用镊子去除结缔组织和肌肉后，使用无菌棉签的末端作为胭脂来识别前膛和冠状缝合线。放置武装牵开器后，将 25 号脊髓针准确地放在前膛上的立体定位框架中并注意位置。

接下来，从前膛上取下针头。将框架向前移动 6.5 毫米。然后更换中线的针，以标记钻孔的侧面。

钻孔直到在骨骼下方识别出硬脑膜。使用直镊子，轻轻去除骨头碎片。然后用骨蜡填充腔体。

接下来，在前膛右侧三到四毫米处，就在激光多普勒的冠状缝合线的正前方，钻另一个孔。注意不要穿透硬脑膜。寻找激光多普勒可以测量血流的血管。

放置激光多普勒并检查值。最小值为 100 个助焊剂单位。如果取下显微镜后该值仍然可接受，请添加一滴胶水以固定探针。

重新检查以确认该值是否高于 80 个通量单位。为了诱发蛛网膜下腔出血，将针头轻轻地插入半球之间中线的颅骨，直到由于颅底而感到阻力。将针头缩回一毫米，以确保正确放置在视交叉前方。

为确保注射血液时获得最均匀的结果，请将针头顺时针旋转90度，使针尖指向右侧。然后取下细高跟鞋。平衡 15 分钟后，调整麻醉水平以获得 80 至 100 毫米汞柱范围内的平均动脉血压。

然后进行血气分析，以确认pH值，二氧化碳分压和氧气分压在生理参数范围内。接下来，使用带有钝23号针头的一毫升注射器，从尾导管中抽出500微升血液。为避免注入空气，请用血液填充脊髓针室的死腔。

将注射器中的血液体积调节到300微升后，将注射器连接到脊髓针。然后，牢牢抓住注射器，手动注射血液以超过平均动脉压。观察脑内压急剧上升，同时脑血流量急剧下降。

诱导蛛网膜下腔出血30分钟后，取下针头和激光多普勒探头。并用骨蜡填充腔。使用不可吸收的单丝4-0缝合线，用两条水平床垫缝合线关闭切口。

要使用ICP探头注射到大型水池中，请取下硅胶管并将针端口适配器插入聚乙烯管。为了在动物清醒时进行鞘内给药，请将针口注射器放在精密注射器上。然后通过针端口适配器进行治疗。

如果不必进行鞘内给药，请切断简单的中断缝合线。然后，用剪刀尽可能缩短ICP探头，并粘合末端，以防止脑脊液泄漏。用不可吸收的单丝4-0缝合线关闭切口。

在使用旋转杆试验评估粗大感觉运动功能时，与假动物相比，实验诱导的蛛网膜下腔出血大鼠在手术后24和48小时的表现明显更差。与假对照相比，实验大鼠基底动脉和大脑中动脉蛛网膜下腔出血两天后，对内皮素-1（内皮素-1受体家族的激动剂）的敏感性显着增加。实验大鼠的两条动脉对5-羧酰胺色胺的敏感性也表现出相似的增加，5-羧色胺受体家族的激动剂。

手术后，可以进行神经行为测试以及组织分析，包括免疫组织化学，PCR，蛋白质印迹分析仪，以分析后果和机制。