制定此协议是为了允许在放射生物学研究中尽可能接近真实的细胞辐照条件进行放射测量。通过此协议,我们可以确定细胞接收的确切剂量,使其适用于许多 X 射线设施,并可以考虑所有参数并转换为剂量计。所有辐照参数都必须设置在上游,以便最佳地获取需要物理学家和放射生物学家密切合作的剂量测量。
要进行辐照场评估,在用于辐照的支持上放置一个自行开发的量程膜,并用至少两个灰色照射膜,以获得标记良好的辐照场。使用专用扫描仪扫描自我开发的剂量计膜,并使用分析和绘图配置文件绘制 ImageJ 中的剂量配置文件。然后,标记辐照支持表面,以确保细胞容器放置在正确的位置。
要执行剂量率测量,请将修改后的细胞容器放入辐照支持外壳中,并根据支撑表面的标记将电传室放入容器的正确位置。确认所有辐照参数均已正确设置,并预辐射电离室五分钟。将电表为零,并获得 10 个一分钟的测量结果。
然后,使用公式确定空气角瘤的平均剂量率。为下游识别而对所有影片进行编号。照射前至少24小时,根据细胞容器的大小切开自我发育的量程膜。
要构建校准曲线,留出三块薄膜用于非辐照控制,并将第一片薄膜放在细胞容器内。然后,照射薄膜以获得第一个剂量点。当所有薄膜都以适当选择的剂量以三位一体进行辐照时,可以生成校准曲线。
为了测量细胞培养介质衰减和散射,选择相同的辐照时间进行所有辐照,并在无水的容器中照射三片自我发育的文量膜。接下来,将一块薄膜放入容器中,并在容器中填充与将辐照的介质体积相同的水量。必要时使用小块胶带,将容器放置在外壳内。
辐照完成后,用吸附纸擦干薄膜,并储存保护膜免受光线照射。辐照后 24 小时,在扫描仪上,将 TIFF 格式设置为 48 位红绿色蓝色,传输模式设置为每英寸 150 点,并且不选择图像校正。要加热扫描仪,在扫描仪上放置非辐照膜,并启动扫描预览。
预览结束时,启动一个分时器,等待 30 秒后再开始扫描。扫描结束时,启动90秒的制时器。同时,注册扫描并在图像J中打开图像。
在扫描中跟踪感兴趣的平方区域,并测量该区域的平均红色像素水平。在 90 秒结束时,重复扫描预览至少 30 次,以加热和稳定扫描仪。扫描仪稳定后,将胶片放入扫描仪床中心,并启动扫描预览。
在开始扫描前等待 30 秒。扫描结束时,等待 90 秒后再开始下一次扫描。然后进行测量,估计衰减器厚度,并测试不同的衰减器厚度,以找到将光束强度降低两倍的厚度。
在确定此厚度时,进行了五次测量,以评估由温度和压力校正因子纠正的平均 mRAW 值。对于此配置,发现了 0.667 毫米铜的半值层。在此具有代表性的分析中,对自开发的量程膜进行了辐照,以确定辐照场的同质表面,从而正确放置细胞容器。
为了确定细胞的确切剂量,测量的空气角膜剂量率被转换为水业力,使用水的平均质量能量吸收系数与光子流光谱上评估的空气的比例,为此分析确定为每分钟0.659灰色。在这种细胞培养介质衰减和散射分析中,自我发育的放射色素薄膜首次校准在零至三个灰色之间,在零和一灰色之间有0.25个灰色步骤,在一到三个灰色之间调整0.5个灰色步骤。然后,剂量点安装四度多体曲线。
在这里,可以观察到用于日常测量的代表性表。确保尊重所有配置参数,在正确的细胞容器内测量确实速率,并评估细胞培养介质的影响。存在若干协议来建立剂量参考测量。
关键是为特定应用程序选择适当的协议,尤其是在使用低 X 射线设施时。