大量庞廷出血通过双注射自体血

我们提供一个协议，建立在老鼠的大规模庞然大水出血。此模型易于建立、可重复且非常成功。蒸馏注射自体大鼠的方法可用于在任何大脑区域出血。

想要尝试这些技术的人应该学习如何使用立体声轴框架，并熟悉庞廷解剖学。首先在鼠标上放置手术窗帘。沿着标记的中线用手术刀切开。

使用棉签去除任何潜在的血液。然后在头皮瓣的每一侧放置一块钳子，以暴露头骨。将棉签浸入 0.9% 盐水中，轻轻从头骨中取出结缔组织。

使用记号笔将布雷格马的中心点标记为原点。使用微型钻头进行颅骨切除术，小心地进行。完成后，从立体声框架中取出微钻。

将 100 微升汉密尔顿注射器放入立体声电子支架中。打开喷射泵开关。单击快速吸入按钮。

然后将肝素溶液吸气至100微升，并将其完全排干。将氯西丁和75%酒精手术磨砂从根部到尖端至少涂抹三次，对皮肤进行消毒，软化角质，扩张尾静脉，提高注射成功率。将头皮针灸连接到一毫升注射器上，然后将头皮针灸插入距尾尖三厘米的横向尾静脉，并取出 150 微升血液。

从一毫升注射器中取出头皮针灸，将血液输送到管中。快速工作，防止血液凝固。换手术手套

选择退出模式。将体积设置为 100 微升，并将速度设定为每分钟 200 微升。单击运行按钮，将 100 微升血液吸进汉密尔顿注射器中。

切换到注入模式，并将速度设置为每分钟一微升。推进注射器，直到尖端达到大脑表面以下9.2毫米，并注入前10微升血液。单击运行按钮。

停止注射，将注射器留在位20分钟，以防止血液流入亚拉赫诺德空间。收回注射器，直到尖端到达大脑表面以下九毫米处，然后以每分钟一微升的相同速度重新开始注射，直到残余血液完全注射。将注射器留在原位 10 分钟，以避免血液回流。

慢慢地从大脑中取出注射器。然后使用骨水泥覆盖颅骨切除孔。当水泥干燥时，用四个零聚酰胺缝合丝缝合伤口。

缝三四针后绑2个一一标准手术结。观察老鼠每15分钟，直到它完全从麻醉中恢复过来，然后用加热垫将其送回原来的笼子里。为老鼠提供免费食物和水。

共有25只动物用于控制30微升、60微升和100微升血液注射。手术后在第一天、第三天、第七天和第十四天进行行为测试。庞廷出血导致神经缺陷，如角膜反射和盘旋减少。

注射100微升血液也诱发肌痛。MRI扫描在手术后24小时进行。在血液注射组中，出血被检测为池塘 Basiler 部分带有 ISO 的低强化边缘，以稍微增压核心。

出血量随着注射量的增加而增加。大鼠在手术后24小时14天被牺牲。和两毫米厚的部分。

在注射部位周围发现出血，并在池塘底部分布。在100微升血液注射组出血周围有轻微水肿。一些老鼠在手术后三天被牺牲，石蜡部分被制成 HE 染色。

结果表明，在出血区富集的血液注射组炎症细胞中，血红蛋白仍含有完整的红血球。尝试此协议时，请务必记住注射位置。这种方法可用于在任何特定的大脑区域诱发出血。