Этот протокол был разработан, чтобы позволить дозиметрии измерений, которые будут выполняться как можно ближе к реальным условиям облучения клеток для радиобиологических исследований. С помощью этого протокола, мы можем определить точную дозу, полученную клетками, что делает его применимым ко многим рентгеновским средствам и может принимать во внимание все параметры и перевести на дозиметрию. Все параметры облучения должны быть настроены вверх по течению, чтобы обеспечить оптимальное приобретение дозиметрии измерения, требующих тесного сотрудничества между физиками и радиобиологом.
Для проведения оценки поля облучения поместите саморазвимую дозиметрийную пленку на поддержку, используемую для облучения, и облучит пленку по крайней мере двумя серыми, чтобы получить хорошо обозначенное поле облучения. Сканирование самодоувержяющаяся дозиметрия фильма с помощью специального сканера и использовать анализ и профиль сюжета, чтобы построить дозу профиля в ImageJ. Затем отметь поверхность поддержки облучения, чтобы убедиться, что контейнер ячейки будет помещен в правильное положение.
Для измерения скорости дозы поместите модифицированный контейнер клетки в корпус поддержки облучения и поместите камеру ионизации в контейнер в правильном положении в соответствии со следами, сделанными на опорной поверхности. Подтвердите, что все параметры облучения были надлежащим образом установлены и предварительно облучают ионизацию камеры в течение пяти минут. Нулевой электрометр и получить 10 одноминутных измерений.
Затем используйте формулу для определения средней дозы в воздушной керме. Номер всех фильмов для их идентификации вниз по течению. По крайней мере, за 24 часа до облучения, вырезать куски саморазвимой дозиметрии пленки в зависимости от размера контейнера клетки.
Чтобы построить кривую калибровки, отложите три части пленки для необлученных элементов управления и поместите первую пленку внутри контейнера ячейки. Затем облучить пленку, чтобы получить первую точку дозы. Когда все пленки были облучены в тройном в соответствующих выбранных дозах, кривая калибровки может быть создана.
Для измерения средней интенсивности и рассеяния клеточной культуры выберите одно и то же время облучения для всех облучений и облучьте три куска саморазвивающиеся дозиметрии в контейнере без воды. Затем поместите один кусок пленки в контейнер и заполните контейнер с тем же объемом воды, что и объем среды, который будет облучен. Используя небольшие кусочки ленты по мере необходимости, расположениять контейнер в корпусе.
Когда облучение завершено, высушите пленки абсорбцией бумаги и храните пленки, защищенные от света. Через 24 часа после их облучения, на сканере, установить формат TIFF на 48-битный красный зеленый синий и режим передачи до 150 точек на дюйм и не выберите коррекции изображения. Чтобы разогреть сканер, поместите необлучаемую пленку на сканер и запустите предварительный просмотр сканирования.
В конце предварительного просмотра запустите таймер и подождите 30 секунд, прежде чем начать сканирование. В конце сканирования запустите 90-секундный таймер. В то же время зарегистрируйте сканирование и откройте изображение в ImageJ.
Отслеживайте квадратную область интереса в пределах сканирования и измеряйте средний уровень красного пикселя области. В конце 90 секунд повторите предварительный просмотр сканирования по крайней мере 30 раз, чтобы разогреть и стабилизировать сканер. После стабилизации сканера поместите пленку в центр кровати сканера и запустите предварительный просмотр сканирования.
Подождите 30 секунд, прежде чем начать сканирование. В конце сканирования подождите 90 секунд, прежде чем начать следующее сканирование. Затем были проведены измерения для оценки толщины атенуатора, и были протестированы различные толщины атенуатора, чтобы найти толщину, которая уменьшила интенсивность пучка в два раз.
Когда эта толщина была определена, было проведено пять измерений для оценки среднего значения mRAW, скорректированного фактором температуры и коррекции давления. Для этой конфигурации был найден полумо значений слоя меди длиной 0,667 миллиметра. В этом репрезентативном анализе была облучена саморазвимая дозиметрия для определения поверхности, на которой облучение является однородным, что позволяет правильное размещение клеточного контейнера.
Чтобы определить точную дозу для клеток, измеренная доза керма воздуха была преобразована в водную карму, используя соотношение среднего коэффициента поглощения энергии массы для воды в воздух, оцениваемый по спектру фотонной флейты, который для этого анализа был определен как 0.659 серых в минуту. В этой клеточной культуре среднего затухания и рассеяния анализа, само развивающихся дозиметрии радиохромных пленок были впервые откалиброваны между нулем и тремя серыми с 0,25 серые шаги между нулем и один серый и 0,5 серые шаги между одним и тремя серыми. Затем точки дозы были оснащены полиномиальной кривой четвертой степени.
Здесь можно наблюдать репрезентативную таблицу, используемую для ежедневных измерений. Убедитесь, что все параметры конфигурации соблюдаются, что скорость делает измеряется внутри нужного контейнера ячейки, и что влияние среды культуры клеток оценивается. Существует несколько протоколов для установления эталонного измерения дозы.
Ключевым моментом является выбор соответствующего протокола для конкретного приложения, особенно при использовании низких рентгеновских объектов.
