蛛网膜下腔出血结合磁共振成像（MRI）的血管内穿孔模型

血管内穿孔模型与术后MRI相结合，可以验证出血并排除其他颅间病变。这种方法的优点之一是可以选择量化出血量以进行进一步的亚组分析。首先剃掉老鼠的脖子毛发。

在手术过程中使用眼药膏。用70%乙醇消毒皮肤，然后用Betadine或氯己定，并应用1%利多卡因。将鼠标置于仰卧位置，头部和躯干朝上。

通过在四肢上使用胶带来稳定鼠标背侧。拉伸颈部皮肤并抬高它。将颈部皮肤从下巴展开到胸骨的上边缘，并将唾液腺与相邻的结缔组织分开。

通过沿着气管一侧分离肌肉来暴露颈总动脉鞘。用牵开器或无菌纱布拭子暴露手术场，分离颈动脉并留下空闲的8-0丝缝线无需结扎，确保不会损伤迷走神经。解剖 ECA 的远端，并在远端位置将血管铰接两次。

在两次结扎的细丝段的中点脱离ECA并形成血管残端。在ICA周围留下丝绸缝合线而不关闭它。预先安排一个结扎在ECA树桩周围的细丝。

在灯丝插入成功之前不要关闭它。使用缝合线或微夹暂时关闭ICA和CCA。使用微血管剪刀，在ECA中切开一个切口，插入5-0或4-O Prolene丝，并将其推进到CCA中。

关闭 ECA 上的连字，同时分离 ICA 和 CCA 上的微夹。轻轻拉回细丝，在颅方向调整ECA残端，同时将细丝通过分叉插入ICA。将细丝尖端向内侧放置，与水平面上的气管中线成约 30 度的角度，并将其推入 ICA 内。

在ACA-MCA分岔处，观察到阻力。将灯丝向前移动最多三毫米，并穿孔正确的ACA。快速将细丝拉到 ECA 残端，使血液在蛛网膜下腔内流动。

将灯丝放在这个位置10秒钟。取出灯丝。CCA可以事先暂时关闭，以避免过度失血，然后抽取细丝。

使用预先安排的缝合线对ECA进行诉讼，如果您之前已经关闭了CCA，请重新打开CCA。肌肉震颤、同侧肌病、气喘吁吁、心律改变和尿失禁的存在可能是手术成功的支持证据。确保没有出血泄漏并对皮肤进行消毒。

缝合伤口。将小鼠放在保温箱中，等到动物有足够的意识来进行胸骨卧位。为了缓解疼痛，每毫升对乙酰氨基酚施用1.2毫克。

手术24小时后，在小鼠头部谐振器上使用啮齿动物扫描仪进行MRI，将小鼠置于37摄氏度的加热循环水毯上。首先，执行快速参考扫描，获取三个正交切片包。然后使用高分辨率 T2 加权 2D 涡轮旋转回波序列进行成像。

将数据转换为DICOM图像格式，并使用Imagej软件进行血栓的SAH分级和体积测定。为了确保正确的出血部位并排除其他颅内病变，术后24小时进行MRI扫描。根据T2加权MRI扫描量化SAH出血等级。

在检查的小鼠中，14%的动物被归类为没有SAH或出血的放射学证据的零级出血。大多数动物的出血等级在1到3之间，10%的动物表现出第四级出血，这是沿中风和/或ICH定义的SAH。根据SAH厚度量化每个SAH等级的总出血量，这有助于确定出血区域。

基于轴向SAH厚度计算的出血量显示其对应的1至3级亚组存在显着差异。在整个手术过程中，彻底解剖周围的连接组织对于缝合线的正确定位至关重要。确保ECA残端的长度足够，以便您有舒适的工作空间来连接，切开和插入灯丝。

切勿在MCA-ACA分岔前感到阻力时将灯丝向前推，以防止血管过早穿孔。